培养基模拟灌装管理 - 图文

空气微生物数量监测 悬浮粒子监测 灌装过程中对环沉降平皿法 境进行动态沉降菌测试（4个小时） 粒子计数器 浮游菌测试仪 灌装过程全程动态连续测试 灌装过程全程动态连续测试 根据取样点分布图布臵培养皿，在整个生产过程中动态测试。 监测应由专人按标准操作程序进行。 浮游菌监测 监测应由专人按标准操作程序进行。 制剂生产过程中操作人员微生物监测点分布图

接触平皿使用图示：

培养基模拟灌装验证微生物测点数一览表

序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 采样点 操作工左手 操作工右手 操作工前胸 操作工腰部 操作工右臂手肘 操作工左臂手肘 操作工分装机台面 验证人员左手 验证人员右手 门把手 灌装机胶塞震荡塞 灌装针头或螺杆 西林瓶灭菌烘干隧道出口转盘 电子天平托盘 电话机 棉签擦拭 灌装过程前 取样方式 采样要求 房间名称 接触平皿（0.2u青霉素酶） 灌装过程后 灌装间 可接受标准

棉签擦拭检验中手部不得检出菌落，其余部位菌落应≤5个/皿。 13. 培养基模拟灌装

目的

模拟无菌粉针分装过程，确认该过程符合GMP要求。

程序 1）模拟分装

先将培养基以每瓶5ml灌装入西林瓶中，再在装有培养基的西林瓶中分装入0.5

克无菌粉末，每台分装机至少分装5000瓶，实际分装应略大于5000瓶（例如：5300瓶），确保有足够的样本用于分析，灌装速度应降为日常生产时正常速度的1/3 ~ 2/3。对全部样品加塞，轧盖，并用黑色记号笔按顺序（以一定数量为一个单位）编号，确保验证结果可追溯。

将所有经加塞、轧盖后的模拟灌装样品倒臵培养，使瓶内的胰酪胨大豆肉汤培养基充分与玻璃瓶瓶壁和胶塞接触，并对所有样品进行培养观察。

模拟分装过程中的干扰试验：

1）模拟分装过程中由于粉末粘性大，导致装量不准确，操作人员需对分装机粉斗进行拆卸，重新安装（一般在分装至2000瓶左右进行）。重新分装过程中，验证人员对分装粉末具塞的样品进行加取，加取量为100瓶，另外标注编号，送QC培养。车间人员对分装机安装进行确认，在现场操作记录的备注中标注。

2）模拟分装过程中由于分装机压塞操作出现故障，车间机修人员进入维修（一般在分装至4000瓶左右）。在维修结束后，验证人员对维修人员进行微生物测试，测试方法及测试点参照操作人员微生物测试方法及测试点。并且对分装样品进行加取，加取量为100瓶，另外标注编号，送QC培养。车间人员在现场操作记录的备注中标注维修记录。 2）微生物培养 （1）阳性对照

用培养基灵敏度试验的样品作阳性对照，阳性对照细菌生长情况应良好。 （2）阴性对照

以模拟分装用无菌粉末抑菌性试验中空白培养基样品作为阴性对照。 （3）试验样品培养

模拟分装的全部样品先在23~28℃培养7天，再在30~35℃培养7天。14天后检查微生物生长情况。对于长菌的样品，应记录其瓶子所属单位编号，对铝盖及胶塞的密封性进行检查。对于微生物污染的样品应对菌落进行鉴别试验。在调查结束后，应对产生污染的原因进行总结、记录。

（4）试验样品营养性再确认试验（灵敏度检查）

若所有试验样品均无菌生长，再抽取样品进行营养性试验。随机抽取取样品70瓶，混合后分成7组，每组10瓶。接种量为每瓶1ml(含菌量为10~100CFU)。具体如下表：

取样时间 取样数 10 10 10 10 10 10 10 接种菌种 枯草芽孢杆菌 生孢梭菌 常见杆菌 白色念珠菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 黑曲霉 培养温度和时间 30~35℃培养箱中培养5天 30~35℃培养箱中培养5天 30~35℃培养箱中培养5天 23~28℃培养箱中培养5天 30~35℃培养箱中培养5天 30~35℃培养箱中培养5天 23~28℃培养箱中培养5天 所有试验样品均无菌生长后 可接受标准

模拟分装：除样品外，其余条件均符合粉针剂生产工艺的要求。 产品培养：

①阴性对照，不得有菌生长； ②阳性对照，微生物生长良好；

③模拟灌装样品100％进行微生物培养，污染概率＜0.1%为合格（可信限为95%）。④样品营养性再确认试验（灵敏度检查）：培养后加菌的培养基管应有菌，且生长良好。 14. 偏差处理

目的

记录在整个方案执行过程中所发生的偏差

程序

发生任何微生物污染，则应立即停止生产，调查并记录污染发生的原因，在调查结束并采用相应的措施后应重复进行培养基模拟分装试验。

测试报告

偏差记录样张见附录，填写后附在相关的测试报告后。 15. 验证结果评价及建议

评价培养基模拟灌装试验结果的主要指标之一是微生物污染水平，若试验结果证明其污染水平超过规定的合格限度，则应立即停止生产，调查并记录污染产生的原因。在调查结束并采用相应的措施后应重复进行培养基模拟灌装试验。

原因调查至少应包括如下项： （1）生产环境微生物监测数据； （2）生产环境悬浮粒子监测数据； （3）人员污染的监测数据；

（4）HEPA过滤器的完整性检测、粒子、风速等；