第三部分 酶、维生素及代谢调节（酶水平）

（1）邻近效应和定向效应：化学反应速度与底物浓度成正比，底物分子进入酶的活性中心区域，即可大大提高活性中心区域的底物有效浓度，使反应速度加快，另外，底物分子在活性中心可定向排布，使分子间反应近似于分子内的反应，同时还为分子轨道交叉提供了有利条件，反应活化能降低。从而大大地增加了酶—底物络合物进入过渡态的机率。

（2）“张力”和“变形”：底物结合可以诱导酶活性中心构象的变化，而变化的酶分子又使底物分子的敏感键产生“张力”甚至“形变”，使敏感键的一端更加敏感，更易于发生反应，上述“张力”和“变形”促进酶-底物络合物进入过渡态。

（3）酸碱催化：酸碱催化剂是催化有机反应的最普遍最有效的催化剂。酶活性部位上的某些基团可以做为良好的质子供体或受体对底物进行酸碱催化。 （4）共价催化：某些酶可以和底物形成一个反应活性很高的不稳定的共价中间物，这个中间物很易变成过渡态，因此，反应的活化能大大降低。

（5）酶活性中心是低介电区域：某些酶的活性中心穴内相对地说是非极性的，因此，酶的催化基团被介电环境所包围，甚至还可能排除高极性的水分子，这样，底物分子的敏感键和酶催化基团之间就会有很大的反应力，有助于加快反应进行。

6．（1）全部操作一般在0~5℃间进行，用有机溶剂分级分离时，必须在零下15~20℃进行。

（2）有时需要在抽取溶剂中加入少量EDTA螯合剂以防重金属使酶失活。 （3）对于巯基酶需在抽提溶剂中加入少量巯基乙醇，以防止酶蛋白由于巯基被氧化而失活。

（4） 在整个分离、纯化过程中不能过度搅拌，以免产生大量泡沫而使酶

变性。

（5） 在分离、纯化过程中，必须经常测定酶的比活性，以指导工作正确

进行。

7．相同点：二者在结构上都是由两个以上的亚基组成寡聚酶，同属于调节酶类。

不同点：（1）结构上：变构酶既具有活性中心，又具有变构中心；共价调节酶的每个亚基上都含有接受其他酶进行共价修饰的部位。

（2）调节特点不同：对于别构酶：①调节物与酶分子别构中心非共价结合后诱导出酶分子构象发生变化，使酶活性中心对底物结合与催化作用受到影响，从而调节酶的反应及代谢过程；②不同的别构酶的调节物分子不同，有的别构酶具有同促效应，它的调节物分子就是底物分子，有的别构酶具有异促效应，它的调节物不是底物分子；③大部分别构酶的初速度-底物浓度的关系不符合典型的米氏方程，而多数呈S型曲线。

对于共价调节酶：①可由其他的酶对其结构进行共价修饰，而使酶在活性形式与非活性形式之间相互转变；②酶可将化学信号极大地放大，即一个酶分子可

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以在一定的时间内催化形成几千个分子产物。

8．核酶是具有催化活性的核糖核酸。用酶反应中间物作为抗原而诱导产生的具有对中间物催化能力的抗体被定义为抗体酶。核酶不是蛋白质，而经典的酶则几乎全是蛋白质。抗体酶是人为制备的抗体，只是具有催化能力，其结构具有抗体的特征，没有经典酶蛋白那样多变的结构。经典的酶所催化的反应基本上均是对机体中已有的生物分子，而抗体酶的“底物”可人为地选择。

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