中国科学院2002年硕士学位研究生入学生物化学（A卷）

底物之一——分裂原活化蛋白激酶（MAPK）及其下一级的作为底物的激酶兼具有酪氨酸激酶和丝/苏氨酸蛋白激酶的活性；7、-；8、-；9、- 无论是质膜表面还是内膜系统糖脂和糖蛋白的寡糖，全部分布在非细胞质的一侧；10、-；11、-；12、+；13、+；14、-；15、-

二、选择题

1、A；2、C；3、C；4、A；5、D；6、C；7、C；8、B；9、D；10、A；11、C；12、B；13、C；14、C；15、A；16、C；17、C；18、B；19、D；20、B。

三、填空题

1、非氧化脱氨基作用，所有生物中，大多在微生物中。2、组氨酸的咪唑基。3、别构酶的协同作用。（见陈石根编《酶学》p345）4、抗体-抗原专一结合。5、丝氨酸、苏氨酸和羟赖氨酸（O-糖苷键），天冬酰胺的酰胺基、末端氨基酸的α氨基、赖氨酸、精氨酸的ω氨基（N-糖苷键）。6、红细胞膜带3蛋白是一种跨膜分布的内在性糖蛋白，执行O2—CO2交换功能。7、真核细胞中的小胞浆RNA（scRNA），处在内质网上，为信号识别体的组分。8、增色效应。9、平头末端。10、N蛋白（N基因是调控基因，表达产物为N蛋白，这种正调控蛋白具有抗寄主终止因子的功能，使得转录从早前期一直进行到后早期）。11、抑制rRNA的操纵子启动子的转录起始作用，增加RNA聚合酶在转录过程中的停止。

四、回答题

1、α螺旋、β片层和转角；αα、βββ、βαβ。

2、蛋白质生物合成的后加工过程就是多肽链离开核糖体以后的进一步修饰的过程，这一过程可以划分为：⑴末端修饰：细菌的多肽N末端都是甲酰甲硫氨酸，真核生物的多肽的N末端都是甲硫氨酸，统称Ｎ末端的第一个甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸以及更多的Ｎ末端氨基酸残基要被除去。真核生物多肽的Ｎ末端残基还要进一步乙酰化，羧基端的再修饰有时也有发生。⑵切除信号序列⑶非末端的氨基酸残基的修饰：丝氨酸、苏氨酸羟基的磷酸化；赖氨酸、谷氨酸等的甲基化；谷氨酸、天冬氨酸的羧基化⑷糖基化：糖蛋白的天冬酰胺、丝氨酸、苏氨酸和糖基结合⑸附加异戊二烯基团：许多真核生物蛋白质的半胱氨酸残基和异戊二烯基团以硫醚键结合⑹添加辅基：这些辅基和多肽链共价结合，如血红素、生物素、叶绿素等⑺前体修饰：有些蛋白质生物合成时是以前体蛋白或多蛋白形式出现的，如噬菌体、病毒蛋白、真核生物的酶原、激素原（胰岛素前体）等，通过蛋白酶的切割，成为较小的活性分子⑻形成二硫键。对于真核生物的蛋白质，经过合成后的加工，多肽链进一步折叠成为具有正确空间结构的蛋白质、定位和分泌到作用的部位。

3、同一种底物的同一种反应，有两种酶存在，但两种酶的活性调节能力不同：已糖激酶对６-碳糖不加选择，肌肉中的已糖激酶为别构酶，特别受其产物６-磷酸葡萄糖的强烈负反馈抑制；葡萄糖激酶则对Ｄ-葡萄糖有专一性，为诱导酶，活性不被６-磷酸葡萄糖抑制，在进食后血糖升高时，可以促使葡萄糖转变为糖原储存起来。

