关于植物组培的本科论文 - 图文

湖 南 农 业 大 学 全日制普通本科生毕业论文

湖南·长沙 提交日期：2017年5月

湖南农业大学全日制普通本科生毕业论文

诚 信 声 明

本人郑重声明：所呈交的本科毕业论文是本人在指导老师的指导下，进行研究工作所取得的成果，成果不存在知识产权争议。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体在文中均作了明确的说明并表示了谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。

毕业论文（设计）作者签名：

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目 录

摘要 ......................................................................................................................................... 1 关键词 ..................................................................................................................................... 1 1 前言 ................................................................................................................................... 1 1.1 研究目的和意义 ............................................................................................................ 1 1.2 油菜遗传转化的研究现状 ............................................................................................ 1 1.3 CRISPR/Cas9技术的研究进展 ................................................................................... 2 1.3.1 CRISPR/Cas9技术的简介 ......................................................................................... 2 1.3.2 CRISPR/Cas9技术的应用 ......................................................................................... 3 1.3.3 CRISPR/Cas9技术的优势及缺点 ............................................................................. 3 1.4 SSH文库简介 ................................................................................................................ 3 1.5 BnaA09的研究进展 ...................................................................................................... 4 2 材料与方法 ....................................................................................................................... 4 2.1 实验材料 ........................................................................................................................ 4 2.1.1 转化受体 ..................................................................................................................... 4 2.1.2 转化载体 ..................................................................................................................... 4 2.2 实验地点 ........................................................................................................................ 4 2.3 培养基 ............................................................................................................................ 5 2.4 实验仪器及用具 ............................................................................................................ 5 2.5 其他材料 ........................................................................................................................ 6 2.6 实验设计 ........................................................................................................................ 6 2.6.1 划平板 ......................................................................................................................... 6

2.6.2 甘蓝型油菜“湘油15”的播种 .................................................................................... 6 2.6.3 摇菌 ............................................................................................................................. 6 2.6.4 外植体的制备和侵染 ................................................................................................. 6 2.6.5 下胚轴与农杆菌共培养 ............................................................................................. 7 2.6.6 初步诱导筛选 ............................................................................................................. 7 2.6.7 愈伤组织再生 ............................................................................................................. 7 2.6.8 生根培养及炼苗 ......................................................................................................... 7 2.6.9 提取DNA ................................................................................................................... 7 2.6.10 PCR扩增 .................................................................................................................. 8 2.6.11 琼脂糖凝胶电泳 ....................................................................................................... 9 3 实验结果与分析 ............................................................................................................... 9 3.1 油菜遗传转化体系 ........................................................................................................ 9 3.2 抗性苗PCR检测结果 ................................................................................................ 10 3.3 油菜遗传转化效率统计 .............................................................................................. 10 4 结论与讨论 ..................................................................................................................... 11 参考文献 ............................................................................................................................... 11 致 谢 ............................................................................................................................... 13