生产菌种的扩大培养与保藏

的往复式摇床上振荡培养12h，培养温度33~34℃。

(3)一级种子质量要求 种龄：12h，pH值：6.4±0.1 光密度：净增OD值0.5以上 残糖：0.5％以下 无菌检查：(-) 噬菌体检查：(-)

镜检：菌体生长均匀、粗壮，排列整齐 革兰氏阳性反应。 3，二级种子培养

为了获得发酵所需要的足够数量的菌体，在一级种子培养的基础上进而扩大到种子罐的二级种子培养。种子罐容积大小取决于发酵罐大小和种量比例。

(1)培养基组成

培养基组成（%） 水解糖 玉米浆 磷酸氢二钾 硫酸镁 尿素 Fe++（ppm） Mn++（ppm） pH

(2)培养条件 接种量：0.8~1.0％ 培养温度：32~34℃ 培养时间：7~8h 通风量：

50L种子罐1:0.5 搅拌转速340r／min； 250L种子罐1:0.3 搅拌转速300r／ min 500L种子罐1:0.25 搅拌转速230r／ min

T6-13 2.5 2.5-3.5 0.15 0.04 0.4 2 2 6.8-7.0

B9 2.5 2.5-3.5 0.15 0.04 0.4 2 2 6.8-7.0

T738 2.5 2.5-3.5 0.2 0.05 0.5 2 2 7.0

AS1.299 2.5 2.5 0.1 0.04 0.5 2 2 6.5-6.8

(3)二级种子的质量要求 种龄：7~8h pH：7.2左右 OD值净增0.5左右 无菌检查(-) 噬菌体检查(-)

二、啤酒酵母的扩大培养

一般可采用三级扩大培养，扩大倍数：第1级到第2级为8-10倍，第2级到第3级为4-6倍。

1，实验室扩大培养

2，车间扩大培养

第三节 生产发酵罐的无菌接种

生产规模发酵罐的接种，包括两个方面：从实验室摇瓶或孢子悬浮液容器中移种入一个种子罐；从一个种子罐移入另一个生产发酵罐中。

（1）从实验室摇瓶或孢子悬浮液容器接种 通常有两种方式

2，从种子罐接种

第四节 菌种的保藏与复壮

一、菌种的保藏

1、菌种保藏的意义

菌种是从事微生物学以及生命科学研究的基本材料，特别是利用微生物进行有关生产如抗生素、氨基酸、酿造等工业，更离不开菌种。所以菌种保藏是进行微生物学研究和微生物育种工作的重要组成部分。其任务首先是使菌种不致死亡，同时还要尽可能设法把菌种的优良特性保持下来而不致向坏的方面转化。2、菌种保藏的原理

菌种保藏主要是根据菌种的生理生化特点人工创造条件使孢子或菌体的生长代谢活动尽量降低，以减少其变异。一般可通过保持培养基营养成分在最低水平缺氧状态，干燥和低温，使菌种处于“体眠”状态，抑制其繁殖能力。

一种好的保藏方法首先应能长期保持菌种原有的优良性状不变，同时还需考虑到方法本身的简便和经济，以便生产上能推广使用。

3、菌种保藏的方法 （1）斜面低温保藏法