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才能达到杀死所有微生物及其芽孢、孢子的目的。
巴氏消毒法:是以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物,而又不致严重损害其 营养成分和风味的消毒方法。目前主要用于葡萄酒,啤酒,果酒及牛乳等食品的消毒。具体方法分三类:低温维持巴氏消毒法,高温瞬时巴氏消毒法,超高温巴氏消毒法。
高压蒸汽灭菌法:即用高压蒸汽灭菌器进行灭菌的方法,是应用最广泛的、最有效的灭菌方法。凡是耐高温、不怕潮湿的物品,如各种培养基、溶液、玻璃器皿、金属器械、敷料、橡皮手套、工作服和小动物尸体等均可用这种方法灭菌
十 、叙述紫外线杀菌法及其应用。 答:波长200-300nm的紫外线(包括日光中的紫外线)具有杀菌作用。紫外线波长:136-400nm,以250-300nm很强,265-266nm最强。但其穿透力弱,紫外线的部分波长与DNA的吸收光谱范围一致,作用于DNA使同一条DNA链上的相邻的两个胸腺嘧啶共价结合而形成二聚体,干扰DNA复制与转录时的正常碱基配对,导致细菌致病性突变而死亡。此外紫外线还可使空气中的分子氧变为臭氧,释放氧化能力强的原子氧,具有杀菌作用。
用于微生物实验室、无菌室、手术室、传染病房、种蛋室等的空气消毒,或用于不能用高温或化学药品消毒物品的表面消毒
十一、试述细菌具有致病性的主要依据(柯赫法则)。
答:第一,特殊的病原菌应在同一疾病中查见,在健康者不存在。第二,此病原菌能被分离培养而得到纯种。第三,此纯培养物接种易感动物,能导致同样病症。第四,自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养。
? 如何从分子水平上解释柯赫法则?
答:第一,应在致病菌株中检出某些基因或其产物,而无毒力菌株中没有;第二,如有毒力菌株的某个基因被损坏,则菌株的毒力应减弱或消除。或者将此基因克隆到无毒菌株内,后者成为有毒力菌株;第三,将细菌接种动物时,这个基因应在感染的过程中表达;第四,在接种动物检测到这个基因产物的抗体,或产生免疫保护。
十二、什么是细菌外毒素?其基本特性是什么?
细菌外毒素在生长过程中由细胞内分泌到细胞外的毒性物质。能产生外毒素的细菌大多数是革兰氏阳性菌,少数是革兰氏阴性菌。将产生外毒素的细菌的液体培养物用滤菌器过滤除菌,即能获得外毒素。其特点是:
(1)化学成分是蛋白质,分子量为27000~900000道尔顿;( (2)不稳定,易被热、酸及酶所灭活;
(3)可经甲醛(0.3~0.4%)处理,脱毒成为类毒素; (4)抗原性强,可刺激机体产生高效价的抗毒素;
(5)具亲组织性,但作用于组织有选择性。一般不引起宿主发热,但常可抑制宿主蛋白质
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的合成,对宿主有细胞毒及神经毒性;
(6)毒性极强,极微量就可使实验动物死亡。
十三、什么是细菌内毒素?其基本特性是什么?
内毒素特指革兰氏阴性菌外膜中的脂多糖(LPS)成分,细菌在死亡后破裂或人工裂解后释放。革兰氏阳性菌细胞壁中的脂磷酸(LTA)具LPS活性,不致热。
特性:内毒素耐热:100℃,1h不破坏;不能被甲醛脱毒成类毒素;抗原性弱,抗体无中和内毒素作用。
十四、什么细菌的遗传和变异?
