暨南大学2013年硕士学位研究生入学考试生物化学A试题及答案

2013生化解答

名词解释

1. 解偶联剂：氧化磷酸化反应中的一种抑制剂，使磷酸化作用与电子传递在一个或多个电

子传递链的位点解除偶联。

2. 激素敏感性脂肪酶：是脂肪分解的限速酶，受多种激素的调控。促进脂肪动员的激素称

为脂解激素如肾上腺素、胰高血糖素、ACTH及TSH；胰岛素、前列腺素E2及盐酸等抑制脂肪动员的激素称为抗脂解激素。 3. 葡萄糖-丙氨酸循环：肌肉中的氨基酸将氨基转给丙酮酸生成丙氨酸，后者经血液循环转

运至肝脏经过联合脱氨基作用再脱氨基，放出的氨用于合成尿素；生成的丙酮酸经糖异生转变为葡萄糖后再经血液循环转运至肌肉重新分解产生丙酮酸，丙酮酸再接受氨基生成丙氨酸。丙氨酸和葡萄糖反复地在肌肉和肝之间进行氨的转运，故将这一循环过程称为丙氨酸-葡萄糖循环。

4. 错配修复：在含有错配碱基的DNA分子中，使正常核苷酸序列恢复的修复方式；主要

用来纠正DNA双螺旋上错配的碱基对，还能修复一些因复制打滑而产生的小于4nt的核苷酸插入或缺失。MMR的过程需要区分母链和子链，做到只切除子链上错误的核苷酸，而不会切除母链上本来就正常的核苷酸。修复的过程是：识别出正确的链，切除掉不正确的部分，然后通过DNA聚合酶III和DNA连接酶的作用，合成正确配对的双链DNA。 5. 泛素：是一种存在于大多数真核细胞中的小蛋白。它的主要功能是标记需要分解掉的蛋

白质，使其被水解。当附有泛素的蛋白质移动到桶状的蛋白酶的时候，蛋白酶就会将该蛋白质水解。泛素也可以标记跨膜蛋白，如受体，将其从细胞膜上除去。

6. 血浆脂蛋白：指哺乳动物血浆(尤其是人)中的脂-蛋白质复合物。血浆脂蛋白可以把脂类

(三酰甘油、磷脂、胆固醇)从一个器官运输到另一个器官。 7. 生物酶工程

8. 光合磷酸化：由光照引起的电子传递与磷酸化作用相偶联而生成ATP的过程称光合磷酸

化

9. 酮血症：当畜体患有糖尿病，糖类物质利用受阻或长期不能进食，机体所需能量不能从

糖的氧化取得，于是大量动用脂肪提供能量，脂肪酸大量氧化，生成的酮体超过了肝外组织所能利用的限度，导致血液中酮体堆积，含量升高，临床上称为酮血症。 二、问答题

1、糖蛋白的生物学功能是什么？

答：蛋白的主要生物学功能：

（1）激素功能：一些糖蛋白属于激素，例如促滤泡激素、促黄体激素、绒毛膜促性腺激素等均属于糖蛋白。

（2）保护机体：细胞膜中的免疫球蛋白、补体也是糖蛋白。

（3）凝血和纤溶作用：参与血液凝固和纤溶的蛋白质例如凝血酶原、纤溶酶原均为糖蛋白。

（4）具有运输功能：例如转运甲状腺素的结合蛋白、运输铜元素的铜蓝蛋白、运输铁元素的转铁蛋白等均属于糖蛋白。

（5）决定血液的类型：决定血型的凝集原A,B,O以糖蛋白和糖脂的形式存在。 （6）与酶的活性有关：糖蛋白在酶的新生肽链折叠、转运和保护等方面普遍起作用。

（7）一些凝集素属于糖蛋白。

2、一条单链DNA与一条单链RNA相对分子质量相同，如何将它们区分开？ 答：（1）、用碱分解：能分解的是RNA，不能分解的是DNA

（2）、用专一性酶分解：如RNase1只分解RNA，DNase1只分解DNA （3）、用酸水解，然后进行单核苷酸层析：含U的是RNA，含T的是DNA （4）、颜色反应：RNA与地衣酚生成鲜绿色化合物，DNA与二苯胺生成蓝色化合物 3、何为分子杂交，举例说明其在实际工作的应用。

