药物分析复习资料初稿 - 图文

药物分析复习资料

考试题型：1).选择题 1分×20=20分 2).填空题 1分×20=20分 3).判断题 1分×12=12分 4).简答(计算)题 6分×4=24分 5).综合题 10分或12分×2= 24分

《中华人民共和国药典》(2010版)收载国家药品标准，药品质量标准对其外观性状、鉴别方法(主要化学鉴别-红外光谱)、检查项目和含量限度等作了明确规定，并对影响其稳定性的贮藏条件作了明确的要求。 药典：分为一部(中药，中成药为主)、二部(化学药，制剂)、三部(生物制品规程)；包括凡例(怎样使用药典和几部药典之间的共性)、正文(质量标准)、附录(制剂通则)和索引。

药品生产质量管理规范(GMP)：是一套严密的药品生产和质量管理的规范，涉及人员、厂房、设备、原料采购、入库、检验、发料、加工、包装、成品检定、出品销售、运输、用户意见及反应处理等在内的全过程质量管理。

生物药物分析与检验的基本程序及内容： 1.取样；

2.药物的鉴别试验：确认生物药物的真伪； 3.药物的杂质检查：限量检查法和定量测定；

4,药物的安全性检查：热源、内毒素、过敏源、菌数等； 5,药物的含量(效价)测定：测定主要有效成分的含量； 6,检验报告

药物的鉴别试验是判断药物的真伪，其目的是为了证实某药物是否真正为其所标示的药物，而不是对未知物进行定性分析，不完全代表该药品化学结构的确证。

化学药物的鉴别：化学法(气体，显色，荧光)、光谱法、色谱法和生物学法。

紫外光谱操作简便，是一种常用的鉴别依据，但其专属性较差，往往需要和其他鉴别方法配合进行。 红外光谱是一种专属性很强的鉴别方法，主要用于组分单一、结构明确的原料药，特别适合于其他方法不易区分的同类药物。需与标准图谱对照，要求峰位、峰形、相对强度应一致。

色谱鉴别法：根据药物分子结构不同，其吸附或分配等性质也不同，在一定的色谱条件下产生差速迁移，根据药物分子的特征色谱行为(Rf值或保留时间)进行鉴别试验的方法。分为薄层色谱鉴别法(TLC)；高效液相色谱鉴别法(HPLC)；气相色谱鉴别法(GC)。 杂质是任何影响药物纯度的物质统称为杂质。

杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量为杂质限量，通常采用杂质在药物中所占质量比例表示，如百分之几或百万分之几(ppm)。

药物杂质限量的控制方法分为两种：限量检查法(为主)和定量测定。

定量测定法：杂质定量测定法即采用常规方法测定杂质的含量，测得值不得超过规定限量。定量测定常采用色谱法，尤其是HPLC法，也可采用滴定分析法。

对照法：系指取一定量的被检杂质标准溶液和一定量供试品溶液，在相同条件下处理，比较反应结果。采用该法需遵守平行原则。如氯化物、硫酸盐、铁盐等一般杂质检查以及杂质的薄层色谱检查均属于该法。 杂质限量=(杂质最大允许量/供试品量)×100% L(%)=[(标准溶液浓度C×标准溶液体积V)/供试品量S]×100%. L(%)=(C杂质/C样品)×100%. A=ELC (C的单位g/100mL)

计算两道，12分(题型四选二)

杂质检查是利用药物和杂质的物理性质或化学性质的差异来进行，常用的方法包括化学方法、色谱方法和光谱方法等。

色谱法：色谱法是依据药物与杂质的吸附或分配性质的差异进行的，是检查有关物质的首选方法。 主成分含量测定：内标法；外标法

杂质含量测定：加校正因子的主成分自身对照法；不加校正因子的主成分自身对照法；面积归一化法；外标法。

内标法：内标法适用于有对照品与合适的内标物的情况，一般用于药物主成分的含量测定，《中国药典》一般采用内标校正因子法。内标是样品中不含有的纯物质，测定时将内标加入到待测样品中；内标的出峰时间与待测成分的出峰时间接近，但不能与待测成分的峰发生重叠，能彼此完全分离。

其方法为1). 精密称取对照品和内标物，配成用于测定校正因子的混合对照溶液。取一定量注入

仪器，记录色谱图，测量对照品和内标物质的峰面积或峰高，计算校正因子(f)。

f =(A内标物/C内标物)/(A对照品/C对照品)；

2). 取含有内标物质的供试品溶液，注入仪器，记录色谱图，测量供试品中待测成分和内标物质

的峰面积或峰高，计算含量。

C待测物=f ×[(A待测物× C内标物)/A内标物]

外标法：外标法适用于有对照品，且进样量能够精确控制的情况，又称为对照品法。

方法：按照要求精密称取对照品和供试品，配置成溶液，分别精密取一定进行HPLC，测量对照

品溶液和供试品溶液中待测成分的峰面积，按照以下公式进行计算：

C供试=C对照×(A供试/A对照)

加校正因子的主成分自身对照法：该法主要用于杂质的测定，测定过程中以主成分本身作为对照，通过主成分与杂质之间的关系对杂质进行定量。

准备阶段需要使用杂质对照品，建立杂质与主成分的关系(校正因子)；

f =(A主成分/C主成分)/(A杂质/C杂质)

测定阶段不需要使用杂质对照品，利用供试品溶液本身作为杂质的对照； C供试品杂质=f ×[(A供试品杂质×C对照品主成分)/A对照品主成分]