4、ｖ－［Ｓ］作图法，双倒数作图法。

5、胆固醇的作用有：维生素Ｄ３的前体；固醇类激素（肾上腺糖皮质激素、肾上腺盐皮质激素、性激素）的前体；胆酸的前体、过量时增加动脉粥样硬化几率。 6、虽然CoQ既是NADH-CoQ还原酶的辅酶，也是琥珀酸－CoQ还原酶的辅酶，但当NADH经NADH-CoQ还原酶氧化时有ATP合成，而琥珀酸经琥珀酸-CoQ还原酶氧化时却不会有ATP合成。从表面看来，这是因为CoQ接受的氢的来源不同前者来自NADH，后者来自FADH2。从氧化磷酸化机理分析，在对这两种酶的P/O比和ATP生成部位的研究中发现，前者的P/O等于3，后者的P/O等于2，初步说明前者是ATP形成的部位（偶联位），后者则不是ATP形成的部位，进一步分析，这时可能是由于NADH-CoQ之间的氧化电势差和FADH2-CoQ不同所致，前者足以推动ATP的合成，后则不足以推动ATP的合成。氧化磷酸化的机理是一个仍在研究中的重大问题。

7、竞争性抑制，5-氟尿嘧啶是尿嘧啶的类似物，进入体内后先转变成为它的核糖核苷酸（F-UMP），在转变成为脱氧核糖核苷酸（F-dUMP）后者抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶，使细胞缺少DNA合成必须的胸腺嘧啶核苷酸，从而显示出抗癌效力。在正常细胞中，5-氟尿嘧啶能被分解为α-氟-β-氨基丙酸，但在癌细胞中则否。但是已经发现，这一药物的副作用很大，有可能也掺入到正常细胞的DNA分子中，或者抑制正常细胞DNA的合成。

8、在一个基因中，最后成为编码蛋白质的碱基序列叫做外显子，再转录之后被切除掉的碱基序列叫做内含子。内含子将外显子分割开来。在一个多肽链中，经过加工最终成为承担生物活性的多肽链部分叫做蛋白外显肽。经过加工最终除去的多肽链部分叫做蛋白内含肽。胰岛素前体中的连接肽就是一个蛋白内含肽。9、PCR原理：DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成相同的两分子挎贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。但是，DNA聚合酶在高温时会失活。因此，每次循环都得加入新的DNA聚合酶，不仅操作繁琐，而且价格昂贵，制约了PCR技术的应用和发展。1988年Erlich 发现耐热DNA聚合酶同酶——Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义。该酶可以耐受90摄氏度以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量适应，并逐步用于临床。

PCR意义：PCR本身可直接用来鉴定特定基因的存在与否，也可以用来侦测基因是否有异常。例如，在医学上对遗传疾病或肿瘤癌症的诊断及预后的评估；对细菌、病毒及霉菌感染的诊断。它也可成为一个生产线进而大量复制特定的基因进行基因密码的读取及其它的运用。PCR更可以用于器官移植组织兼容性HLA的分析。另外在演化上的分析，经由PCR的运用也产生重大的进展。进来，在生物医学的研究上，特别是细胞进讯息的传递分子的表现都可用PCR来进行质与量的分析。

10、核小体的结构：核小体由核心颗粒（coreparticie）和连接区DNA（linker DNA）二部分组成。这二部分结构也是通过核酸酶解实验而确定的，核小体单体被小球菌核酸酶处理后，随着时间延长其降解产物（DNA片段）会逐渐缩短，从200bp降至146bp至此变为很难进一步降解的稳定状态。对此稳定降解产生进行分析，证明它是由146bp的DNA片段和H2A、H2B、H3和H4各两个分子组成，这种结构称为核心颗粒。而H1总是随着核心颗粒的形成

而消失，通常是在DNA被降解至160bp以后，提取物中H1丢失，提示H1位于―裸露‖DNA与核心颗粒的毗邻区。核心颗粒外，―裸露‖的DNA长度为60bp左右，成为连接区DNA。连接区DNA的长度在不同物种差异较大，其范围在10——140bp。

生物物理的有关研究说明，DNA盘绕在组蛋白八聚体的周围，呈很有规律的螺旋状虽然DNA双链分子位于核心颗粒的外围，但DNA与组蛋白八聚体的这种相互作用对保护DNA链免受细胞核中核酸酶的消化十分重要。根据上述结构，我们对核小体的结构可做这样的描述：染色质中的DNA双螺旋链等距离缠绕组蛋白八聚体形成众多核心颗粒，各颗粒之间为带有H1组蛋白的连接区DNA。这种组成染色质的重复结构单位就是核小体。