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1, Introduction 思考题
1 写出下列缩写的中、英文全称:ATCC, NCI, NCI-60
ATCC:American Type Culture Collection美国典型培养物保藏中心 NCI:human cancer cell lines 人类肿瘤细胞株
NCI-60:human cancer cell lines-60 人类60种代表性肿瘤细胞株
2翻译和解释:Cryopreservation, cryoprotective agent, subculture, passage, subcultivation ratio Cryopreservation,低温储藏
cryoprotective agent,冷冻保护剂:在冷冻保存胚胎或细胞时加入保护细胞抵抗低温损害的 化合物。如甘油、二甲基亚砜等。
Subculture ,传代培养:当原代培养成功以后,随着培养时间的延长和细胞不断分裂,一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止;另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。此时就需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养。这个过程就称为传代(passage)或者再培养(subculture)。
Passage,传代:将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶的过程。
subcultivation ratio,传代比率:细胞传代培养时细胞浓度稀释的倍数,一般为1 :2或1 :4稀释。
3 如何冻存和复苏细胞?各种细胞、DNA、蛋白质的长期冻存温度和所需低温保护剂是什么?
冻存细胞时要缓慢冷冻,一般按1?C/min的降温速度慢冻,同时加用细胞冻存液防止细胞内结晶形成对细胞造成损害。细胞复苏时要求与细胞冻存相反,应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶可以在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶从而对细胞造成损害。
4如何上网查阅某种国际上通用的细胞系的组织来源、遗传特征、标准培养条件? 登录美国权威细胞库ATCChttp://www.atcc.org中的Cell Biology Collection,输入某种细胞系名称,选择Designation进行查阅。
5如何上网查阅某种国际上通用的小鼠品系的生物学特征? 1, The Jackson Laboratory
http://www.jax.org
MGI (mouse genome Informatics)
MPD (mouse phenome database)小鼠表型组数据库 2, FIMRe (Federation of International Mouse Resources) 3, Trans-NIH Mouse Initiatives
4, International Knockout Mouse Consortium (http://www.knockoutmouse.org/) 6. 写出4种生命科学与医学领域必访网站的名称和网址 http://www.genecards.org/ http://nobelprize.org http://www.moh.gov.cn http://www.ncbi.nlm.nih.gov
http://www.sanger.ac.uk/
7. 判断题:不可作为成功之路微积分素材的选项是:
A,知识;B,经验;C,能力;D,对失败的排除;E,金钱。 8. 电子图像的保存和展示四大原则:
1,分辨率至上原则:保证原始图像的高分辨率
2,保存原则:永久、实时、逐一保存,并有备份:宁要流水帐、不要回忆录! 3,图注可调原则:为图像注释文字,或图、文混排时,保证文字随时可以更改和调整 4,图像转换原则:下载、拷贝、转换有图像的文件时,防止分辨率损失和图像长宽比变形: 9. 英文论文写作与投稿注意八大要点 1,质量是稿件生存第一要素; 2, 端正科技写作的目的;
3, 写作要人性化:
? 时刻想着读者、尤其是第一读者---第一读者:编辑和审稿人 ? 为节省编辑和审稿人的时间着想:最怕似是而非、逻辑上自相矛盾、空洞无新信息! ? 国际期刊趋向于使用主动语态:We, not I. 4, 不要惧怕文字表达;
5,从现在起,积累中、英文文献素材:
6,从现在起,积累科技用语和专业术语的用法和搭配: 7,对有疑问的表述进行有根据的取舍: 8,写作顺序:
? 材料方法:随做实验时,随时积累,“大作开战,方法先行”
? 结果:保证具有可发表质量的图表一步到位,再步步积累。从进实验室做实验的第一天做起!
? 引言:从查文献时就积累。可易可难,最难预测!
? 讨论:不能重复结果,要有理论或规律上的提升,最好提出独创性的模型。不是补漏,而是以攻为守!
? 摘要、题目、关键词:吸引眼球,便于被查询和索引:要平衡新颖性(引人入胜)
与通俗性(易被检索)的矛盾:涵盖关键词的上/下/旁位概念。
2,Eukaryotes and eukaryotic cells思考题
? 判断以下观点的对误:
? 1,现今地球上的一切生命均来自细胞。√
? 2,现今地球上的某些生命形式可以通过结晶的方式独立生长或自我复制。× ? 3,泛生论可以解释某些细菌的增殖。×
? 4,一切病变均来自细胞的病变。√ ? 5,对细胞外基质的现代研究推翻了Virchow:“一切病变均来自细胞的病变”的论断。
×
? 生命的三大特征、原则、或定律
? 1,自我更新与修复原则(利己原则) ? 2,自我复制与繁殖原则(利子原则)
? 3,认同原则(利群原则):即同类的认同与异类的排他,是在群体水平上实现第一
和第二原则的前提(选择性利他原则)。 第三原则是生命最本质的特征(相当于物种的免疫学),却最易被忽略或曲解。 ? 思考题: 如何测量细胞的大小?
