第三章 细胞生物学研究方法

第三章 细胞生物学研究方法

1. 何谓细胞工程？列举细胞工程在生物学研究中的应用。

细胞工程是指在细胞水平上，用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的理论与方法所进行的遗传操作，重组细胞的结构和内含物，以改变生物的结构和功能，通过细胞融合、核质移植、染色体或基因移植以及组织和细胞培养等方法，快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术。

当前细胞工程所涉及的主要技术领域有细胞培养、细胞融合、细胞拆合、染色体操作及基因转移等方面。

应用：单克隆抗体的制备，人工受精，胚胎移植

2.概念解释：细胞化学、异核体、传代培养、细胞系、单克隆抗体。列出本节所有概念。

细胞化学：是研究细胞的化学成分，在不破坏细胞形态结构的状况下，用生化的和物理的技术对各种组分做定量的分析，研究其动态变化，了解细胞代谢过程中各种细胞组分的作用，是在细胞活动中的变化和定位的技术。

异核体：体细胞融合，形成同时含有两个细胞核的细胞称异核体。当带有不同遗传性状的两个单倍体细胞或菌丝相互融合时，会导致在一个细胞或菌丝中并存有两种以上不同遗传型的核，这样的细胞或菌丝就叫异核体。

传代培养：当原代培养成功以后，随着培养时间的延长和细胞不断分裂，一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止；另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。此时就需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿内，再进行培养。这个过程就称为传代培养。

细胞系：原代培养的细胞一般传至10代左右就不易传下去，细胞生长出现停滞，大部分细胞衰老死亡，但有极少数的细胞可能度过危机而传下去，这些存活的细胞一般可以顺利地传40-50代次，并且保持原来的染色体的二倍体数量级接触抑制行为，这种传代细胞称为细胞系。

单克隆抗体：由单个细胞、经分裂增殖而形成的细胞群，即单克隆。由一个B细胞克隆而来的细胞所分泌的、具有专一特异性的抗体。该抗体识别单一抗原表面决定簇。

分子杂交技术：具有互补核苷酸序列的两条单链核苷酸分子片段，在适当条件下，通过氢键结合，形成DNA-DNA，DNARNA或RNA-RNA杂交的双链分子。这种技术可用来测定单链分子核苷酸序列间是否具有互补关系。原位杂交、southern杂交、northern杂交等。

PCR 技术：聚合酶链式反应，是体外利用人工合成的引物，加上DNA聚合酶和底物等，通过对温度的控制，使DNA不断处于变性、复性和合成的循环之中，达到扩增特定DNA片段的目的。