答：分子杂交：确定单链核酸碱基序列的技术。其基本原理是待测单链核酸与已知序列的单链核酸（叫做探针）间通过碱基配对形成可检出的双螺旋片段。这种技术可在DNA与DNA，RNA与RNA，或DNA与RNA之间进行，形成DNA-DNA，RNA-RNA或RNA-DNA等不同类型的杂交分子。

其在实际工作中的应用：

（1）可通过特定序列的探针检测样品中是否含有与之同源的核酸序列。 （2）基因克隆的筛选 （3）酶切图谱制作

（4）基因组中特定基因序列的定量和定性检测 （5）基因突变分析

（6）疾病的诊断、微生物病原体检测。

4、哪类酶不遵守米氏方程？它们的反应速度与底物浓度的曲线有什么区别？ 答：

5、简述血糖中葡萄糖的来路与去路。 答：1.血糖来源

（1）糖类消化吸收：食物中的糖类消化吸收入血，这是血糖最主要的来源。 （2）肝糖原分解：短期饥饿后，肝中储存的糖原分解成葡萄糖进入血液，

（3）糖异生作用：在较长时间饥饿后，氨基酸、甘油等非糖物质在肝内合成葡萄糖。 （4）其他单糖的转化。 2.血糖去路

（1）氧化分解：葡萄糖在组织细胞中通过有氧氧化和无氧酵解产生ATP，为细胞代谢供给能量，此为血糖的主要去路。

（2）合成糖原：进食后，肝和肌肉等组织将葡萄糖合成糖原以储存。 （3）转化成非糖物质：转化为甘油、脂肪酸以合成脂肪；转化为氨基酸以合成蛋白质。 （4）转变成其他糖或糖衍生物，如核糖、脱氧核糖、氨基多糖等。

（5）血糖浓度高于肾阈（8.9～9.9mmol／L，160～180mg／dl）时可随尿排出一部分。 6、氨基酸脱氨基后的碳链如何进入柠檬酸循环？

答：氨基酸脱氨基后的碳链分别经形成乙酰-CoA的途径、阿尔法-酮戊二酸途径、琥珀酸-CoA的途径、延胡索酸途径及草酰乙酸途径进入柠檬酸循环。

7、简述核酸变性和复性的过程，以及影响溶解温度和复性速度的主要因素。

答：核酸变性：在物理和化学因素的作用下，维系核酸二级结构的氢键和碱基堆积力受到破坏，DNA由双链解旋为单链的过程。

核酸复性：DNA水溶液加热变性时，双螺旋两条链分开，如果缓慢冷却，两条链可以完全重新结合成和原来一样的双螺旋的过程。 影响核酸溶解温度的主要因素有： ① 外部因素：pH、离子强度。pH过高或者过低都会降低Tm值。随着溶剂内离子强度上升，Tm值也随着增大。 ②内部因素：DNA的碱基比例、DNA的均一性；在相同条件下，DNA内G-C配对含量高，

