多年来药物学家为了增强紫杉醇的水溶性和靶向性，持

陈永法[10]等人通过制备紫杉醇冻干纳米乳,

研究了其体外理化性质。研究以外观和重分散性 为指标,对紫杉醇冻干纳米乳所使用的冻干保护剂 进行了筛选,考察了纳米乳滴的形态,粒径和电位 以及制剂的含量和有关物质,并对最优处方进行了 加速稳定试验。结果表明,选用甘露醇作为冻干保 护剂较好,甘氨酸可提高冻干纳米乳的外观和重分 散性能。紫杉醇冻干纳米乳加入10mL0. 9%NaCl 溶液振摇1分钟后变为带蓝色乳光的均一体系。 冻干前后纳米乳的形态,粒径和电位变化不大,表 明冻干保护剂能起到较好的效果。紫杉醇冻干纳 米乳60℃加速试验结果表明, 10 d后制剂外观和 重分散性能良好,含量为标示量的98. 36%,有关 物质为0. 81%。上述实验结果表明,紫杉醇的纳

多年来药物学家为了增强紫杉醇的水溶性和靶向性，持 续对其剂型进行研究，目前常采用的有：紫杉醇酯质体，紫 杉醇微球，2-羟丙基-β-环糊精包合物，紫杉醇聚合物胶囊 以及紫杉醇纳米粒等。在这些剂型中以紫杉醇纳米粒最好、 最完善。现将紫杉醇纳米粒作一介绍。

2004年F eng等[2]从添加各种天然乳化剂如胆固醇、磷脂、 维生素E，通过“抽提-蒸发”技术制备出聚乳酸-羟基乙酸 纳米粒，直径为0.1～100nm。其外形用扫描电镜和原子显微 镜测定，用H PL C法测定封包率及释放动力学。由于制成的纳 米粒的直径小，分布范围窄而使其包封率达100%，完全可以 控制释放动力学。将H T-29癌细胞系与纳米粒共同培养24h， 由于纳米粒具有表面反应活性高、表面活性中心多、吸附能 力强等优点。使癌细胞死亡率比紫杉醇普通注射剂高13倍。

目前临床治疗卵巢癌的标准化疗方案是：紫杉醇

175m g/m2+卡铂(carboplatin)，静脉给药，每周3次，共6 次。但静脉给药毒副作用较多，常见的有：骨髓抑制、过敏 反应、神经毒等。为了减轻毒副作用进行了许多有关给药途 径的研究。2005年G offin等[5]研究认为较好的是静脉、腹腔联 合给药。因为腹腔给药主要的问题是药物通过表面渗透进入 肿瘤的深度很有限，一般仅数毫米，因此药物不能与肿瘤很 好接触而发挥治疗作用。用腹腔注射给药仅适用于肿瘤直径 小于1cm残留灶结节，因此仅适用于术后卵巢癌的二线治疗。

。紫杉醇现已

用于临床治疗晚期乳腺癌、卵巢癌、非小细胞肺 癌等,它的类似物taxotere(2)也于1996年5月 被FDA批准临床治疗晚期乳腺癌。但它们都

存在一些缺点,比如水溶性差、存在多药耐受 性、对某些癌症无效等。因此,寻找高效低毒、 抗瘤谱广、综合性能好的新一代紫杉醇类抗癌 药成为新的研究热点,但早期的结构修饰工作 主要集中在侧链的改造上,近期的工作也大多 限于紫杉醇的母核上基团的修饰,对其它结构 类型的紫杉烷结构修饰研究较少。

