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菊花的组织培养
课标点击:
1.说明植物组织培养的基本原理和影响花药培养的因素。
2.说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径。 3.学习植物组织培养的基本技术,进行菊花或其他植物的组织培养。 4.学习花药培养的基本技术,尝试用月季或其他植物的花药进行培养。 课题重点:
1.植物组织培养过程中使用的无菌技术。 2.选取适宜的培养材料和培养基。 课题难点:
1.植物组织培养过程中使用的无菌技术。 2.选取适宜的培养材料和培养基。 自主探究
知识点 观察与思考 归纳与总结 植物组织培1、什么是细胞分1、植物个体发育过程中,细胞在 养的基本过化? 程 上产生 的过程,称为细胞分化。 2、植物组织培养2、植物组织培养的原理是: 。 技术运用了什么 样的原理? 3、什么是愈伤组3、愈伤组织是指离体的植物组织或细胞,在培养织? 了一段时间以后,通过 形成的 、 4、什么是脱分 的薄壁细胞。 化? 4、由高度分化的植物组织或细胞产生 的 过程,叫做脱分化,或者叫做去分化。 5、什么是再分5、脱分化产生的 继续进行培养,化?
又可以重新 成根或芽等器官,这个过程叫做 1
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6、观察参考书 P32页,总结植物 离体的植物组织或细胞———→ 6、 ——→根、茎、叶 组织培养的基本 过程 用于离体培养的植物器官或组织片段,叫做 注意:在植物组织培养过程中,往往需要植物激素,人为的控制细胞的脱分化与再分化。 影响植物组1、不同植物组织1、不同植物组织或同一植物的不同部分,培养的织培养的因的培养,培养难难易程度 ,菊花的组织培养,一般选素 易程度如何?同择 的茎上部新萌生的侧枝。 一植物组织的不 同部分培养呢? 举例说明 2、离体的植物组织和细胞,对营养、环境等条件2、通过阅读P33,的要求相对特殊,需要适宜的培养基。常用的一试总结一般的培种培养基是MS培养基。其中,大量元素有 养基的成分都有等;微量元素有 等;有机物哪些? 有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、以及蔗糖等。 另外还要添加 启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素是3、对照P33页表,________。当先使用生长素,后使用细胞分裂素比较对两类激素时,实验结果:的不同的操作顺_______________________________;当先使用细序和用量,其实胞分裂素,后使用生长素时,实验结果验结果有何不_____________________;同时使用细胞分裂素、同?
生长素时,实验结果: _。生长素用量比细胞分裂素用量,比值高时,则有利于 _____________________;比值低时,则有___________;比值适中时,则促进2
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4、除了上述因素_______________。 外,对于其他条一般PH控制在 ;温度控制在 ;件有何特殊要每天用日光灯照射12小时。 求? 实验操作 实验操作过程 一、制备MS固体培养基 实验室一般使用4℃保存的配制好的培养基母液来制备 1、配制各种母液。 配制母液时,大量元素浓缩 ,微量元素浓缩 。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg/ml的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。 2、配制培养基。 配制1LMS培养基时,先将称量好的琼脂加入800mL蒸馏水,加热使琼脂熔化,然后加入蔗糖30g,去配制好的母液,依次加入,然后定容至1000mL。调节pH值,然后分装到锥形瓶中,每瓶分装50或100mL 3、灭菌。高压蒸汽灭菌 二、外植体消毒 选取菊花茎段时,要取 。 无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒灭菌。对培养材料进行表面灭菌时,一方面要考虑_______________;另一方面还要考虑植物材料的__________。不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待。一般情况下,细菌污染可能是由接种人员造成的,真菌污染可能是_________灭菌不当。
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三、接种 接种前,用体积分数70%的酒精将工作台擦拭,然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在酒精灯旁进行,并且每次使用器械后,都要用火焰灼烧灭菌 四、培养 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。培养期间定期消毒,温度控制在18-22℃,并且每天用日光灯光照12h 五、移栽 移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日,然后用清水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间,等幼苗长壮后再移栽到土壤中 六、栽培 每天要观察记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花 思考:
1、实验操作过程中为什么要进行一系列的消毒、灭菌,实验中是如何做到无菌操作的? 2、与微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方有哪些不同?
例1 (高考江苏卷)要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株,需要( )
A.具有完整细胞核的细胞 B.离体状态
C.导入外源基因 D.一定的营养物质和激素
解析:将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株利用了植物细胞的全能性。植物细胞(具有完整细胞核的细胞)只有在离体和一定营养物质及激素等的共同作用下,经细胞分裂形成愈伤组织,然后由愈伤组织再分化形成幼苗等才能表现出全能性。
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答案:A、B、D
例2 (高考广东、广西卷)下面关于植物细胞工程的叙述,正确的是() A.叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞 B.叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 C.融合植物叶肉细胞时,应先去掉细胞膜 D.叶肉细胞离体培养时,可以表现出全能性
解析:在植物组织培养过程中,细胞首先脱分化形成愈伤组织,然后重新分化形成根或芽等器官,愈伤组织的细胞特点是细胞排列疏松无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞,组织培养的理论基础是细胞全能性。
答案:A、D
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