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马铃薯中绿原酸的提取
Extraction of chlorogenic0.280.270.260.250.240.230.2250556065707580The concetration of alcohol%
图3-9 乙醇体积分数对绿原酸提取的影响
Fig.3-9 The effect of volume fraction of alcohol on the extraction of chlorogenic acid
由图3-9乙醇浓度对绿原酸提取的影响可知,在乙醇体积分数50-70%内,绿原酸提取
率随着乙醇体积分数的增加而增加,当达到70%时,绿原酸处于游离状态增加了组织的通透性,提取率最高.但随着乙醇体积分数的再增加,绿原酸提取率下降,这是由于醇溶性杂质、色素、亲脂性强的成分溶出量增加,这些成分与绿原酸或者酚酸类物质竞争乙醇—水分子结合,同时组织的通透性下降,从而导致绿原酸提取率降低. 3.2.2.2料液比的选择
1.601.551.50Extraction rates1.451.401.351.301.251.201:41:61:81:101:12Ratio of Sample to Solution
图3-10料液比对绿原酸提取的影响
Fig.3-10 The effect of ratio of solvent on the extraction of chlorogenic acid
图3-10显示,随着料液比的增加,乙醇水混合体系对绿原酸的提取得率呈上升趋势.当料液比达到1:8时,提取率达到最大值.料液比再增加,绿原酸提取率下降.因为有机溶剂与水的混合液可打断马铃薯酚类物质与蛋白质、多糖等物质的结合键,有利于绿原酸的
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浸提.所以随着料液比的增加绿原酸浸提率也增加;但当料液比增加到一定比例时,浸提率不再上升.
3.2.2.3提取温度的选择
1.601.551.50Extraction rates1.451.401.3520253035404550Temperature
图3-11提取温度对绿原酸提取的影响
Fig.3-11 The effect of Temperature on the extraction of chlorogenic acid
图3-11是提取温度对绿原酸提取率的影响.对于大多数情况来说,温度愈高,分子运动速率愈快,其渗透、扩散、溶解速度也加快,因而提取率愈高.但温度过高,会使绿原酸的成分发生氧化分解.由图中可知,在实验温度范围内,随着温度的升高,绿原酸提取率上升;但当温度高于40℃时,由于绿原酸在高温下易氧化分解,从而导致提取率下降. 40℃为拐点,提取率最高,故40℃为最佳提取温度. 3.2.2.4提取次数的选择
1.81.7Extraction rates1.61.51.41.31.01.52.02.53.0Times
图3-12提取次数对绿原酸提取的影响
Fig.3-12 The effect of Times on the extraction of chlorogenic acid
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由图3-12提取次数对绿原酸提取的结果表明,绿原酸的提取率随着提取次数的增加而增加. 经2次提取和第3次提取的数据比较来看,两次结果相差不大,如果进行第4次提取,那么会造成溶剂等的浪费.综合所有实验因素,乙醇水混合溶液对绿原酸经3次提取后可溶性绿原酸几乎已完全提出. 3.2.2.5提取时间的选择
1.701.651.60Extraction rates1.551.501.451020304050Time:min
图3-13提取时间对绿原酸提取的影响
Fig.3-13 The effect of Time on the extraction of chlorogenic acid
图3-13表明,在10、40 min时绿原酸提取率较高,但是10 min时的提取液十分浑浊,说明在提取液中绿原酸与其它可溶性酚酸类物质没有完全混开,而在40 min时的提取液,颜色为黄绿色且较清澈,可以知道超声波提取的较为充分. 3.2.2.6 pH值的选择
1.551.501.451.401.351.301.251.202.02.53.03.54.04.55.0extration ratesPH
图3-14 pH值对绿原酸提取的影响
Fig.3-14 The effect of pH on the extraction of chlorogenic acid
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图3-14是pH值对绿原酸提取的影响.在pH值2-5内,随着pH值的增加,绿原酸提取率逐渐下降,当达到4时,提取率最低,但pH值为5时,绿原酸提取率也不高,与pH值为4时数值相近,可以看出,在pH值2-4内,随着pH值的增加,绿原酸提取率逐渐下降,但之后,绿原酸提取率几乎不变.pH值对提取过程有较大的影响,这与绿原酸本身是一种有机酸有关.酸性条件下,有利于绿原酸的浸出.碱性条件下,一部分绿原酸可能发生水解,导致绿原酸的浓度降低.在本次课题实验中,通过调节水-乙醇-组织体系的酸度,可以打断组织体系中氢键、盐键、疏水作用力等,增加组织细胞的通透性,从而提高绿原酸的提取率.另外通过改变调节体系的pH值,可以改变浸提液中蛋白质的含量,酸性条件下不利于蛋白质的提取[4] . 3.2.3 正交实验 3.2.3.1 选出最优单因素
由图3-9、3-10、3-11、3-12、3-13以及3-14可知,影响绿原酸提取率的最佳单因素是:提取次数 > 提取温度 > 乙醇体积分数 > pH值.
经过单因素实验对超声辅助提取绿原酸所需的乙醇体积分数、提取温度、提取次数及pH值的筛选,每项因素选出3个较好的水平,乙醇体积分数60%,70%,80%;提取温度20,30,40℃;提取次数1,2,3次; pH值2,3,4.经过4因素3水平进行正交实验,正交实验结果如表3-3.
表3-2 超声波辅助提取法正交实验及结果
Table3-2 Orthogonal test and the result of ultrasonic extraction
实验号 A(提取次数) B(提取温度) C(乙醇体积分数) D(pH值) 绿原酸含量mg/g 1 1 1 1 1 1.369451 2 1 2 2 2 1.320992 3 1 3 3 3 0.981779 4 2 1 2 3 1.243458 5 2 2 3 1 1.224074 6 2 3 1 2 1.224074 7 3 1 3 2 1.054468 8 3 2 1 3 1.141694 9 3 3 2 1 1.461524
由表3-2可以看出,在9组实验中,第9组实验中绿原酸的含量最高,为1.461524 mg/g ,第一组次之,为1.369451 mg/g ,第3组最小,为0.981779 mg/g;4个因素的最佳水平组合为A3B3C2D1 ,即提取次数对绿原酸的提取效果影响最大,提取温度次之,其次是乙醇
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