其Tm值也高。DNA越均一，Tm值范围越窄。 影响核酸复性速度的主要因素有：

1.退火的温度,温度过高,不容易复性,温度过低,会产生一些杂的基因片段。 2.pH pH要呈中性。

8、论述蛋白质、糖类与脂类代谢的联系 答：（1）糖类代谢和蛋白质代谢的关系

糖类和蛋白质在体内是可以相互转化的。几乎所有组成蛋白质的天然氨基酸都可以

通过脱氨基作用，形成的不含氮部分进而转变成糖类；糖类代谢的中间产物可以通过氨基酸转换作用形成非必需氨基酸。注意：必需氨基酸在体内不能通过氨基转换作用形成。

（2）糖类代谢与脂质代谢的关系 糖类代谢的中间产物可以转化成脂肪，脂肪分解产生的甘油、脂肪酸也可以转化成

糖类。糖类可以大量转化成脂肪，而脂肪却不能大量转化成糖类。

（3）蛋白质代谢和脂质代谢的关系 一般情况下，动物体内的脂肪不能转化为氨基酸，但在一些植物和微生物体内可以

转化；一些氨基酸可以通过不同的途径转变成甘油和脂肪酸进而合成脂肪。

（4）糖类、蛋白质和脂质的代谢之间相互制约 糖类可以大量转化成脂肪，而脂肪却不可以大量转化成糖类。只有当糖类代谢发生

障碍时才由脂肪和蛋白质来供能，当糖类和脂肪摄入量都不足时，蛋白质的分解才会增加。例如糖尿病患者糖代谢发生障碍时，就由脂肪和蛋白质来分解供能，因此患者表现出消瘦。 9、请举出外源DNA于载体DNA相连接的方法并比较他们的优点。 答：主要是依赖于核酸内切限制酶和DNA连接酶的作用。 黏性末端的连接法

同一种酶产生的黏性末端的连接

当载体和外源DNA用同一种限制性内切核酸酶消化时，可产生相同的黏性末端。当带有相同黏性末端的DNA片段一起退火，在DNA连接酶的催化作用下黏性末端的单链之间便可进行碱基配对，被共价地连接起来形成重组DNA分子。 缺点：产生的目的基因会自身环化。 不同种酶产生的黏性末端的连接

用两种限制性内切核酸酶消化载体DNA和外源DNA片段，使载体和外源目的基因的两端分别形成不同的黏性末端，将它们混合，在连接酶的作用下相同的黏性末端可以退火连接成重组DNA分子，实现DNA的定向连接。

优点：避免了载体和外源DNA片段的自身连接，外源DNA只能定向的连接到载体的相应位点之间。

缺点：但也不可避免的会发生载体的位点黏性末端之间两个碱基互补形成开环。

还可应用同尾酶产生的黏性末端进行连接，这样可以避免载体自连并得到最高的连接。 平末端的连接

优点：给不同的DNA分子的连接带来极大的方便。

缺点：连接效率低，限制性内切核酸酶原有识别系列可能被破坏，外源DNA的插入没方向性，可能产生多拷贝插入现象。

同聚物加尾法：优点：既可使两个平末端的DNA片段进行连接，也可以使平末端的DNA片段与黏性末端DNA片段连接，连接效率较高

缺点：操作繁琐，外源片段难以收回，同聚物尾巴可能会影响外源基因表达。不能把插入片段再切下来

衔接物连接法：适用于没有衔接物限制性内切核酸酶酶切位点的外源DNA片段。

优点：是即有效又实用的手段，兼具同聚物加尾法和黏性末端连接法的优点，可以使任意两个不同末端的DNA片段都能连接起来，增加衔接物浓度还可显著提高效率。 缺点：如果待克隆的DNA片段或基因的内部含有与衔接物相同的限制性内切核酸酶识别位点，这样在酶切消化衔接物产生黏性末端的同时，也会把外源基因切成不同的片段，给后续的亚克隆及其他操作造成麻烦。 接头分子连接法：

优点：能较好的克服衔接物连接法的缺点 缺点：接头之间会连接。 PCR产物的连接

引入酶切位点连接法

优点：效率较高，可有效地定向克隆PCR产物 缺点：必须保证所选酶切位点在扩增的PCR产物内部不存在，还需在5-端多合成3-4个碱基一利于稳定结合。

T-A克隆法：优点：效率比平末端的连接至少高出100倍，可有效的直接克隆PCR产物。 Gateway载体构建系统：其是一个高效的大规模克隆系统。 优点：可以在不进行酶切和连接的基础上实现基因快速克隆及载体间平行转移，同时还有利于保持正确的开放阅读框和插入方向。可以使用并表达来自多种类型的DNA序列。很适应于将大量的DNA序列转移到各种不同的表达载体上。可通过添加Gateway盒轻易地将直接感兴趣的载体改造成Gateway目的载体。 缺点：DNA重组序列位点具有毒性

2012年生化问答

1、 如何看待RNA功能的多样性？其核心作用是什么？

答：①控制蛋白质合成； ②作用于RNA转录后加工与修饰； ③基因表达与细胞功能的调节； ④生物催化与其他细胞持家功能； ⑤遗传信息的加工与进化。

核心作用是：遗传信息由DNA到蛋白质的中间传递体。

2、 生物膜分子结构的理论模型有哪些？“流动镶嵌模型”的基本内容是什么？

答：