河南省天一大联考2018届高三上学期期末考试理综生物试题带答案

往往较值偏小，原因是______________________。有人认为，此处统计的菌落总数实际上仅为糕点样品中总细菌数的一部分，理由是_________________________________。 【答案】 (1). 调pH (2). 高压蒸汽灭菌锅 (3). 单个菌落 (4). 稀释涂布平板l06 (6). 少数菌落可能是由两个或多个细菌形成的每种细菌需求的营养物法 (5). 4×

质和生长条件不同 (7). 培养时需满足其营养、温度、pH、需氧性等条件，因而实际只能获得糕点样品细菌中的一部分

【解析】试题分析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板。据图分析，图示为稀释涂布平板法，可以用于菌种的分离和计数；稀释涂布平板法在培养基上分离、培养出微生物的单个菌落，以便于计数、移植、分离，从而达到纯培养的目的。

（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，融化后应该先调节pH、分装和灭菌，再倒平板；培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌，需要高压蒸汽灭菌锅；稀释涂布平板法接种之前需要进行的一系列稀释操作，目的是在培养基表面形成单个菌落。

（2）据图分析，0.1mL的菌液含有40个菌落，则1g样品含有的菌落数

=40×100×10×10×10=4×l06个；由于少数菌落可能是由两个或多个细菌形成的，因此该结果pH、往往较值偏小。每种细菌需求的营养物质和生长条件不同，培养时需满足其营养、温度、需氧性等条件，因而实际只能获得糕点样品细菌中的一部分。

12. 科学家发现胡萝卜中存在冷诱导的抗冻蛋白，克隆其cDNA，通过基因工程可用来改良植物的抗寒性。研究发现植物内源抗冻基因AFP基因更适宜在植物体内表达，比昆虫、海洋动物等的抗冻基因有更多的优点。下图为利用胡萝卜的AFP基因培育抗寒性强的番茄植株的过程。请据图回答下列问题：

（1）以幼小胡萝卜植株细胞中的mRNA为材料获得抗冻蛋白cDNA，要依据__________原则。利用PCR技术扩增AFP基因时，需要加入两种引物，原因是____________________酶只能从引物的3′端延伸DNA链，用两种引物才能确保DNA的两条链同时被扩增，该酶只能特异地复制处于__________之间的DNA序列，一个DNA分子经三轮复制以后，含有两

种引物的DNA分子有__________个。

（2）将AFP基因导入植物细胞时，目前常用的目的基因载体是Ti质粒，AFP基因必须插入该基因载体的__________上。将重组AFP基因的表达载体导入农杆菌，再感染番茄细胞，可经过__________技术形成转基因植株。

（3）若要在个体水平上检测抗寒性强的番茄植株是否培育成功，请写出检测思路。_________________。

(1). 碱基互补配对 (2). 热稳定DNA聚合 (3). 两个引物 (4). 【答案】（或Taq）6 (5). T-DNA (6). 植物组织培养 (7). 将获得的转基因植株放在低温(寒冷）环境中培养，若该植株能正常生长繁殖，则表明抗寒性强的番茄植株培育成功

【解析】试题分析：据图分析，将胡萝卜AFP基因（目的基因）与Ti质粒重组，构建基因表达载体，导入农杆菌，利用农杆菌感染发，将目的基因插入到番茄细胞中，最终获得了抗寒性较强的番茄植株。

（1）以mRNA为模板获得cDNA的过程为逆转录过程，该过程遵循碱基互补配对原则，需要逆转录酶的催化；利用PCR技术扩增AFP基因时，需要加入两种引物，原因是热稳定DNA聚合酶只能从引物的3′端延伸DNA链，用两种引物才能确保DNA的两条链同时被扩增，该酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列，一个DNA分子经三轮复制以后，含有两种引物的DNA分子有6个。

（2）利用农杆菌的Ti质粒作为运载体时，必须将目的基因插入其T-DNA上；导入目的基因的番茄细胞可以通过植物组织培养技术形成转基因植株。

（3）在个体水平上检测抗寒性强的番茄植株，可以将获得的转基因植株放在低温(寒冷）环境中培养，若该植株能正常生长繁殖，则表明抗寒性强的番茄植株培育成功。