协和医科大学2004年分子生物学

协和医科大学2004年分子生物学（博士）

一、名解翻译并且解释名词: 1.同工酶——（isoenzyme）

同工酶是指催化相同的化学反应，而酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。同工酶是由不同基因或等位基因编码的多肽链，或由同一基因转录生成的不同mRNA翻译的不同多肽链组成的蛋白质。翻译后经修饰生成的多分子形式不在同工酶之列

2.α-互补—（Alpha complementation）

α-互补是指 lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的 β-半乳糖苷酶（β -galactosidase ，由 1024 个氨基酸组成）阴性的突变体之间实现互补。α-互补是基于在两个不同的缺陷 β-半乳糖苷酶之间可实现功能互补而建立的。

3.RT-PCR ——（reverse transcription PCR逆转录PCR）

聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术，可以检测很低拷贝数的RNA。RT-PCR广泛应用于遗传病的诊断，并且可以用于定量监测某种RNA的含量。（检测基因表达的方法，参见Northern Blot法。

RT-PCR的关键步骤是在RNA的反转录，要求RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质。常用的反转录酶有两种，即鸟类成髓细胞性白细胞病毒（avian myeloblastosis virus,AMV）反转录酶和莫罗尼鼠类白血病病毒（moloney murine leukemia virus,MMLV）反转录酶。

4.染色质——

5.核基质—— 6.转化——

7.密码子的简并性

8.基因簇 chromatin chromosome

二、简答

1.为什么核酸和蛋白都是有方向的?

2.信号转导的cAMP通路,cAMP激活蛋白激酶的分子机制?

3.紫外线造成皮肤细胞DNA何种损伤?如何修复?

4.使肽键形成的酶叫什么名字?其化学本质是什么?存在于细胞的 什么位置?

三、论述题

1.什么是内切酶的星号活性？影响因素是什么？

2.已知一个蛋白质的全长CDNA,设计一个实验步骤从CDNA开始提纯此蛋白.

四、判断对错,说明理由

1.细菌的操纵基因总在启动子的后面.

2.乳酸操纵子模型中,阻遏蛋白与RNA聚合酶结合阻止启动子启动.

五、论述

给定一个cDNA序列,如何表达,纯化到蛋白质

六、填空

1.科学家-----------首次证明DNA是遗传物质,该证明实验是------------- 2.能够进行可逆磷酸化的氨基酸是(3个)-----------

3.蛋白在280NM最大的吸收峰,因为其含有哪三个蛋白------- 4.核酸在——nm有最大的光吸收,因为_____

5.维持DNA双螺旋的力是---------和---------

6.经典中心法则认为信息是从----------到----再到----------- 7.真核细胞核糖体大亚基的-----rRNA与原核细胞--------同源. 8.Plindromatic sequence 又叫----------,定义是:--------------------