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黑色转兰绿后.再加热20~30min,时问短了,消化不完全,时间长了硫酸铵分解挥发,均影响结果的准确。
消化液加碱蒸馏:接好蒸馏装置,检查各接口是否紧密不会漏气,再加入碱液,开冷凝水、接通电源,开始蒸馏。
滴定与计算:蒸馏至硼酸吸收液至150—200ral,检查冷凝管尖液体呈中性,表示氨已完全蒸出,取下接收瓶用标准酸溶液滴定。粗蛋白的计算应在计算全氮后乘以蛋白质换算系数。
③粗淀粉的测定
酸水解法:于称好的样品中加入30ml 6mol/L的盐酸,l00ml水,于沸水浴中回流水解2—3h。检查淀粉是否水解完全。可取1滴水解液与1滴稀碘液混合,若呈兰色,表示水解未完全。
水解完成后,中和至中性,用裴林氏法测定出还原糖的含量。乘上0.9换算系数即为淀粉的含量。
酶水解法:于称好的样品中,加入0.5%淀粉酶20m1.于55—60℃的水浴中水解lh,用裴林氏法测出还原糖的含量,乘上0.9换算系数即为淀粉含量。 ④粗脂肪的测定
测定脂肪含量的方法有:索氏抽提法、酸水解法、碱水解法、哥特罗兹法等。对固体含游离脂肪的样品最常用的是索氏抽提法。
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索氏抽提法测定脂肪含量时常用试剂是乙醚,因为乙醚沸点低,溶解脂肪较石油醚更好。
测定样品中的脂肪时,如样品水分含量大,应称取好样品后,先干燥至水份〈2%,再放人索氏抽提器中去抽提脂肪。因为水分有碍有机溶剂对样品的浸润。
索氏抽提法测定脂肪含量时,水浴温度一般不宜超过55℃,一般控制在每小时回流乙醚7次左右为好。 ⑤灰分的测定
测定灰分含量的方法通常采用灼烧称量法。称取一定量的样品(液体样品先于水浴上蒸干)。先以小火加热(电炉上)使样品充分炭化至无烟,然后置马福炉内于500~550℃灼烧,称量时要求前后两次称量相差不超过0.5mg即为恒重,灼烧温度不宜超过600℃,否则样品中的钾、钠挥发掉,而使结果不准确。 2)酿造用水的检验 ①浊度的检测
1mg一定粒度的硅藻土在1000ml水中所产生的浑浊程度称为1度。水的浊度检测常用的是目视比浊法。
浊度标准的配制:用1%硫酸肼和10%~0基四胺溶液混匀后.还需在25±3℃的环境中放置24h才能使用。 ②水的硬度检测
水的总硬度以每升水中所含的碳酸钙的毫克数来表示。
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其测定方法通常用EDTA一2Na法,选用0. 5%的铬黑T为指示荆,在溶液温度为30—40℃,终点转变更清楚。 ③铵根的检测
水中的铵根含量可以反映水质被废水、粪便、大气污染的程度。通常用奈氏比色法来测定。
奈氏试剂的配制应选用碘化汞、碘化钾和氢氧化钠。在避光保存下其稳定期为一年。 3)酿造用食盐的检验 ①食盐中水分的涮定
食盐中的水份以两种形式存在,一种是吸附水,这种水分可在105±1℃屯干燥时失去;另一种是化学结合水,即结晶水,这种水在105℃干燥时会有小部分失去,大部分的结晶水只有在200℃以上才会全部失去。通常食盐中的水分都以在105±l℃干燥至前后两次称重之差不超过5mg为恒重时失去的水分来计算。
②氯化钠含量的测定(奠尔法)
莫尔法是以10%的铬酸钠为指示剂,在中性或弱碱性介质(pH6.5~10.5)中用硝酸银标准溶液测定氯离子含量的方法,其滴定终点为砖红色.该法属于沉淀滴定法。 4)孢子数、发芽率的测定
①孢子数的测定:需用显微镜、血球计数板、盖片、天平等器具。
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计数:a使用25 x 16规格的计数板时需计算四个角的大格,加中央一大格的孢子数,再按公式计算。b.使用16x25规格的计数板时.只计算四个角上的4个大格内的孢子散,再套入公式中计算。
②发芽率的测定:制备好悬浮液后,再制作标本于30~32℃培养箱内培养3~5h后镜检。培养基中接入悬浮液的数量,以每视野内有10~20个孢子为宜。 5)蛋白酶活性的测定(福林氏法)
福林试剂在碱性(pH为7.2)环境中易被蛋白质分子中的酚类氨基酸还原而呈兰色.用分光光度计测定,其吸光度大小与蛋白水解产物多少成正比,水解产物量又与蛋白酶活 力成比例。
6)熟料消化率N性蛋白的测定
①熟料消化率的测定:称取一定量的样品加入酶液和pH7 .2的缓冲液.需在55℃保温2h,再煮沸10min,冷却、定容、过滤,吸取稀释滤液测定全氮。
②N性蛋白的测定:加入酶液与pH7.2的缓冲液后,加入氯化钠,在45℃下保温24h,过滤后加热、比浊。 7)总酸与氨基氮的测定
①总酸的测定:用中和滴定法,如遇样品颜色较深终点不好判定时,用酸度计法较为准确,计算时酱油酱腌菜、豆腐乳等的总酸以乳酸计,食醋的总教以乙酸计。
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