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_____:设计并制造自然界中不存在的全新蛋白质,使之具有特定的氨基酸序列、
空间结构和预期功能
_____:在蛋白质分子中替代某一个肽段或一个特定的结构域 _____:通过基因工程中的定点诱变技术,有目的改造蛋白质分子中某活性部位的1个或几个氨基酸残基,以改善蛋白质的性质和功能 _______________是改变蛋白质结构的核心之一 __________是基因定点诱变的常用方法 蛋白质工程与基因工程的关系 蛋白质工程 基因工程 实质 结果 联系
专题2 细胞工程
一、植物细胞工程
(一)植物组织培养技术
1、理论基础(原理):_____________
细胞具有全能性的原因:_______________________________________ 全能性表达的难易程度:受精卵、生殖细胞、干细胞、体细胞;植物细胞、动物细胞,请排序_________________________________;___________________ 2、过程:离体的植物器官、组织或细胞(又称_______) ―→ 愈伤组织 ―→胚
状体―→试管苗 ―→植物体
愈伤组织的特点:____________________________________________________ 脱分化:___________________________________________
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再分化
_________________________________________________________________________
3、用途:微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化
生产。
A植物繁殖
微型繁殖:可以高效快速地实现种苗的大量繁殖 作物脱毒:采用茎尖组织培养来除去病毒(因为植物分生区附近的病毒极少或没有) 人工种子:以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,经人工薄膜包装得到的种子。优点:完全保持优良品种的遗传特性,不受季节的限制;方便储藏和运输
人工种子的结构包括:________、_______和________。 B作物新品种培育 单倍体育种:
a过程:植株(AaBb)通过减数分裂得到花粉(AB、Ab、aB、ab四种类型);对花粉进行__________(技术是植物组织培养);得到单倍体植株;对其幼苗时期进行__________处理;得到了正常的_________植株(AABB、AAbb、aaBB、aabb四种类型)。
b 优点:_______________
(二)植物细胞培养:通过能够产生对人们有利的产物的细胞进行组织培养,从而让它们能够产生大量的__________产物。 注意:1、原理:__________
2、大规模获得细胞产品应用组织培养技术培养到____________阶段 (三)植物体细胞杂交技术 1、过程:
2、植物诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用_____________作为诱导剂。
(3)注意:a生理基础:_______________,_______________
b植物细胞融合前需用___________和___________除去细胞壁 (3)意义:__________________ ____ 二、动物细胞工程
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一般包括
__________________________________________________________________等技术
(一)动物细胞培养
(1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细
胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。
(2)动物细胞培养的流程:
取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用__________处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行_______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_________培养。 (3)细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴
壁。细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为_________________ 。 (4)动物细胞培养需要满足以下条件
①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的
抗生素,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 ②营养:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常
需加入血清、血浆等天然成分。
③温度:适宜温度:哺乳动物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4。
④气体环境:95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液
的pH。
(5)动物细胞培养技术的应用:制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、
培养医学研究的各种细胞。
(6)动物细胞培养与组织培养的主要区
________________________________________________ (二)动物体细胞核移植技术和克隆动物
1、哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植(比较容易)和体细胞核移植(比较
难)。
2、选用去核卵(母)细胞的原因:卵(母)细胞比较大,容易操作;卵(母)细胞细胞质多,营养丰富。
3、体细胞核移植的大致过程是:(右图)
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a__________○b________ (2)原理:注意:(1)○
_________全能性克隆羊性别:________
3、体细胞核移植技术的应用:
①加速家畜遗传改良进程,促进良畜群繁育; ②保护濒危物种,增大存活数量; ③生产珍贵的医用蛋白; ④作为异种移植的供体; ⑤用于组织器官的移植等。
4、体细胞核移植技术存在的问题:
克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。
(三)动物细胞融合
1、动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法
与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素________ _______________等。
2、动物细胞融合的意义:克服了__________________,成为研究细胞遗传、细胞
免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。 3、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:(重点记忆) 细胞工程 植物体细胞杂交 动物细胞融合 理论基础 细胞的全能性、细胞膜的流细胞增殖、细胞膜的流动性 动性 融合前处理 酶解法去除细胞壁(纤维素注射特定抗原,免疫处理正常小鼠 酶、果胶酶) 诱导手段 物理法:离心、振动、电激 物理法:离心、振动、电激 化学法:聚乙二醇(PEG) 化学法:聚乙二醇 生物法:灭活的病毒(灭活的仙台病毒) 诱导过程 第一步:原生质体的制备 正常小鼠免疫处理 (酶解法) 第二步:原生质体融合 动物细胞的融合 (物、化法) (物、化、生法) 第三步:杂种细胞的筛选和杂交瘤细胞的筛选与培养 培养 第四步:杂种植株的诱导与专一抗体检验阳性细胞培养 鉴定 单克隆抗体的提纯
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