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40．请简要说明Folin-酚法测定蛋白质含量的原理。当用该法测定某一蛋白溶液的浓度时，发现因所用标准蛋白质种类不同，测定结果存在差异，请说明原因。

【参考答案】此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深蓝色的原因是：在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。 Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原，产生深蓝色（钼兰和钨兰的混合物）。在一定的条件下，蓝色深度与蛋白的量成正比。

Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起，因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外，不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同

【考查知识点】Folin—酚试剂测蛋白质含量

八、分析论述题：41～42小题，每小题13分，共26分。

41．研究表明，当细胞中软磷脂酸从头合成加快是，葡萄糖分解也加快。请分析葡萄糖分解加快的原因。

【参考答案】脂肪酸主要从乙酰CoA合成，凡是代谢中产生乙酰CoA的物质，都是合成脂肪酸的原料，机体多种组织均可合成脂肪酸，肝是主要场所，脂肪酸合成酶系存在于线粒体外胞液中。但乙酰CoA不易透过线粒体膜，所以需要穿梭系统将乙酰CoA转运至胞液中，主要通过柠檬酸-丙酮酸循环来完成。

脂酸的合成还需ATP、NADPH等，所需氢全部NADPH提供，NADPH主要来自磷酸戊糖通路。

【考查知识点】脂肪酸从头合成与糖类代谢

42．试分析真核生物呼吸链氧化磷酸化与糖酵解中底物水平磷酸化有何不同。 【参考答案】底物水平磷酸化是在被氧化物的底物上发生磷酸化作用即底物被氧化过程中，形成某些高能磷酸化合物的中间产物，通过酶作用可使ADP生成ATP。直接生成ATP。糖酵解第一次底物水平磷酸化：甘油酸-1，3-二磷酸和ADP 在甘油酸磷酸激酶和镁离子的作用下ATP和甘油酸-3-磷酸和ATP。

电子传递体系磷酸化：当电子从NADH或FADH2经过呼吸链传递给氧形成水时，同时伴有ADP磷酸化成ATP。基本上看到有NADH，NADPH或FADH2,FMNH2,就是电子传递体系的磷酸化。这个例子很多：三羧酸循环中异柠檬酸氧化脱羧形成阿发酮戊二酸。