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23谷氨酰胺合成酶的活性可被（ ）和（ ）共价修饰调节，这是存在于细菌中一种共价修饰调节酶活性的方式之一。
24判断一个纯化酶的方法优劣主要依据是酶的（ ）和（ ）。
25固定化酶的理化性质会发生变化，如Km（ ），Vmax（ ）等。 二、是非题
1 与非酶反应相比，酶反应能使更多的底物变成为产物。（ ） 2 酶影响它怕催化反应的平衡的到达时间。（ ）
3 辅基与辅酶的区别只在于它们与蛋白质结合的牢固程度不同，并无严格的界限。（ ） 4 氧化酶都含有细胞色素。（ ）
5 酶反应最适pH只取决于酶蛋白本身结构。（ ）
6 在极低底物浓度时，酶促反应初速度与底物浓度成正比。（ ） 7 做为辅因子的金属离子，一般并不参与酶活性中心的形成。（ ） 8 底物与酶的活性中心靠共价键结合，以提高催化效率。（ ）
9 测定反应的最适温度时，先将酶在不同温度下保温一段时间，然后在30℃下测定酶活性。（ ）
10 Km值是酶的一种特征性常数，有的酶虽可以有几种底物，但其Km值都是固定不变的。 11 酶原激活作用是不可逆的。（ ）
12 某些酶的Km值可因某些结构上与底物相似的代谢物的存在而改变。（ ） 13 反竞争性抑制剂不会改变酶的最大反应速度。（ ） 14 丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。（ ）
15 用增加底物浓度的办法可以部分或全部解除酶的非竞争性抑制。（ ） 16 酶反应中，底物类似物的抑制作用与过量底物抑制作用的机制基本上是相同的。（ ） 17 核酶只能以RNA为底物进行催化反应。（ ） 18 ATP是磷酸果糖激酶的底物，因而高ATP可以加快磷酸果糖激酶催化F-6-P生成F-1,6-2P的速度（ ）
19 蛋白质磷酸化和去磷酸化是可逆反应，但其可逆反应是由不同种酶催化完成的。（ ） 20 限制性内切核酸酶是能识别数个（一般为4到6个）特定核苷酸序列的DNA水解酶。21磷酸化酶激酶从ATP中获得一份磷酸，而变得活化。（ ）
22 利用过渡态类似物为半抗原，免疫动物获得抗体，从抗体中筛选具有催化活性的免疫球蛋白，这是迄今为止获得抗体酶的唯一方法。（ ） 23 负协同性不能用MWC（序变模型）理论解释。（ ）
24 别构调节物的存在能改变酶与底物的结合常数，但不改变酶的最大反应速度。（ ） 25 别构酶作为多酶系统的调节酶常常位于系统的前面，催化限速反应。（ ） 26 别构酶的特点之一是其催化活性受其构象变化的调节。（ ） 27 所有别构酶都具有S形的动力学曲线。（ ） 28 具有正协同效应的酶其Hill系数总是小于1的。（ ） 29 同工酶往往具有相同的电泳迁移率。（ ）
30对于多酶体系，正调节物一般是别构酶的底物，负调节物一般是别构酶的直接产物或代谢序列的最终产物。（ ） 三、选择题
1在测定酶活力是，用下列哪种方法处理酶和底物才合理（ ）
A 其中一种用缓冲液配制即可 B 分别用缓冲液配制，然后混合进行反应 C 先混合，然后保温进行反应
D 分别用缓冲液配制，再预保温两者，最后混合进行反应
2 假定一种酶只有当某一特定的组氨酸残基侧链未被质子化时，酶分子才具有活性，降低pH对于该酶会发生下列哪一种类型的抑制作用。（ ）
A 反竞争性 B 非竞争性 C 竞争性 D 混合型 3 酶的纯粹竞争性抑制具有下列哪种动力学效应（ ） A Vmax不变，Km增大 B Vmax不变，Km减少 C Vmax增大，Km减小 D Vmax增大，Km不变 4 酶与底物分子间的关系可以恰当地表述成（ ）
A 一种临时性结合 B 通过共价键的一种稳定结合 C 酶在其中发生永久性改变的一种结合 D随机的非互补结合
5 已知胰凝乳蛋白酶的转换数是100s-1，DNA聚合酶是15s-1。下列说法正确的是（ ） A 胰凝乳蛋白酶的底物结合常数高于DNA聚合酶
B 胰凝乳蛋白酶反应速度比DNA聚合酶反应速度更大
C 在一定的酶浓度和饱和底物水平下胰凝乳蛋白酶反应速度比DNA聚合酶在相同条件下更低
D 在饱和底物水平下，胰凝乳蛋白酶的反应速度大约是DNA聚合酶反应速度的6.7倍 6羧肽A催化底物水解的过程包括（ ） A结构重排将必需氨基酸残基靠近敏感键 B 形成一个C端环肽的共价中间物
