湖南农业大学生物化学-03-蛋白质化学-05蛋白质的理化性质 - PDF转换成word转换器 - 图文

①滤纸电泳：

指用滤纸作为支持介质的 电泳方法。是最早使用的 区带电泳。

②醋酸纤维素薄膜电泳： 分离速度快、电泳时 间短、样品用量少， 比纸电泳分辨率高。 适合于病理情况下微 量异常蛋白的检测。

以上二种类型的电泳，由于介质的孔径度大，没有分子筛效应， 主要靠被分离物的电荷多少进行分离。

③凝胶电泳

+

-

A

B C

图中A，B，C均为阳离子，分子量大小依次为 MA=MB>MC，所带电荷量相同QA=QB=QC。

电荷效应和分子筛效应共同作用

分子筛效应：分子量或分子大小和形状不同的蛋白质 通过一定孔径分离胶时，受阻滞的程度不同而表现 出不同的迁移率，这就是分子筛效应。分子量小， 阻力小，移动快；分子量大，阻力大，移动慢。

琼脂糖凝胶电泳

琼脂糖(agarose)是从琼脂中精制出来的胶状多糖， 琼脂又是从天然的红色的墨角藻(red-seaweed)中提 取出来的。

?琼脂糖凝胶属于大孔胶，可以分析10 的大分子，

7 但电泳分辨率低于聚丙烯酰胺凝胶电泳。

?具有稳定的物理化学性质，对样品吸附极小； ?琼脂糖无毒，具有热可逆性，胶凝过程不需催化 剂，制备简单、快速。

?琼脂糖凝胶电泳操作简单，电泳速度快，染色、 脱色程序简单快速；

聚丙烯酰胺凝胶电泳

聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(acrylamide，简称Acr)和交 联剂N,N’-甲叉双丙烯酰胺(N,N’-methylenebisacrylamide，简称 Bis)在催化剂和加速剂作用下聚合交联而成的三维网状结构的 凝胶。用此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳 (polyacrylamide gel electrophorsis，简称PAGE)。 ?凝胶透明，有弹性，机械性能好

?凝胶性能稳定，电渗作用小，无吸附，化学惰性强。电泳过程 中不受温度、pH的变化的影响。

?集浓缩、分子筛和电荷效应为一体，具有高分辨率，重复性好