端粒酶活性检测

端粒酶活性检测

一、TRAP-PCR银染法

实验目的：通过TRAP-PCR银染法检测鉴定样品中端粒酶活性

实验原理：端粒DNA与细胞的寿命密切相关，而合成又依赖于端粒酶。正常人体细胞中不能检测出端粒酶活性的表达，而肿瘤细胞株及大多数肿瘤组织中的端粒酶活性却异常的高表达。TRAP－银染法端粒酶活性检测试剂盒是采用端粒重复序列扩增的方法，利用银染技术检测端粒酶的活性。阳性结果在凝胶电泳上显示相隔6 bp的梯状条带，条带的深浅表示端粒酶活性的大小。

实验材料：

试剂：TRAP－PCR银染法端粒酶活性检测试剂盒、Lysis buffer、PCR相关试剂、聚丙烯酰胺电泳试剂、蛋白定量试剂等

仪器：涡旋仪、低温高速离心机、PCR扩增仪等

实验内容与方法：

1．细胞端粒酶或组织标本端粒酶的提取 2． PCR扩增

3．聚丙烯酰胺凝胶电泳 4．银染

二、荧光定量PCR法（KGSA006-2）

实验目的：通过荧光定量PCR法检测鉴定样品中端粒酶活性

实验原理：端粒酶蛋白催化亚基（TERT或TRT）具有反转录酶的主要特征，其表达在正常细胞中受到抑制，与端粒酶活性的表达一致。实时荧光定量PCR端粒酶检测实验通过检测TERT的mRNA表达水平来间接反应端粒酶的活性。

实验材料：

试剂：荧光定量PCR法端粒酶活性检测试剂盒、Lysis buffer、荧光定量PCR相关试剂、蛋白定量试剂等

仪器：涡旋仪、低温高速离心机、荧光定量PCR扩增仪等

实验内容与方法：

1．样本lysis buffer提取

2．并进行逆转录获得cDNA； 3．实时定量PCR反应

客户提供： 1、实验信息

样品信息（名称、来源等） 2、实验材料提供

（1）样本材料新鲜或冷冻细胞不少于5×106个 组织样本不少于50mg （2）试剂：

采用凯基生物自产端粒酶活性检测试剂盒等。或可按客户要求代订和使用其它品牌公司试剂。

服务周期：2周至8周（具体视样品数而定）

结果提交：提交实验报告书（包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析）、原始数据、图片，文本或电子版。

收费标准与付费方式：

TRAP－PCR银染法端粒酶活性检测 500元/样品； 荧光定量PCR法端粒酶活性检测 600元/样品。 实例

端粒酶银染法检测

端粒酶荧光定量PCR法检测

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