娴欐睙澶у�﹀巻骞磋�冪爺鐪熼�樻�荤粨涔嬬敓鍖栦笌鍒嗗瓙鐢熺墿瀛?- 鐧惧害鏂囧簱

9 DNA合成酶 10 氨酰tRNA合成酶 四 综合题15/90

1 简述SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理,你使用该技术分离和检测过何种物质?主要操作步骤有哪些?

2 质粒是基因工程中最常用的载体,为获得某质粒(如pUC18)DNA,请你设计一个简单的实验过程(步骤).

3 谈谈你所了解的生物化学近年来的新进展.

4 DNA双螺旋模型是哪年由谁提出的?简述其基本内容.为什么说该模型的提出是分子生物学发展史上的里程碑,具有划时代的贡献?

5 何谓变性,那些因素可以引起蛋白质的变性?何谓别构(变构)?举一例说明. 6 试述三羧酸循环是如何沟通糖类,脂类和蛋白质三大有机物的代谢的?

2004年浙江大学生物化学

1、名词解释（5分每题）

1）埃德曼降解（Edman Degradation） 抗体（Antibody）

诱导契合学说（Induced Fit Thermosdynamics） 热力学第二定律 补救途径 荷尔蒙 竞争性抑制 细胞膜 DNA聚合酶 基因表达

2、回答（共100分）

1）根据国际分类法将酶分成哪几大类，分别叙述它们的酶反应特征。10分 2）对生物体转录和复制的特征进行说明比较。15分

3）叙述基因文库和cDNA文库的制作步骤并进行它们的特征比较。20分 4）用图表来说明生物体内三羧酸循环ATP产生的经路和它们的控制机理。20分 5）比较说明SDS-PAGE(SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳)和琼脂糖凝胶电泳的物质分离原理和特点。30分

2005年浙江大学生物化学

1简单描述蛋白质的超二级结构和结构域的概念。 2、简单描述蛋白质及核酸的变性。

3、在功能上RNA可以分为几种？描述生物体内蛋白质合成过程及各种RNA在这个过程中的作用是什么？

4、描述生物膜的机构特征及其生物学功能。 5、简单描述柠檬酸循环的反应机制。

6、DNA聚合酶、RNA聚合酶、逆转录酶是生物体内重要的核酸合成酶，通过触媒反应机理，描述它们的相同点和不同点。

7、什么是抗原和抗体？什么是单克隆抗体和多克隆抗体？基于抗体－抗原相互作用的生化分析方法有酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫印记测定(Western Blot)及抗体芯片等，描述其中一种的作用原理。

8、根据国际分类法，酶分为哪六大类？酶作为生物催化剂的特点是什么？写出3－5种你所熟悉的酶并简单描述它们的活性。

9、作为生物化学实验室的新手，进入实验室后，首先你需要几周的时间刷瓶子和试管等，然后逐渐开始学习配制各种缓冲液和试剂。接下来你要开始一个蛋白质纯化实验。实验目的是分离一种参与柠檬酸循环的酶——即位于线粒体间质的柠檬酸盐合成酶。请根据一下的步骤回答相应的问题。

实验步骤1：取20kg新鲜牛的心脏，置于冰上，使用含有0.2M蔗糖，pH为7.2的缓冲液，匀浆（均质化）。

问题1:为什么要用心脏组织？并且为什么选用如此大量的组织？

问题2：在整个过程中为什么必须使组织始终保持在低温？为什么需要维持pH在7.2左右？

问题3:下一步通过什么实验能够获得较纯的组织细胞中的线粒体组分？ 问题4:纯化的线粒体通过渗透压裂解后，样品中含有线粒体膜和线粒体内含物。如何使得蛋白质从样品中沉淀下来？解释相应的原理。

实验步骤2:沉淀经溶解和透析后，进行分子量排阻层析分离。通过280nm紫外吸收收集各个分离的组分。

问题5:为什么使用280nm进行测定？第一个和最后一个组分所含蛋白质的分子特征是什么？

实验步骤3:将上一步收集的组分进行离子交换层析分离。 问题6: 实验步骤3的蛋白质分离的原理是什么?

实验步骤4:为了获得能够测序（氨基酸）的高纯度的蛋白质并且进一步特征分析，需要使用双向电泳进行纯化。 问题7：描述双向电泳的纯化原理。

2006年浙江大学生物化学

1水是生命不可缺少的物质，从生物化学的角度描述水在生命体中的重要作用。 2描述生物膜的结构特征及其生物学功能。 3简单描述生物体内的三种DNA重组方式。 4简单描述生物体内的四种DNA修复系统。 5简单描述蛋白质合成的五个阶段。 6简单描述柠檬酸循环的八个步骤：

7非共价键在生物大分子中扮演了十分重要的作用，有哪四种非共价键？并举例说明它们在维持蛋白质、核酸结构中所起到的作用。

8在自然界中构成蛋白质的氨基酸有20种，根据他们的R基的化学特征可以分成哪几大类？每一类的特征是什么？请写出每一类中包括的氨基酸全称、三字母和单字母的缩写。

9传统的氨基酸测序原理是Edman化学降解法，近年来又发展了电喷射串联质谱法测定氨基酸序列，分别描述它们的原理和特点。

10、什么是抗原和抗体？什么是单克隆抗体和多克隆抗体？基于抗体－抗原相互作用的生化分析方法有酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫印记测定(Western Blot)及抗体芯片等，描述其中一种的作用原理。

11、描述使用双向电泳进行蛋白质分离的原理，利用这项分离技术设计一个研究实验，写出实验目的、方法及步骤，并列出所需要的其它仪器、药品、研究工具等。

2007年浙江大学生物化学

1.什么是蛋白质？分类并举例描述蛋白质的功能，描述你最熟悉的5种蛋白质分离纯化方法的工作原理（20分）。