细菌-酵母-霉菌的形态与菌落特征观察

制片时易被破坏，不利于观察其完整形态。

霉菌在固体培养基上生长成棉絮状（毛霉），蜘蛛网状（根霉），绒毛状（曲霉）和地毯状（青霉）的菌落。其繁殖方式多为无性繁殖和少数有性繁殖霉菌的菌丝体及其菌落形态特征是霉菌分类，鉴定的重要依据。

三、实验材料

1．菌种：大肠杆菌、酵母菌、根霉、青霉、黑曲霉。 2．试剂：0.1%美蓝染色液、乳酸石炭酸棉蓝染色液。 3．仪器与其他用具：光学显微镜、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、镊子。

四、实验步骤

1．细菌的菌落特征观察。

2．（1）酵母菌死活细胞的鉴别：在载玻片中央加1滴美蓝染色液，然后按无菌操作以接种环挑取少量酵母菌苔与染色液混匀，染色2~3min。染色液不宜过多或过

少，否则在加盖玻片时菌液溢出或有气泡。另取一清洁盖玻片，将一边与菌液接触，以45度角缓慢覆盖菌液。将制片先用低倍镜，再用高倍镜观察，区分死细胞（蓝色）、活细胞（无色）、老龄细胞（淡蓝色）。

（2）酵母菌的菌落特征观察。

3．（1）霉菌的形态观察：乳酸石炭酸棉蓝浸片法。在载玻片上滴1滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，用接种环（或镊子）从霉菌菌落边缘挑取少量已产孢子的菌丝，置于载玻片上的染液中，小心地将菌丝分散开。盖上盖玻片（勿压入气泡和移动盖玻片，以免影响观察），置于低倍镜和高倍镜下观察三类霉菌内容如下：

① 根霉：用低倍镜观察孢子囊梗、囊轴等，用高倍镜观察孢子囊孢子的形状、大小。

② 曲霉：在高倍镜下观察菌丝有无隔膜，分生孢子着生位置，辨认分生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子。

③ 青霉：在高倍镜下观察菌丝有无隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生孢子的形状等。 （2）霉菌的菌落特征观察。

五、实验结果

1．大肠杆菌的菌落特征观察：小菌落（直径1~2mm），菌落边缘整齐，圆形，表面有光泽、湿润、光滑、呈灰白色。

2．（1）酵母菌死活细胞的鉴别：无色为活细胞，蓝色为死细胞。

（高倍镜下的酵母菌）

（2）酵母菌的菌落特征观察：小菌落（直径1~2mm），菌落表面光滑、湿润、粘稠，易挑起，菌落质地均匀，