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家畜繁殖学 编辑W.M. 动科1202 激素的生物学活性都是通过生物测定法得到。实验动物一般为:大鼠、小鼠、仓鼠、公鸡等。 产生生物学效应的最低激素用量,规定一个生物学单位(大鼠单位、小鼠单位) ? 观察反应:
子宫增重(雌激素)
阴道涂片,上皮角质化程度(雌激素) 鸡冠反应(雄激素)
卵巢增重(PMSG;FSH)
排卵试验(PMSG、FSH、HCG)
2、免疫测定法
将抗原或半抗原与其抗体特异性结合的反应称为免疫反应。 蛋白质——分子量大——完全抗
肽类、脂肪酸和类固醇——分子量小——半抗原,必须与载体蛋白结合。
用同位素或生物酶将抗原或抗体标记,通过检测免疫反应产物中结合的或游离的标记物的活性,间接计算待测激素含量的方法,称为免疫测定法。
放射免疫法RIA;酶联免疫测定法EIA。Enzyme-linked immunosorben assay
RIA 的原理与 ELISA 相同,只不过 RIA 用同位素作为标记;ELISA 用酶作为标记。 ? 均有:免疫、分离(结合物与游离物分离)和检测三部分组成。 (Y Y Y Y* ) (Y Y Y*Y* ) (Y Y*Y*Y* ) (Y*Y*Y*Y* )
Y:抗体;*:标记抗原(酶或同位素)
RIA:AB抗体与抗原或标记抗原结合,分离游离标记抗原,经液体闪烁计数仪测定标记抗原结合物的脉冲数。即每分钟的计数(count per minute.cpm),测抗体与标记抗原的结合百分率。
ELISA:绵羊抗兔IgG加层;2.5%酪蛋白溶液饱和;兔抗某激素的抗体;被测定某激素和酶标某激素抗原竞争结合抗体,清洗、颜色反应,某激素含量。
第三章 雄性动物生殖生理
第一节 雄性动物生殖机能的发育和性行为
生前、生后的发育、初情期和性成熟期
一、睾丸下降 (descent of testicle)
大多数雄性家畜或动物在出生前或出生后不久,睾丸从腹腔→腹股沟管→阴囊。 牛、羊、猪生前;马在生后不久。
隐睾 (retained testis):单侧隐睾和双侧隐睾。
二、初情期前雄性生殖机能的发育
胎儿和初生阶段,睾丸生长是缓慢的,主要是精细管索的延长,精细管索是精细管的初级阶段,尚未形成管腔。
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三、初情期、性成熟和适配年龄 ? 初情期(“青春期”)是♂初次释放有受精能力(成熟精子),并表现出完整性行为序列的年龄。 ? 初情期有的也称性成熟期,是♂生殖器官和身体发育最为迅速的生理阶段。 ? 引进猪、绵羊和山羊约7月龄;牛12月龄;马15~18月龄;兔3~4月龄。 根据体重、睾丸大小、精液品质做估测:
奶牛为成年体重的30~40%;肉牛45~55%;睾丸品种间差异大,一次精子总数不少于5000万,直线运动10%以上。
? 影响因素:
品种、体重、温度、营养、生长速度等。
性成熟(sexual maturity):是继初情期后。有的将其划在一起,初情期就是性成熟期。 ? 适配年龄:
性成熟的基础上推迟数日(鼠、兔)、数月(猪、羊)、甚至一年(牛、马)。 激素调节:LH↗;睾酮↗;生殖机能又作用于垂体。
四、性行为 (sexual behavior)
雄性和雌性在性接触中各有其独特表现形式,只有两性双方性行为协调配合,才能保证有效配种。性行为是由特殊的刺激而产生的。
(一)♂完整性行为:
性激动(性兴奋)→求偶→勃起→爬跨→交配→射精→交配结束等步骤。这些步骤也叫性行为链 (sexual behavior chain) 或性行为序列。
正常的性行为序列是顺利完成交配和采精的必要条件。 牛、羊、兔完成交配时间短;马、猪长。
性激动:是♂的一种求偶交配的欲望。公畜接近母畜后,引起性冲动,而产生性兴奋。 求偶:公畜向母畜作出某些特殊姿态和动作,以诱导母畜接受交配的性行为表现。 交配:系由勃起、爬跨和交合等几个连续发生而紧密结合的性反射组成。 射精:牛、羊、兔为阴道射精型;仅数秒钟。
马、猪为子宫射击精型;马30~40秒;猪5~10分钟。
交配结束:射精完毕后,公畜随即爬下,并对母畜表现冷淡而不顾,一时不会再有性欲,所谓性失效,也称为交配结束。
在一定时间内公畜进行交配的次数,即交配频率。
24小时——公牛 20次、公羊 50次、公马 20次、公猪 8次(长期性休息后);生产上予以制止,除非进行排空试验,性行为强度、生精能力。 (二)性行为机理
是在激素、神经和感觉器官等方面因素共同作用下产生。 1、激素
对♂雄激素,一天之内可出现几个分泌高峰,而且基本是恒定的,常可引起性行为再现;而♀只有发情期再现性反应,接受公畜的交配。 2、神经系统
性行为的神经机制是天生的,嗅球、中隔、杏仁体、海马等边缘系统是调节性行为的更高级中枢,也是控制情绪状态主要部位。