方法评价：本法的优点是测定时既省去了杂质对照品，而又考虑到了杂质与主成分响应因子的不

同所引起的测定误差，准确度较好。缺点是在方法建立时，仍然需要有杂质对照品。

不加校正因子的主成分自身对照法：本法多在单一杂质含量少、无法得到杂质对照品、杂质结构与主成分相似，即杂质与主成分的响应因子基本相同的情况下适用。测定过程不需要计算校正因子(认为f=1)，直接将利用主成分自身作为对照，对杂质进行定量。

面积归一化法：面积归一化法通常只适用于供试品中结构相似、相对含量较高且限度范围较宽的杂质含量的粗略考察，如异构体相对含量的检查。

方法：取供试品溶液适量，注入色谱仪，记录色谱图。测量各峰的面积和色谱图中除溶剂峰以外

的总色谱峰面积，计算各杂质峰面积占总峰面积的百分率，应不得超过限量。

方法评价：面积归一化法简便快捷，但因各杂质与主成分响应因子不一定相同，杂质量与主成分

量不一定在同一线性范围、仪器对微量杂质与常量主成分的积分精度及准确度不相同等因素，局限性较大，一般不宜作为微量杂质的检查。

薄层层析法：具有设备简单、操作简便、分离速度快、灵敏度和分辨率高等优点。分为：

1). 杂质对照品法：根据杂质限量，取供试品溶液和一定浓度杂质对照品溶液，分别点样于同一薄层板上展开，供试品溶液除主斑点外的其他斑点与杂质对照品相应主斑点进行比较，不得更深。适用范围：通常

用于已知杂质并能制备杂质对照品的情况，用来检查供试品中与对照品相同的杂质。

2). 供试品溶液自身稀释对照法：先配置一定浓度的供试品溶液，然后将供试品溶液按限量要求稀释至一定浓度作为对照溶液，将供试品溶液与对照溶液分别点样于同一薄层板上展开，供试品溶液所显示杂质斑点与自身稀释对照溶液的主斑点比较，不得更深。适用范围：适用于杂质的结构不确定，或虽然结构确定但没有对照品的情况，但仅限于杂质斑点与主成分斑点颜色相同或相近情况下使用。

3). 杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照并用法：当药物中存在多个杂质时，若已知杂质有对照品，则采用杂质对照品检查；共存的未知杂质或没有对照品的杂质，则可同时采用供试品溶液自身稀释对照法检查。

4), 对照药物法：当无适合的杂质对照品，或者供试品显示的杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异，难以判断限量时，可采用与供试品相同的药物作为对照。对照药物中所含待检杂质需符合限量要求，且稳定性好。

系统适用性试验：为了确保能够将药物与杂质分离开，常需确认色谱系统的分离效能。 光谱方法：紫外-可见光分光光度法、红外分光光度法(主要用于鉴别)。

红外分光光度法：红外分光光度法在杂质检查中主要用于药物中无效或低效晶型的检查。

药物的含量系指药物中所含主成分的量，通常运用化学、物理学或生物学的方法进行测定，它是评价药物质量的主要手段，也是药品质量标准的重要内容。

药物含量测定分为两大类：基于化学或物理学原理的“含量”测定和和基于生物学原理的“效价”测定。 《中国药典》正文各品种的含量测定或定量检查项以及附录所收载的用于药物含量、溶出或释放量测定的定量分析方法主要包括容量分析法、光谱分析法和色谱分析法。 容量分析法(滴定法)：直接滴定法和间接滴定法

生成物滴定法：被测药物与化合物A反应，定量生成化合物B，再利用滴定液滴定化合物B。

剩余量滴定法：又称为回滴定法，先加入过量的滴定液A，与待测物反应后，用滴定液B滴定剩余的滴定液A。示例：盐酸半胱氨酸的含量测定---碘量法 1). 半胱氨酸有还原性的硫基，可将碘滴定液中的部分单质碘(I2)还原为游离碘(I-)：I2(过量)+还原剂(半胱氨酸)---2I-；

2). 滴定液剩余的单质碘(I2)与硫代硫酸钠滴定液反应，同样被还原为游离碘(I-)：I2(剩余)+还原剂(硫代硫酸钠)---2I-；

3). 通过硫代硫酸钠滴定液消耗量可计算碘滴定液中剩余的单质碘的量，即可推算出与半胱氨酸反应消耗的单质碘的量，从而计算半胱氨酸的量；

4). 利用淀粉指示剂判断反应终点(注：指示剂需近终点时加入，过早加入的淀粉会吸附大量单质碘，导致蓝色不易消失，增加滴定误差)；

酶分析方法的两种类型：酶活力测定(是以酶作为分析对象，即对酶本身进行含量或活力的测定)；酶法分析(是以酶作为分析工具，用于测定样品中用一般分析方法难以检测的物质) 示例：胃蛋白酶活力测定

测定法：对照品：酪氨酸+血红蛋白+三氯乙酸

对照品调零空白：血红蛋白+三氯乙酸 供试品：胃蛋白酶+血红蛋白+三氯乙酸

供试品调零空白：血红蛋白+三氯乙酸+胃蛋白酶 注：三氯乙酸最后加。

酶联免疫法：夹心法。

电泳分析法：毛细管电泳法--受到电泳与电渗流两个方向的力。

出来的先后顺序：带正电荷>中性电荷>带负电荷。

高效液相色谱法：系统适用性试验通常包括理论板数、分离度、重复性和拖尾因子等四个指标。

1). 理论板数：色谱柱的理论板数(n)用于评价色谱色谱柱的分离效能。理论板数越高，分离效能越强。 分离度。

2). 分离度：色谱柱的分离度(R)用于评价待测组分与相邻共存物或难分离物之间的分离程度。除另有规定