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山东农业大学硕士学位论文表６柱层析各流份对朱砂叶螨成螨的触杀作用Ｔａｂ．６ＥｘｔｒａｃｔｒａｔｅａｎｄｍｏｒｔａｌｉｔｙｏｆｆｘａｃｔｉｏｎｓｏｆｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｅｘｔｒａｃｔｏｆＰａｖｉｅｕｌａｒｅＬ．ａｇａｉｎｓｔｒｃｉｎｎａｂａｒｉｎｕｓ注：不同字母代表差异显著性结果（Ｐ＜Ｏ．０５）。ＮＯｔｅ：ｖａｌｕｅｓｆｏｌｌｏｗｅｄｂｙｔｈｅｓ锄ｅｌｅｔｔｅｒａｌ℃ｎｏｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｅａｃｈｏｔｈｅｒａｔｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＯ．１０（Ｄｕｎｃａｎ，ＳＰＳＳ２００４）．将所得流分１６配制成５个不同浓度的药液（０．５、１、２、４、８ｍｇ?ｍＬｄ）进行生物活性测定，分别求出毒力回归方程泸５．２７０２＋１．００３８ｘ））及致死中量ＬＣ５０（０．９８８ｍｇ?ｍＬ。１），可见其有较好的生物活性。药液浓度为２ｍｇ?ｍＬ。１时，４８ｈ后害螨死亡率达３０８７．１２％，适于后续酶活性的进一步研究。因此选择２ｍｇ?ｍＬ。１这一药剂浓度，进行症状观察及酶的活性测定。３．６症状观察用流分１６（２ｍｇ?ｍＬ。１）及清水处理雌成螨进行症状观察（图１），发现０＂１２ｈ间，处理组害螨表现的十分兴奋，四处爬动，并急剧产卵，而对照组则缓慢的爬动，正常的取食叶片；１２＂－＇２４ｈ间，处理组试螨背部体液开始外渗，四处窜动，产卵量有所下降，而对照组行为正常，并开２９蔓董量墼竺鲞堕鋈丝塑竺壅始产卵；２４－－一３６ｈ间，处理组试螨体液仍保持外渗状态，身体开始收缩，对照组则正常爬动，未见异常；３６＂－＇４８ｈ间，处理组试螨身体逐渐收缩至死亡，对照组则身体饱满，活动正常。经流分１６处理后，表现的症状与神经毒剂有相似之处，如兴奋、抽搐等，由此推测，该活性物质可能蜚复谬｝照ｋＬ一～奠二：，群々。４．２褫黎‘魏：施砒如女二‰瓿＿。巍貔赢。，肇鳋∥‰—。。么∥≯对照ＣＫ图１朱砂叶螨雌成虫的中毒症状Ｆｉｇ．１ＰｏｉｓｏｎｏｕｓｓｙｍｐｔｏｍｓｏｆｔｈｅｆｅｍａｌｅａｄｕｌｔＴｅｒａｎｙｃｈａｓｖｉｅｎｎｅｎｓｉｓ对神经系统有一定的作用。３．７篇蓄提取物对螨的亚显微结构观察通过透射电镜技术，观察对照朱砂叶螨和篇蓄提取物处理后朱砂叶螨的亚显微结构变化。细胞核的亚显微结构表现出形态学上的变化（图２），对照组（ａ）害螨的细胞膜、核仁和各个结构都清晰可见，处理组（ｂ）双层细胞膜分离，核仁缩小，其他结构均遭到破坏；小液泡杂乱分布；内质网形态结构上也发生变化（图３），对照组（ａ）害螨的内质网结构完整，网上小颗粒密布，处理组（ｂ）害螨内质网溶解，呈不完整结构。线粒体与周围的膜变化更为明显（图４），螨线粒体内脊有规律排布，周围的膜清晰可见，处理组（ｂ）害螨的线粒体内脊不规则排列，有溶解现象，其周围的膜发生溶解；高尔基体有明显的消解现象（图５）对照组（ａ）害螨的高尔基体有３．７个扁平的膜囊重叠在一起，略呈弓形。