中科院2006年攻读硕士学位研究生入学试题《生物化学及分子生物学》

上另一基因或遗传标记相连锁的特点进行定位。18、D。19、B。20、B ABC转运器最早在细菌质膜上的一种转运三磷酸腺苷酶，属于一个庞大而多样的蛋白家族。由于这个蛋白家族的每个成员都含有2个高度保守的ATP结合区，故命名为ABC转运器。通过结合ATP发生二聚化，ATP水解后解聚，通过构象的改变将与之结合的底物转移至膜的另一侧。21、B。22、C。23、A。24、C。25、C （17-15）×1000×10.4/3.54=5880。26、C。27、A。28、C。29、A。30、B（20-4）/4=4。 三、简答题

1、该肽含有Trp是芳香族氨基酸，在近紫外区有吸收峰λmax=280，会在280nm左右波长下有吸收峰。由于吸收辐射能而被提升到激发电子态的分子通过激发能的非辐射转移即荧光发射。因此荧光的波长要比激发光长。芳香族氨基酸如Trp，荧光发射光谱在348nm附近有发射峰，呈现较弱的荧光。

2、当胰岛素与其受即受体酪氨酸激酶体结合后，就激活胞内的酪氨酸蛋白激酶活性。激活一系列激酶，最终使蛋白磷酸酶1（PP1）活化。蛋白磷酸酶1（PP1）使糖原合酶和糖原磷酸化酶去磷酸化。即糖原合酶被激活而磷酸化酶失活。表现出的整体的生物学效应就是促进糖原合成，抑制分解。

糖尿病的发生直接原因是由于血液中胰岛素含量的不足。胰岛素缺乏，葡萄糖不能正常进入细胞滞留在血液中。而此时胰岛血糖素的浓度超过了胰岛素的浓度，一方面导致肝脏中过果糖-2，6-二磷酸的浓度下降，使糖酵解受到抑制又刺激了葡糖异生作用；另一方面又加速了糖原的降解，产生的过量葡萄糖也进入血液，这样就造成血液中的糖浓度很高，通过肾脏时，多余的糖无法被肾小管重吸收而排入尿中导致了糖尿病。

3、方法一：分光光度法。主要利用底物或产物在紫外或可见光部分的光吸收不同。选择一适当波长，测定反应过程中反映进行情况。细胞色素C再还原和氧化型的光吸收不同。当细胞色素氧化酶氧化细胞色素C时，测定光吸收的变化就可以测定酶的活力了；方法二：同位素测定法。用放射性同位素的底物，经酶作用所产生的产物，通过适当的分离，测定产物的脉冲数换算出酶的活力。用氧18标记的氧气作为底物，经酶作用后还原为含氧18的水。反应后将底物产物分离，测定脉冲数换算成酶活力。

4、如果是全保留复制机制，生长一代产生两种DNA分子各一个。一个分子双链是N15，另一个双链是N14生长二代，产生4个分子两种DNA，一分子全部含N15和3分子全部含N14没有杂和的。

5、DNA均由含ATCG四种碱基的脱氧核糖核苷酸组成，蛋白质均由20种氨基酸组成；在DNA序列与氨基酸组成对比上，三个dNTP对应一个氨基酸，且有些相同的氨基酸对应相同的三联密码子，可以推测 DNA指导蛋白质合成基本上使用同一套遗传密码，两者DNA有相同的上游控制序列，相同的起始密码子和终止密码子。在这个意义上说明生物是由进化而来的，而不是不同起源的。 四、问答题： 1、介质中球状蛋白质的折叠总是倾向与把疏水残基埋藏在分子的内部，这一现象称为疏水作用。它在稳定蛋白质的三维结构方面占有突出地位。疏水作用其实并不是疏水基团之间有什么吸引力的缘故，而是疏水基团或疏水侧链出自避开水的需要而被迫接近。蛋白质溶液系统的熵增加是疏水作用的主要动力。当疏水化合物或基团进入水中，它周围的水分子将排列成刚性的有序结构，即所谓的笼型结构。与此相反的过程使排列有序的水分子被破坏，这部分水分子被排入自由水中，这样水的混乱度增加，即熵增加，因此疏水作用是熵驱动的自发过程。 疏水作用在生理温度范围内随温度升高而加强，T的升高与熵增加具有相同得效果，但超过一定的温度后50~60度又趋减弱。因此超过这个温度疏水基团周围的水分子有序性降低，因而有利于疏水基团进入水中。

2、在生理条件下，大多数的酶不被底物所饱和，且底物浓度与Km相比要小得多 v=[Kcat/Km][E][S]

KcatA=100U/mg=100umol/mg·min=100umol·50kDa/0.001mol=5000/min Va/Vb=[KcatA/KcatB][KmA/KmB]=5

3、胆固醇的功能：⑴生物膜的组成成分，对调节膜流动性有很大作用⑵作为激素的前体，在体内转化为类固醇激素⑶形成胆汁盐促进脂类在小肠的消化吸收。

胆固醇合成中的五个中间物：乙酸、甲羟戊酸、异戊二烯衍生物、角鲨烯、羊毛固醇。 LDL，介导胆固醇的转运，将胆固醇从血液运送到靶组织细胞内；抑制靶组织的胆固醇及LDL受体的合成。

HDL，可以减少胆固醇的沉积，防止血栓形成。HDL可以回收从死亡，衰老细胞更新的细胞膜被降解血浆脂蛋白等释放到血浆中的胆固醇。其上的蛋白将其酯化为胆固醇只并将它转移到LDL。

4、先制备编码rRNA前体的DNA片段，可以将编码这个前体的DNA克隆到大肠杆菌质粒中，扩增后提取质粒。在体外构建一个RNA转录体系，转录出RNA前体。提取体系中RNA，在分有或无四膜虫蛋白质两组别，其中一组用加热，有机溶剂和蛋白酶来变性蛋白质，纯化前rRNA。待反应充分后，电泳分离，分别观察结果，如果发现在有无蛋白质的条件下，前体RNA都被分成几个不同的条带而且带型一样，可以证明前体RNA能自我剪接，而且不受四膜虫蛋白质影响。然后可以用电用来检测条带，是否发生了自剪切。条带可剪切回收，分析RNA序列，得到剪接位点。

5、最可能的原因是该转录因子是二聚体，且由相同的两个亚基构成。可以分离纯化蛋白质，用SDS-PAGE鉴定，如果凝胶上只有一条带且分子量为40kDa即可证明。

根据氨基酸的序列，相互作用281到344，每七个氨基酸有一个亮氨酸，且在该蛋白序列中富含脯氨酸和谷氨酸，这些特点说明该转录因子可能是亮氨酸拉链，依赖亮氨酸侧链间的疏水相互作用形成二聚体。

可以采用基因工程技术，定点突变每七次出现的亮氨酸残基，如果不能再形成二聚体便可以证明该推测。