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选修3知识点复习试卷
专题1 基因工程
(一)基因工程又叫 或 。
原理是 ,操作水平是分子水平。优点:打破物种界限; 地改造生物的遗传性状。 (二)基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”—— (1)来源:主要从原核生物中分离纯化出来。
(2)功能:能识别DNA分子中特定 ,使每一条链中特定部位的两个核苷酸之
间的磷酸二酯键断开
(3)特点:具有 性。
(4)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式: 和 。 2.“分子缝合针”—— (1)两种DNA连接酶( 和 ):区别:前者只能连接黏性末端;而后者能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的脱氧核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”—— (1)载体具备的条件:①能够稳定保存并复制;②有一至多个限制酶酶切位点 ③含有标记基因,便于 。④对受体细胞无害。
(2)最常用的载体是质粒,化学本质是 。 (3)其它载体:λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 (三)基因工程的基本操作程序 第一步:目的基因的获取
1.目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因。
2. 基因文库包括 和 。二者的区别:
文库类型 文库大小 基因中是否有启动子 基因中是否有内含子 基因多少 物种间基因交流 小 大 无 有 无 有 某种生物的部分基因 某种生物的全部基因 可以 部分基因可以 3.人工合成目的基因的两个条件:基因比较小;核苷酸序列已知。 4. 扩增目的基因
(1) 是多聚酶链式反应的缩写,原理DNA双链复制。
(2)过程:第一步变性:加热至90~95℃,DNA解链,不需要解旋酶;第二步复性:冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链。变性和复性利用了DNA的热变性原理;第三步延伸:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
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第二步:
基因表达载体的组成:除了目的基因外,还必须有 等。
启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动 。标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞 出来。常用的标记基因是抗生素基因。 第三步:将目的基因导入受体细胞
1、将目的基因导入植物细胞:采用最多的是 法,其次还有基因枪法和花粉管通道法等。 2、将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是 法。此方法的受体细胞多是 。 3、将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,最常用的原核细胞是 ,其转化方法是:先用 处理细胞,使其成为感受态细胞,再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成 过程。 第四步:目的基因的检测和鉴定
1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用 。 2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是 。
3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行 。
4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如:转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 (四)基因工程的应用
1.植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。
2.动物基因工程:提高动物生长速度;改善畜产品品质;用转基因动物生产药物:如 生物反应器和膀胱生物反应器,方法是将目的基因导入哺乳动物的 中,使其发育成转基因动物。 3.基因治疗是把正常基因导入病人的体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗的目的,这是治疗遗传病最有效的手段。
(五)蛋白质工程的概念:基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质,蛋白质工程师在基因工程的基础上,延伸出来的第二代基因工程。
基本途径是:从预期的 出发→设计预期的 →推测应有的 序列→找到相对应的 序列。
专题2 细胞工程
(一)植物细胞工程 1.植物组织培养技术 (1)原理:
(2)过程:离体的植物器官、组织或细胞 植物体 常用的植物激素 和 。 2
(3)用途:微型繁殖、作物脱毒(选材应该选择茎尖组织)、制造人工种子、单倍体育种(最大的优点是 ,得到的全为纯种)、筛选突变体、细胞产物的工厂化生产。 2.植物体细胞杂交技术
(1)原理: (2)过程:
去壁的方法:
诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电激等。化学法是用 作为诱导剂。 (3)意义:克服了 障碍。 (二)动物细胞工程
动物细胞工程中常用的技术手段有 、 、 、 等,其中, 是其他技术的基础。 1.动物细胞培养
(1)流程:取动物组织块→剪碎→用 处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行 培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 (2)悬液中分散的细胞很快就贴服在瓶壁上,称为细胞贴壁。细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。 (3)动物细胞培养需要满足以下条件
①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
②营养:培养基成分: 、氨基酸、促生长因子、无机盐等。通常需加 等天然成分。
③温度和PH:适宜温度:哺乳动物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4。
④气体环境:95%空气+5% CO2。O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是 。 (4)动物细胞培养技术的应用:制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质。 2.动物体细胞核移植技术和克隆动物
(1)哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植(比较容易)和体细胞核移植(比较难)。 (2)选用去核 的原因:比较大,容易操作;细胞质多,营养丰富;含有多种促进细胞发挥全能性的物质。
(3)体细胞核移植的大致过程是:(书本P74)
供体体细胞→细胞培养→将供体细胞 ↓注入 (胚胎移植)
卵巢中卵母细胞( )→去核→去核卵母细胞 重组胚胎 代孕动物 遗传基础相同的犊牛
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3.动物细胞融合
(1)动物细胞融合也称细胞杂交,原理是 。
(2)诱导动物细胞融合方法与植物原生质体融合方法类似,常用的诱导因素有 等。
(3)动物细胞融合的意义:克服了 障碍,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。
4.单克隆抗体 (1)单克隆抗体的制备过程:
给小鼠注射特定抗原蛋白→分离出 融合 (选择)培养基 克隆 体内培养
培养骨髓瘤细胞→骨髓瘤细胞 多种杂交细胞
单克隆抗体
专一抗体检测 阳性细胞 体外培养 (2)杂交瘤细胞的特点:既能大量 ,又能产生 。 (3)单克隆抗体的优点: 。
(4)单克隆抗体的作用:① 作为诊断试剂:准确识别各种抗原物质的细微差异,并跟一定抗原发生特异性结合,具有准确、高效、简易、快速的优点。
② 用于治疗疾病和运载药物:可制成“ ”,将药物定向带到癌细胞所在位置。
专题3 胚胎工程
(一)体内受精和早期胚胎发育
1.胚胎工程是指对动物 或配子所进行的多种显微操作和处理技术,如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。 2.精子和卵子的发生
(1)精子的发生:①场所: 。②时间: 至生理机能衰退。③精子发生的三个阶段 。④精子变形:细胞核变为精子的头部的主要部分;高尔基体发育为 ; 演变为精子的尾;线粒体聚集在尾的基部形成线粒体鞘,其他物质浓缩为球状的原生质滴,最后脱落。
(2)卵子的发生 ①场所: 。②卵子发生过程中:减数第一次分裂发生在排卵前后(时候),减数第二次分裂发生在受精作用过程中。
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