碱性磷酸酶

图5：碱性磷酸酶的热稳定性

由图5可知，温度达到37℃以后酶活性急剧下降，所以碱性磷酸的热稳定范围是25℃~37℃。

2.4 抑制剂类型鉴别实验

表6：在KH2PO4作用下碱性磷酸酶的A510表

管号 1 2 3 4 5 1/ [S] 0.5 0.25 0.17 0.125 0.0625 1/A510 2.91 4.03 1.79 1.75 3.42

以表6中的1/A510为纵坐标，以底物浓度倒数1/[S]为横坐标作图，如图6：

图6：在KH2PO4下碱性磷酸酶的A510与底物浓度关系图

由图6得出函数3.75/A510=0.603/[S]+9.693，横轴的截距即为—1/Km，所以Km=0.409mmol/L，所以加抑制剂之后的Km值较小，再由图1可看出加抑制剂后函数在纵轴上的截距增大，可判断出该抑制剂属于反竞争抑制剂。

3. 结论及讨论

实验得到的A510值较低，即Km值较小，酶活性较低，可能是提取分离纯化碱性磷酸酶的时候操作有些问题。从实验数据得知，碱性磷酸酶的最适pH为10、酸碱稳定范围为8~10、最适温度为37℃、热温度范围为25℃~37℃，KH2PO4为反竞争抑制剂。

参考文献：郭勇.酶工程.科技出版社，2009.

致谢：实验过程中我学习到更专业详细的知识，感谢老师的指导，感谢组员的

合作。

碱性磷酸酶的分离纯化及性质探究

姓名：李小旭班级：生物技术学号： 1101班 201131301007