C 活性部位Tyr残基脱质子形成亲核作用
D 活性部位的结合的活化水被底物待裂解肽键的羰基氧置换 7 若某酶特性按照典型的米氏动力学公式，米氏常数值可以从反应速度对底物浓度所作的双倒数图形中的（ ）求得
A 曲线的拐点 B 曲线的斜率
C 曲线在x轴上的截距的绝对值 D曲线在x轴上的截距的绝对值的倒数 8 在胰凝乳蛋白酶催化期间Asp102和His57的作用是（ ） A 中和其他侧链上的电荷 B 质子穿梭 C 保持疏水性口袋打开 D 夹紧底物进入活性部位
9天冬氨酸转氨甲酰磷酸合成酶（carbamoyl phosphate synthetase Ⅱ）是（ ） A 别构酶 B 受GDP/GTP调节
C 单体酶 D 天冬氨酸生物合成途径的限速酶
10下列几种胃肠道酶多数是以无活性的酶原形式分泌出来的，例外的一种是（ ） A 胰凝乳蛋白酶 B 胰蛋白酶 C核糖核酸酶 D 羧肽酶 11 羧肽酶含有的金属离子是（ ）
A 铁 B 镁 C 锌 D 铜
12 下列酶中属于丝氨酸为活性中心的蛋白水解酶是（ ） A 木瓜蛋白酶 B 弹性蛋白酶 C 羧肽酶 D 菠萝蛋白酶
13 实验室合成多肽除了化学合成外，还可以利用酶催化进行酶促合成。目前酶促合成多肽所用的酶类是（ ）
A 蛋白水解酶 B 蛋白激酶 C 氨基转移酶 D 氨基酸-tRNA连接酶
14 TPCK（N-对甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲基酮）是下列哪个酶的亲和标记试剂（ ） A 胰蛋白酶 B 胰凝乳蛋白酶 C 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 D 溶菌酶
15 二异丙基磷酰氟专一地不可逆抑制（ ）
A 丝氨酸蛋白酶 B 巯基蛋白酶 C 天冬氨酸蛋白酶 D 溶菌酶
16胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶的裂解专一性部分地依赖于（ ） A 催化Ser接近专一性口袋
B 专一性口袋的大小、形状和电荷 C 氧阴离子与专一性口袋之间的距离 D 专一性口袋中存
17 在溶菌酶催化反应中，起稳定形变底物正碳离子的残基是（ ） Aglu-35 Basp-52 C N端NH2 D C端COO- 18 端粒酶（telomerase）是属于（ ）
A限制性内切酶 B DNA聚合酶 C RNA聚合酶 D 肽酰转移酶 19 酶促反应降低反应活化能的能量来源是（ ） A 底物化学链的断裂可释放的化学能 B底物形变能 C 酶与底物结合能 D 酶构象变化所释放的能量
20别构酶与不同浓度的底物发生作用，常呈S形曲线，这说明（ ） A 别构酶是寡聚体 B 别构酶催化几个独立的反应并最后得到终产物 C 与单肽链的酶相比，别构酶催化反应的速度较慢
D 别构酶结合一个底物后，将促进与下一个底物的结合，并增强酶活力 四、问答及计算题
1何为酶的活力和比活力？测定酶活力时应注意什么？为什么测定酶活力时以测定初速度为宜，并且底物浓度远远大于酶浓度？
2已糖激酶溶液在45℃，12min内会丢失50%活性。但是当有大量底物葡萄糖存在时，该酶在45℃只丢失3%活性。试解释此现象。
3 甲醇对人体毒性很大，只要喝下30mL即可致死。甲醇的毒性不是由于其本身有毒而是其代谢产物甲醛。在肝脏醇脱氢酶作用下甲醇可以迅速氧化为甲醛。对于甲醇中毒者的医疗是给病人以乙醇，乙醇的给量在正常人身上可引起中毒反应，试解释这种处理为什么有效？ 4将下列反应的抑制剂分类，如果是可逆的，则注明竞争性或非竞争性。 （1）琥珀酸 + FAD ? 延胡索酸+ FADH2；抑制剂：丙二酸 （2）次黄嘌呤 + O2 + H2O ?黄嘌呤；抑制剂：别嘌呤醇
（3）铅中毒引起低血色素小红细胞性贫血。它可抑制合成血红蛋白的酶，这种抑制类型是什么？
（4）乙酰胆碱 + H2O → 乙酸 + 胆碱；抑制剂：DFP
（5）某些细菌不能利用叶酸前体，而是通过把P-氨基苯甲酸（PABA）连到喋呤上，再加上谷氨酸来合成叶酸。磺胺可以抑制这种合成过程的酶，磺胺的抑制属于何种类型？ 5 有一种蛋白水解酶作用于数种人工合成底物，为了比较这些不同的底物和酶的亲和力的差异，应该怎样来说明它？