? 逐个测定:光镜、电镜的图像分析:比例尺 ? 细胞群体测定:
? A,差速沉降法
? B,流式细胞术:
? forward light scatter (FSC)前散射:与大小相关
?
sideways light scatter (SSC)散射:与颗粒度相关
? C,新技术: ImageStream System (ISS) 100 (Amnis Corporation, Seattle, WA) ? 真核细胞的基本特征
1, 完整的细胞核与复杂的基因组
2, 高度动态变化的转录组和蛋白质组: 3, 4, 5, 6,
完善的细胞骨架系统: 迷宫般的内膜系统:
充满信息的细胞表面与细胞外基质: 具有核外基因组的半自主性细胞器
7, 严格控制的细胞增殖(Cell proliferation)方式 8, 多样化的细胞变形与运动方式: 9, 错综复杂的细胞识别与通讯途径: 10, 精细的细胞分化过程: 判断题
? 人体细胞为了呼吸氧气,需要在细胞质内保持很高的氧化还原电位。×
? 细胞质(或细胞核)内的许多酶类需要提供充足的氧气才能保证其活性;× ? 或:在测定来自细胞质或细胞核内的酶活性时需要在缓冲液中充氧。× ? 干细胞比分化细胞需要更多的氧气;× ? 或:干细胞相对需氧,分化细胞相对厌氧×
选择题:在防止某纯化的细胞质或细胞核蛋白失活的措施中,错误的是:
A,加巯基乙醇或DTT
B,视情况可加5-50%甘油或DMSO
C,在缓冲液或密封瓶中充氮或充氦、充氩 D,在缓冲液或密封瓶中充氧
E,将pH适当调低,即略低于7.4
F,用钾盐而非钠盐;减少Ca2+、Fe3+、Ni2+或加EDTA,但有时可添加Mg2+、Mn2+. ? 细胞内的许多蛋白为何在(表达)纯化以后就变得很不稳定?应采取何种措施增加其稳
定性? ? 思路:
? 真命题如何解决? A,加巯基乙醇或DTT
B,视情况可加5-50%甘油或DMSO
C,在缓冲液或密封瓶中充氮或充氦、充氩 E,将pH适当调低,即略低于7.4
F,用钾盐而非钠盐;减少Ca2+、Fe3+、Ni2+或加EDTA,但有时可添加Mg2+、Mn2+. G,低温保存。
? 伪命题如何解决?
蛋白质本身不稳定,可将蛋白质切短,切掉不稳定结构,加分子伴侣。 ? 翻译下列英文名词:
? Archaebacteria, Eubacteria, Eucaryotes, Procaryotes, Metazoa (Metazoan), Homo
sapiens, Mus musculus, Xanopus leavis, Drosophila malanogaster, Caenorhabditis elegans
Archaebacteria,古细菌类 Xanopus leavis, 爪蟾
Eubacteria,真细菌类 Drosophila malanogaster, 果蝇 Eucaryotes,真核细胞,真核生物 Procaryotes,原核细胞,原核生物 Metazoa (Metazoan),后生动物 Homo sapiens,智人,人类 Mus musculus,小家鼠 ? 名词解释:
? vertical gene transfer,纵向基因转移:纵向传递即通过繁殖进行的亲代和子代的基因
传递; ? horizontal gene transfer,横向基因转移:又称侧向基因转移(lateral gene transfer,
LGT),是指在差异生物个体之间,或单个细胞内部细胞器之间所进行的遗传物质的交流。 ? 列举与凋亡有关的中间纤维变化及其marker.
? vimentin, K8/K18, desmin, GFAP, lamin B & lamin A/C上均有caspase切割位点,这些IFs
的片断化均可作为调亡标志。 ? 灵敏的早期凋亡标志:角蛋白CK18上caspases切割位点DALD396/S可暴露neo-epitope,
被the M30 CytoDeath monoclonal antibody识别。 ? Nestin: 无caspase切割位点,有抗凋亡活性 ? 写出下列缩写的中、英文全称:
? VSEL、 FSC、SSC、HGT
very small embryonic-like stem cells (VSELs)非常小的胚胎干细胞 forward light scatter (FSC)前散射:与大小相关 sideways light scatter (SSC)散射:与颗粒度相关 横向基因转移(horizontal gene transfer, HGT)
Caenorhabditis elegans 线虫
3Genes and genomes of eukaryotes 1思考题
等位基因判断题
1,两条同源染色体对等位置上分别来自父母的一对基因互称为等位基因。×
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