答:所谓遗传,系指亲子代细菌与子代细菌的相似性,它使细菌的性状保持相对稳定,是细菌存在的根据。所谓变异,系指亲代与子代细菌之间的不相似性,它使细菌得以进化。 十五、叙述细菌的遗传与变异的实际应用意义。PP66-67
答:微生物学诊断;疾病治疗和预防
病毒总论
一、解释概念
病毒(粒)子:一个形态和结构上完整的病毒颗粒称为病毒(粒)子
核衣壳:由核酸组成的芯髓被衣壳包裹,衣壳与芯髓在一起组成核衣壳
原代细胞:动物组织经胰蛋白酶等消化、分散,获得单个细胞,再生长于培养皿中。
二倍体细胞株:将长成的原代细胞消化分散成单个细胞,继续培养传代,其细胞染色体数与原代细胞一样,仍为二倍体。
传代细胞系:与原代细胞与二倍体细胞株不同,这类细胞在体外可无限制分裂,亦可无限制传代。
细胞病变:细菌感染导致的 细胞损伤称之为细胞病变
空斑:病毒样本接种吸附于单层细胞,经一段时间培养,进行染色,原先感染病毒的细胞及病毒扩散的周围细胞会形成一个近似圆形的斑点,类似固体培养基上的菌落形态,称之为空斑。
包涵体:是某些病毒感染细胞产生的特征性的形态变化,可通过固定染色而后在光学显微镜下检测。
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隐蔽期:在病毒感染细胞之后的一个短时间内,病毒完全消失,甚至在细胞内也找不到传染性的病毒颗粒,直至感染数小时后子代病毒出现为止,这阶段称为隐蔽期。
血凝作用:某些病毒能凝集红细胞,称为病毒的血凝作用。
血凝抑制作用:病毒的特异抗体可抑制其血凝作用,称为血凝抑制作用。
二、绘制病毒颗粒结构模式图。
三、病毒的核衣壳对称型有那些?各自的特点是什么?
答:病毒的核衣壳主要有螺旋状对称和20面体对称两种对称类型,少数为复合对称。各自的特点为:
(一)螺旋状对称 病毒衣壳呈螺旋状的空心圆筒,衣壳单体直接与螺旋状的核酸相连接,并不聚集成壳粒。衣壳的直径因病毒的种类不同而差异。有的盘曲,有的不易弯曲。
(二)20面体对称 由20个等边三角形构成,有20个面、12个角、30条边。凡是20面体的衣壳必然是2:3:5对称。在衣壳上排列的圆形颗粒,称为壳粒子。它是衣壳的形态单位,每一壳粒基本上由5个或6个单体组成,前者称为五邻体,后者称为6邻体。
(三)复合对称 其壳粒排列既有螺旋对称又有立体对称的型式,如痘病毒、噬菌体。
四、病毒的基本特征是什么?
答:1、病毒只含有一种核酸,DNA或RNA,而其他微生物有两种核酸同时存在。
2、病毒是严格的胞内寄生微生物,它没有完整的代谢酶系统,也无进行独立生长、增殖的其他结构。
3、病毒没有核糖体和tRNA,也无合成蛋白质所必需的酶。在其mRNA进行转录时,完全利宿主细胞的物质。
4、病毒不经过繁殖,而是通过其核酸通过复杂的生物合成,获得大量不同组分,进行装配增殖。
5、病毒对抗生素和作用于微生物代谢途径的药物不敏感。绝大多数病毒对干扰素敏感。
6、有些病毒的核酸能整合到宿主细胞的DNA中去,从而诱发潜伏性感染。
五、简要叙述病毒的复制过程。
答:病毒的吸附
第一步是属于非特异的。
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第二步是与特异性受体结合:细胞上的受体数目:104-105。
纤突:HI和HA;微丛或多肽。
病毒的穿入和脱壳
病毒的穿入与吸附是一个连续过程,侵入(穿入)是一个依靠能量的过程。
病毒侵入细胞有3种方式:病毒直接转入胞浆;
细胞吞饮病毒;
病毒囊膜与细胞膜融合。
无囊膜病毒
1、吞饮作用:病毒首先被吞入,进入吞噬泡,再与溶酶体融合,脱衣壳(蛋白酶作用),暴露基因组。
2、结构改变:病毒吸附于细胞后,衣壳就开始解体,失去完整性。如小RNA病毒。主要是受体使壳粒重新安排。随后病毒被吞噬或直接进入细胞,将基因组释放到胞浆中。
3、直接侵入:病毒吸附于细胞受体后,直接穿过细胞膜,衣壳被细胞蛋白酶所消化,释放核酸,如腺病毒。
有囊膜病毒
有些有囊膜病毒在吸附后囊膜与细胞膜融合,核衣壳侵入细胞,完成脱壳程序,如副粘病毒和疱诊病毒。也可经过吞噬作用而侵入细胞,如弹状病毒和披膜病毒。
六、列举出动物病毒转录mRNA的基本模式。P304
七、有囊膜的病毒如何成熟与释放?
答:有囊膜的病毒以出芽的方式成熟,有细胞膜出芽及胞吐两种形式
八 、病毒病的微生物学检验程序。
答:(一)、样品采集和递送及处理
(二)、镜检
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