中药化学实验全新教材编写

的共性和个性进行提取分离？

（3） 什么叫生物碱的假阳性沉淀反应？如何排除干扰因素？ （4） 怎样防止和排除乳化现象的发生？

实验三 虎杖蒽醌类成分的提取分离及鉴定

虎杖又名阴阳莲、土地榆、苦杖，为蓼科植物虎杖（Polyganum cuspidtumsieb et Zuce）的根茎。有活血化淤、清热解毒、祛痰止咳等功效。近年类用于治疗黄疸、低血脂、高血小板，并可治疗慢性支气管炎及烧伤等。虎杖中含大量的蒽醌类成分和二苯乙烯类成分，其主要已知成分的结构和理化性质如下：

1.大黄素（Emodin）：橙黄色针晶，其mp. 256—257℃，能升华，易溶与乙醇、氨水、碳酸钠和氢氧化钠水溶液中，几乎不溶于水。

2.大黄酚（Chrysophanol）:金黄色六角形片状结晶（丙酮）或针晶（乙醇），mp. 196—197℃能升华，易溶与苯、氯仿、乙醚、醋酸、乙醇，难溶于石油醚，不溶于水、碳酸氢钠和碳酸钠水溶液，可溶于氢氧化钠及热碳酸钠水溶液。 3.大黄素甲醚（Phgsion）：金黄色针晶，mp.207℃，能升华，可溶于氯仿、吡啶、甲苯、微溶于醋酸、乙酸乙酯、乙醚，不溶于水，易溶于氢氧化钠溶液。 4.白藜芦醇（Resveratrol）：无色针晶，mp. 256—257℃， 261—262℃，能升华，易溶于乙醚、氯仿、甲醇、乙醇、丙酮等，白藜芦醇苷有称为虎杖苷，mp. 255℃，323℃，微溶于冷水，易溶于热水、甲醇、乙醇、丙酮等；可溶于乙酸乙酯，难溶于乙醚；苷元可溶于氢氧化钠碳酸钠水溶液。 5. 虎杖中还含有少量大黄素-8-葡萄糖苷、甾醇等。

OHOOHH3COR

大黄素 R=OH

大黄酚 R=H大黄素甲醚 R=OCH3

OHHOCHCH 二苯乙烯衍生物

白藜芦醇R=H 白藜芦醇苷R=C3H1105 一、目的要求

1.了解苷和苷元的提取分离方法

2.掌握PH梯度萃取法在分离中草药有效成分中的应用； 1. 掌握蒽醌类化合物的鉴定方法 二、基本原理

利用苷和苷元都溶于乙醇的性质，用乙醇提取总成分。根据苷和苷元溶解性能不同，以乙醚分出极性小的苷元游离蒽醌，以水分离出极性大的苷类成分，进一步用PH梯度萃取法使酸性强弱不同的蒽醌得以分离。 三、提取分离

虎杖根茎粗粉100g(三个组共用)

置1000ml圆底烧瓶，用乙醇回流提取3次 （500ml,1.5h,2χ300ml,1h） 滤过，合并滤液 滤液

减压浓缩至无醇味

浓缩物（第一次）

加水30ml转入分液漏斗中，乙醚萃取，第1次20ml,以后各10ml，至萃取液无色，合并萃取液

水层 乙醚层 （含蒽苷类） 加5%碳酸氢钠溶液

加活性碳2g煮沸，趁热过滤 10ml萃取水层至无色

滤液 浓缩至30ml，冷却，加乙醚5-10ml，水层 乙醚层（1）

置冰箱放置，滤过 加HCL调PH2 5%碳酸钠10ml

（缓缓滴加，搅拌） 萃取水层至无 放置使沉淀，抽滤 色 滤液 结晶 水洗至中性 30%甲醇或乙醇，热溶 黄色沉淀 OR

溶液 水层 乙醚层（2） 放冷，加活性碳脱色，滤过 加HCL调PH2 1%氢氧化钠

（缓缓滴加，搅拌） 溶液10ml 滤液 放置使沉淀，抽滤 萃取水层 浓缩，放置 水洗至中性 至无色 结晶 黄色沉淀 30%甲醇或乙醇重结晶 白色结晶（测定熔点，纸色谱鉴定） 水层 乙醚层（3）

水层 乙醚层（3）

加HCL调PH2 （大黄素、大黄素甲醚）（第二次） （缓缓滴加，搅拌）

放置使沉淀，抽滤 水洗至中性 黄色沉淀（第三次）

四、鉴定

1.蒽醌类化合物的一般鉴别反应

（1）Borntrager’s反应：取1ml乙醇提取液，加几滴10%氢氧化钠溶液，然后加0.5ml

过氧化氢溶液，加热后再加酸使成酸性，最后再碱化，观察反应过程中颜色变化。

（2）醋酸镁反应：取乙醇提取液1ml，家0.5%醋酸镁甲醇溶液0.5ml，观察是否产生橙红色或兰紫色反应。

（3）升华实验：取虎杖粉末少许，置载玻片上，玻片两端各放小火柴一根，然后再取一洁净的载玻片，放在小木棍上，注意切勿接触下面粉末，再移置有三角架的石棉网小心加热（不使药粉炭化），玻片上有升华物凝结时为止。冷却后取下盖片，使升华物面朝上，放在显微镜下观察，可见黄色针晶或羽毛状晶体，此晶体遇碱呈红色. 2薄层色谱鉴别

样品：上述三种乙醚液。

吸附剂：硅胶CMC-Na板，湿法铺板，105活化30cm。

展开剂：①苯—乙酸乙酯—甲醇（48：12：1） ②石油醚：乙酸乙酯（8：2） 显色剂：5%氢氧化钾甲醇液。 [思考与作业]

（1） 大黄中五种羟基蒽醌化合物的酸性和极性大小就如何排列？为什么？ （2） 梯度pH萃取法的原理是什么？适用于哪些中药化学成分的分离？

（3） 试分析薄层色谱图谱中各羟基蒽醌类成分的结构与Rf值的关系？

实验4 补骨脂香豆素的提取、精制与鉴定

补骨脂为豆科植物补骨脂的成熟种子，具有补肾助阳、温中止泻的作用。其有效成分为：呋喃香豆素和黄酮类。

一、补骨脂中呋喃香豆素类主要成分的结构与性质

补骨脂内酯 mp. 159—160℃ 异补骨脂内酯 mp. 138—139℃

补骨脂内酯与异补骨脂内酯均为白色针状结晶，能溶于氯仿、丙酮、苯、甲醇、乙醇、丙二醇等；微溶于水、乙醚；难溶于四氯化碳、冷石油醚中，两者皆具有升华性。 二、提取与精制

（1）补骨脂素的提取与精制

补骨脂种子粗粉（100g）

置于500ml圆底烧瓶中，加入70%乙醇回流提取 三次，每次用200ml乙醇，回流40分钟，过滤 乙醇提取液

减压回收乙醇至无醇味，放置过夜， 倾去上清液 黑色粘稠物 总量为10倍的甲醇回流提取三次， 趁热过滤

不溶物 滤液 静置过夜，抽滤

母液 补骨脂素粗品

适量甲醇溶解，加少许活性氧化铝炭，加热回流5分钟，趁热抽滤，滤液放冷析晶，滤取结晶

OOOOOO

滤液 结晶

80℃以下干燥