小液泡散在于扁平膜囊周围，多集中在形成面附近，处理组（ｂ）扁平膜囊分解。３０山东农业大学硕士学位论文图２纯水（左）和篇蓄提取物（右）处理朱砂叶螨的细胞核变化图Ｆｉｇ．２Ｃｒｏｓｓｓｅｃｔｉｏｎｓｏｆｎｕｃｌｅｕｓｏｆｃｏｎｔｒｏｌ（１ｅｆｔ）ａｎｄｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｓｏｆＰｏｌｙｇｏｎｕｍａｖｉｃｕｌａｒｅＬ．（ｒｉｇｈｔ）ａｇａｉｎｓｔＴｅｔｒａｎｙｃｈｕｓｃｉｎｎａｂａｒｉｎｕｓ注：Ｎ的缩写代表细胞核；（左）８０，０００放大（右）４０，０００放大。Ｎｏｔｅ：Ａｂｂｒｅｖｉａｔｉｏｎｓｕｓｅｄ：Ｎ，ｎｕｃｌｅｕｓ：０１７蹲ｎａｌｍａｇｎｉｆｉｃａｔｉｏｎｗａｓ８０，０００ａｎｄ４０，０００．图３纯水（左）和蔚蓄提取物（右）处理朱砂叶螨的内质网变化图Ｆｉｇ．３Ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍｏｆｃｏｎｔｒｏｌ（１ｅ动ａｎｄｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｓｏｆＰｏｌｙｇｏｎｕｍａｖｉｃｕｌａｒｅＬ．（ｆｉｇｈｔ）ａｇａｉｎｓｔＴｅｔｒａｎｙｃｈｕｓｃｉｎｎａｂａｒｉｎｕｓ注：ＥＲ的缩写代表内质网：２５，０００和３０，０００放大。ｕｓｅｄ：ＥＲ，ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍ；Ｏｒｉｇｉｎ．ａｌｍａｇｎｉｆｉｃａｔｉｏｎｗａｓ２５，０００ａｎｄ３０，０００．３１Ｎｏｔｅ：Ａｂｂｒｅｖｉａｔｉｏｎｓ图４纯水（左）和蔚蓄提取物（右）处理朱砂叶螨的线粒体变化图Ｆｉｇ．４Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｏｆｃｏｎｔｒｏｌ（１ｅａ）ａｎｄｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｓｏｆＰｏｌｙｇｎｏｎｕｍａｖｉｃｕｌａｒｅＬ．Ｃｏ）ａｇａｉｎｓｔＴｅｔｒａｎｙｃｈｕｓｃｉｎｎａｂａｒｉｎｕｓ注：ＭＴ的缩写代表线粒体；３０，０００和８，０００放大。Ｎｏｔｅ：Ａｂｂｒｅｖｉａｔｉｏｎｓｕｓｅｄ：ＭＴ，ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ．０ｒｉｇｉｎａｌｍａｇｎｉｆｉｃａｔｉｏｎｗｅｒｅ３０，０００图５纯水Ｃａ）和蔚蓄提取物（ｂ）处理朱砂叶螨的高尔基体变化图Ｆｉｇ．５Ｇｏｌｇｉａｐｐａｒａｔｕｓｏｆｃｏｎｔｒｏｌ（ａ）ａｎｄｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｓｏｆＰｏｌｙｇｏｎｕｍａｖｉｃｕｌａｒｅＬ．（ｂ）ａｇｈａｓｔＴｅｔｒａｎｙｃｈｕｓｃｉｎｎａｂａｒｉｎｕｓ注：ＧＡ的缩写代表高尔基体；１５，０００放大。Ｎｏｔｅ：Ａｂｂｒｅｖｉａｔｉｏｎｓｕｓｅｄ：ＧＡ，Ｇｏｌｇｉａｐｐａｒａｔｕｓ；Ｏｄｆｌｎｆｌｍａｇｎｉｆｉｃａｔｉｏｎｗａｓ１５，０００．３２
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