2021版高考生物(苏教版)一轮复习课后限时集训：40 基因工程

质粒除了含有标记基因，还应该含有______________(至少写两个)。

(3)为检测基因工程菌降解石油能力的大小，可观测的指标是________________________________________。土著菌种Y9不能降解石油，但转入上述构建好的表达载体后则获得降解石油的能力，这是因为__________________________________________。

[解析] (1)根据题干信息已知，切割目的基因的限制酶是SalⅠ和NdeⅠ，而pCom8上无SalⅠ的切割位点，又因为如图显示SalⅠ和XhoⅠ切割后露出的黏性末端是相同的，因此可以用NdeⅠ、XhoⅠ切割质粒，然后与目的基因在DNA连接酶的作用下形成重组质粒。

(2)为提高质粒导入率，土著菌种Y9预先需用Ca2＋处理。因为XhoⅠ切割质粒会破坏标记基因mel，而aacCl未破坏，因此为了筛选出转入了基因工程菌P450/Y9，应在筛选培养基中加入庆大霉素。质粒具备的特点有：含有标记基因、启动子、终止子、复制原点、自我复制等。

(3)为检测基因工程菌降解石油能力的大小，可在一定时间内观测所取样品石油的剩余量。P450是石油降解的关键酶，转入表达载体后，P450基因得以表达，即基因工程菌P450/Y9可分泌降解石油的P450酶。

[答案] (1)NdeⅠ、XhoⅠ 目的基因(或P450基因)

(2)Ca2＋(或CaCl2) 庆大霉素 启动子、终止子、复制原点(答出两点即可) (3)2天后(或一定时间后)样品中石油的含量(剩余量) 基因工程菌P450/Y9能分泌降解石油的P450酶(答案合理即可)