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家畜繁殖学 编辑W.M. 动科1202 勃起——副交感神经;射精——交感神经。 电刺激荐神经,也能导致♂勃起和射精。 3、感官刺激
嗅觉——外激素,公猪、发情母狗、猫、野生动物等
视觉和听觉——发情母畜的外观姿态;甚至马、牛、猪、兔假台畜。 触觉——刺激公畜阴茎的神经末梢即可引起射精。 猪------手握法采精;牛、羊、马、兔------温度。 假阴道:温度、润滑度和压力。
(三)影响性行为的因素 1、遗传因素
乳用♂比肉用♂性行为活跃。 2、环境因素
季节和气候;季节性配种;常年配种;严寒和酷暑减弱。控制公牛性行为5~10分钟或2~3次徒劳的爬跨(精液量↗、密度↗、活力↗);公畜间的竟争效应,可增强公畜的性行为。 3、生理状态
公畜的体况、健康状态。 4、社群地位 (social rank)
争斗确定其地位;有的性行为和配种能力被抑制。 5、管理
异性接触对♂性行为发展和再现起着重要作用;采精操作正确是否;更换台畜“新奇效应”。
第二节 精子的发生和精子的形态
初情期(性成熟期)→生殖机能衰退,♂精细管上皮进行生殖细胞分裂和演变,使精子不断产生和释放。
而♀在胚胎期已形成并贮备了终生所需的原始卵泡。
一、精子的发生
以精原细胞为起点,在精细管内由精原细胞经过精母细胞到精细胞的分化过程称为精子发生(spermatogenesis)。
精细胞在睾丸精细管内变形的过程称为精子的形成(spermiogenesis)。
(一)精原细胞(spermatogonium)及其增殖
精原细胞是睾丸中最幼稚的生精细胞,位于精细管上皮的最外层,直接与精细管的基底膜接触。 胚胎发育阶段位于卵黄囊区域的原始生殖细胞(primordial germ cell)内迁至原始性腺,再经数次分裂形成性原细胞(gonocyte),在初情期前分化而来的。 ? 可分3个类型:
A型精原细胞——精子形成的基干细胞,由性原细胞分化而来的A0型精原细胞,可分裂成从A1 ~A4型精原细胞。
中间型精原细胞——由A4型精原细胞分裂产生 B型精原细胞——由中间型细胞分裂产生
最后B型精原细胞分裂产生初级精母细胞。这一阶段历时15~17天。
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家畜繁殖学 编辑W.M. 动科1202 ? 主要特点:
精原细胞的首次分裂同时产生一个活动的精原细胞和另一个暂时休眠的干细胞;所有分裂都有是有丝分裂;理论上, 由一个A1 型精原细胞可生成16个初级精母细胞 (primary spermatocyte),猪可能生成是24个。
精原细胞总有一半贮存下来,当初级精母细胞进行第一次减数分裂→次级精母细胞(secondary spermatocyte)时。休眠的精原干细胞又重新启动分裂产生——一个活动的精原细胞和另一个暂时休眠的干细胞。精原干细胞不断得到更新,保持一定数量,从而使精子的发生持久进行下去。
(二)精母细胞及其成熟分裂(减数分裂)
由B型精原细胞→ 形成初级精母细胞,位于精细管管腔内侧。 ↓ I成熟分裂(DNA复制加倍) 次级精母细胞(2n)
↓ II成熟分裂(时间短,DNA不复制) 精细胞(1n)
染色体2n:马64;牛和山羊60;绵羊54;猪38;兔44;水牛48;驴62;鸡78;鸭和火鸡80;
(三)精细胞 (spermatid) 及精子形成
精细胞形成后不再分裂,位于支持细胞顶端,经复杂的形态变化形成蝌蚪状的精子,此过程为精子形成。
主要包括顶体的发生,核的浓缩拉长,尾的形成和多余细胞质的脱落等。 细胞核变为精子头的主要部分 高尔基体形成顶体 中心小体变成精子的尾
线粒体逐渐集在尾的中段形成特有的线粒体鞘膜
细胞的原生质浓缩为一个球形的原生质滴→ 精子颈部
(四)支持细胞 (sertoli cell)
支持细胞附着于精细管的基底膜,形状不规则,多数呈长锥形。 ? 功能:
(1)提供各级生精细胞营养以及适宜的微环境。 (2)吞噬变性的生精细胞。
(3)形成血睾屏障阻止抗原物质进入机体血液,避免有害因子对精子的影响。 (4)支架作用(支持细胞顶端的尾丝和尾管的收缩,将精子排入管腔)。 (5)分泌雄激素结合蛋白、抑制素和雌激素。
二、精子发生周期和精细管上皮周期
精子发生序列即由A型精原细胞开始,经过精母细胞至精细胞形成精子的全过程所需时间,称为精子发生周期 (spermatogenic cycle)。
在精细管的横断面上存在精子发生序列中不同类型的生精细胞,这些细胞群中的细胞类型是不断变化的,有周期性。
这些细胞群又称为细胞组合 (cellular association)。
精细管的纵长方向细胞组合排列状态所显示的变化规律,称为精细管上皮波 (spermatogenic wave)(空间)。
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