6 什么是核酶（ribozyme）和抗体酶（abzyme）？它们和酶（enzyme）有什么不同？
7 decamethonium是一种用于肌肉松弛的药物，是乙酰胆碱酯酶的抑制剂，这种抑制作用可以通过增加乙酰胆碱的浓度来逆转或解除。请问这种药物是否与酶共价结合？属于哪种类型的抑制剂？并解释为什么可以通过增加乙酰胆碱的浓度来解除抑制？乙酰胆碱酯酶也可以被DFP失活，因为DFP可以与酶的Ser残基共价结合，但是decamethonium可以对酶起保护作用。在一定量的酶和DFP存在时，decamethonium可以使酶失活的速度降低，请解释。 8 （1）为什么某些肠道寄生虫如蛔虫在体内不会被消化道内的胃蛋白酶，胰蛋白酶消化？
（2）为什么蚕豆必需煮熟后食用，否则容易引起不适？
9甘油醛-3-磷酸脱氢酶，相对分子质量为4万，由4个相同亚基组成，每个亚基上有一个活性位点，在最适条件下，5ug纯酶制品每分钟可以催化2.8umol甘油醛-3-磷酸转化为甘油酸-3-磷酸。请计算酶的比活力和单个活性位点的转换数。
10α-糜蛋白酶（Mr 24 000）可以水解苯甲酰-L-酪氨酸乙酯。比活为45.0umol/min/mg酶。已知α-糜蛋白酶只有一个活性位点。求转换数。
11 （1）对于一个遵循米氏动力学的酶而言，当[S] = Km时，若υ= 35umol/min，Vmax是多少umol/min？
（2）当[S] = 2×10-5mol/L，υ= 40umol/min，这个酶的Km是多少？
（3）若I表示竞争性抑制剂，KI=4×10-5mol/L，当[S] =3×10-2mol/L和[I]= 3×10-5mol/L时，υ是多少？
12 在不同底物浓度的反应体系中，分别测有无抑制剂存在时的υ，数据如下：
-4
[S] 无I 有I（2.2×10mol/L）
-4
mol/L(×10) v(μmol/min) v(μmol/min) 1.0 28 17 1.5 36 23 2.0 43 29 5.0 65 50 7.5 74 61
求有无抑制剂存在时的Vmax和Km(Kˊm),并判断这种抑制剂是什么类型的抑制剂。 13 称取25mg蛋白酶粉配制成25mL酶溶液，从中取出0.1mL酶液，以酪蛋白为底物，用Folin-酚比色法测定酶活力，得各每小时产生1500ug酪氨酸。另取2mL酶液，用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2mg。若以每分钟产生1ug酪氨酸的酶量为1个活力单位计算，根据以上数据，求出：（1）1mL酶液中所含蛋白质量及活力单位；（2）比活力；（3）1g酶制剂的总蛋白量及总活力。
14 神经毒气二异丙基氟磷酸（DFP）在一些酶中与丝氨酸的-OH反应生成HF和磷酰酯，1949年E.F.Jansen和同事们所作的化学酶修饰实验中，胰凝乳蛋白酶（Mr=25 000）首先在P标记的DFP中温育，然后用强酸将其水解。最后分离得到的氨基酸组分中每25 000g胰凝乳蛋白酶中有1mol标记的O-磷脂酰。从上述实验可以得到有关活性位点的氨基酸组成的什么信息？
15 乙醇脱氢酶催化各种醇氧化为相应的醛。如果底物浓度和酶量确定，下列底物的反应速率不同：甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、环已醇、苯酚。以反应速率降低的顺序将上述底物重新排列并解释排列的原因。
参 考 答 案
一、填充题
1酶蛋白 辅酶因子 酶蛋白 辅酶因子 2 凹穴 疏水 3 核酶（具有催化作用的RNA） 4酶的辅助因子 直接的激活剂 5 2 4 5 6 碱性氨基酸 碱性 7 n 小 8 远远超过酶浓度 最适温度 最适 初 9 酶的活力单位数 10 81 11 绝对 立体 12 –1/Km 1/Vmax 13 亚基解离
14 正碳离子 五价磷过渡态 Zn2+-活化水 四面体肽键 氧阴离子 活化水
15 无酶时不反应 被靶酶专一性激活 与靶酶反应必须比解离更为迅速，即K1＞＞Kdis 16 最慢的 第一步反应 17 酶活性中心 18 别构酶 共价调节酶 齐变 序变 19丝氨酸 20蛋白激酶 蛋白磷酸酯酶
21糖基化 乙酰化 γ-羧基化 ADP-核糖基化 22天冬氨酸 组氨酸
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