化合物7有2个乙酯基,为选择性地水解 7的14β-乙酯得到8并避免进一步水解,经仔 细考察发现,化合物8在甲醇中溶解度较低,选 用尽量少的甲醇作溶剂,用K2CO3水解7可得 到较高收率(69%)的8。以二环己基碳二亚胺 (DCC)为缩合剂,在4-Pyrrolidinopyridine (4- PP)作用下,8与带保护基Cbz的侧链酸偶联, 可选择性地酯化14位羟基得到化合物9。按 文献方法[8],在80℃和DCC,4-PP作用下,9与 苯甲酸或间氯苯甲酸反应可以顺利得到预期的 产物10a和10b。但9与正戊酸或苯乙酸等脂 肪酸在同样条件下反应却得到了2位和4位双 酯化的产物,这可能是因为脂肪酸与DCC形成 的加成物的立体位阻相对较小,并且亲电反应 活性强于芳香酸与DCC形成的加成物,在高温 和夺质子能力很强的4-PP的存在下难以达到 选择性地酯化2位的目的。改用正戊酸酐或苯 乙酸酐作酰化剂,在温和的条件下[室温,4-二 甲氨基吡啶(DMAP)]可以得到产物10c和 10d,收率分别为92·5%和79·3%。10a~10d 经中压催化氢解生成游离胺,然后用苯甲酸酐 或Ditertbutyl dicarbonate [(BOC)2O]酰化得到 目标物11a~11e。对10a~10d的4位羟基乙 酰化条件进行了详细考察,尝试了多种反应条 件,最终获得成功,以乙酸酐为酰化剂、甲苯为 溶剂,在DMAP作用下可得到12a~12d,12b~ 12d,随后进行中压催化氢解和酰化得到产物 13b~13d。13a和13e的合成见另文报道[9]。 合成化合物10~13的各步反应收率见表1。 最终化合物均经1HNMR和FAB-MS鉴定。 以化合物4和紫杉醇作对照,将11a~

11e,13a~13e共10个化合物进行了微管聚合 试验(浊度测定法)和体外肿瘤细胞抑制试验 (MTT法)。所有化合物在浓度为10

μmol·L-1时,均无促进微管聚合活性。在体外 肿瘤细胞抑制试验中,大部分化合物对口腔上 皮细胞(KB)、卵巢癌细胞(A2780)及结肠癌细 胞(HCT-8) 3种细胞株都有边缘活性,只有

13d对3种细胞株的IC50均大于10μg·ml-1, 试验结果见表2。

·912·药学学报Acta Pharmaceutica Sinica 1998,33(12)∶910~918

从表2可看出,14β-侧链紫杉醇衍生物的 活性与紫杉醇相比相差甚远,更令人意外的是, 它们的活性与对照化合物4在同一个数量级甚 至更差。紫杉醇衍生物构效关系表明,4-去乙 酰紫杉醇的活性低于紫杉醇3个数量级[10];而 紫杉醇的2位苯甲酸酯以间氯苯甲酸酯取代 后,细胞毒性增强700倍[8];以环己基甲酸酯代 替后,细胞毒活性降低几十倍[11,12]。与紫杉醇 衍生物相比,这类14β-侧链紫杉醇的构效关系 有如下差异:1) 4位羟基化合物与4位乙酸酯 比较,4位羟基化合物活性好(11c与13c活性 相当);2) 2位基团的改变对活性无明显影响,

紫杉醇是一种具有广谱抗癌活性的化合物,是近十多年 来出现的治疗晚期乳腺癌、卵巢癌等疗效最好的药物之一, 现已成为治疗这两种癌症的临床一线用药,它具有独特结构 的二萜类成分,它的骨架被命名为紫杉烷(taxane)。由于其 独特的作用机制,化学结构新颖复杂和对耐药细胞也有效。 已引起人们的广泛关注。但紫杉醇也存在水溶性差,对某些 癌症无效,易产生多药耐受性等缺点。现就紫杉醇的药理作 用及近期研究进展作一综述[2]。

将小分子可溶性基团与紫杉醇的2'-或7-羟基连

接，可形成酯类衍生物，如琥珀酸酯、磺酸、氨基酸衍 生物 [3]

，这样可使其亲水性大大提高。具体过程如下： 紫杉醇与琥珀酐在不同反应条件下可产生2'-琥珀

酰紫杉醇(室温)和2',7-二琥珀酰紫杉醇(85℃)，分别加 入等量氢氧化钠，蒸发或冻干除去溶剂后即得两种琥珀 酸酯的钠盐，溶解度分别提高到1、3mg/mL [4]

。琥珀酰

紫杉醇、异丁基氯甲酸盐与牛磺酸四丁基铵盐(或2-氨 基丙磺酸)的反应得到的紫杉醇磺酸钠盐，其分配系数 (C 水 /C