脓汁和粪便标本中病原菌的检测 - 图文

④脓汁标本分离菌血浆凝固酶实验中，黄色菌种菌液出现明显凝块，实验结果为阳性；白色菌种未出现明显凝块实验结果为阴性。

⑤玻片凝集试验中，粉

红

色菌落菌种出现片状凝集现象，实验结果为阳性；紫黑色菌落菌种实验结果为阴性。

⑥半固体培养基中，紫黑色菌落菌种扩散生长，培养基呈扩散云雾混沌状态；粉红色菌落菌种沿穿刺线生长，穿刺线边缘整齐，周围培养基清澈透明。

脓汁和粪便标本细菌检测结果

标本 菌落 形态 血浆凝固酶试验 葡萄糖发酵试验 乳糖发酵试验 半固体培养基动力学试验 血清学实验 黄色 脓汁标本 白色 G+球 + — G+球

紫黑色 粪便标本 粉红色

G－杆 ⊕ + ⊕ — + — + G－杆 ⑦黄色菌落菌种的抑菌圈直径大小分别为：青霉素40mm,庆大霉素20mm，链霉素20mm。白色菌落菌种的抑菌圈直径大小分别为：青霉素40mm,庆大霉素22mm，链霉素24mm。粉红色菌落菌种的抑菌圈直径大小分别为：青霉素无作用,庆大霉素20mm，链霉素12mm。紫黑色菌落菌种的抑菌圈直径大小分别为：青霉素无作用,庆大霉素30mm，链霉素24mm。

各种菌落抑菌圈直径一览表

黄色菌种 白色菌种 紫黑色菌种 粉红色菌种 青霉素 40mm 40mm 无作用 无作用 庆大霉素 20mm 22mm 20mm 30mm 链霉素 20mm 24mm 12mm 24mm 3讨论

3.1实验结果分析

①用普通平板，从脓汁标本中分离得到黄色、白色两种菌落，这两株细菌，显微镜油镜下均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌。结合菌落色素，这两株葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌。致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶，可使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,附着于菌体表面,形成凝块。通过血浆凝固酶实验，金黄色葡萄球菌实验结果阳性，为致病菌。

②用伊红美蓝平板，从粪便标本中分离出紫黑色具有金属光泽和粉红色半透明菌落。紫黑色金属光泽的产生是因为乳糖被分解产酸，酸使伊红美和蓝紫结合，产生紫黑金属光泽菌落。黑色菌落是能分解乳糖的大肠埃希菌。致病菌不能分解乳糖，菌落呈现伊红的颜色。粉红色菌落是不能分解乳糖的致病菌。显微镜下，它们都是G-杆菌，散在排列，从形态上不能鉴别是什么细菌。经糖发酵试验（紫黑色菌落菌种分解葡萄糖和乳糖，产酸产气；粉红色菌落菌种只能分解葡萄糖，产酸不产气）半固体动力试验（紫黑色菌落菌种半固体动力试验结果阳性，有鞭毛；粉红色菌落菌种半固体动力试验结果阴性，无鞭毛）。对照常见肠道感染细菌主要生化反应特征，判定它们分别是大肠埃希菌和福氏志贺菌。通过血清学实验，粉

红色菌落菌种与福氏志贺菌诊断血清发生凝集反应，进一步确定其为福氏志贺菌。

肠道杆菌科各菌属生化反应鉴别表

葡萄糖 乳糖 麦芽糖 甘露醇 蔗糖 半固体 埃希菌属 ⊕ + ⊕/+ + ⊕ ⊕ √ - - - ⊕ √ ⊕ + √ ⊕ +/- ⊕ + - √ -/+ - + √ + - + + + 志贺菌属 沙门菌属 霍乱弧菌 变形杆菌属 注： + 产酸或阳性， ⊕ 产酸产气，- 阴性，+/- 多数阳性， -/+ 多数阴性 √ 不确定。

常见肠道感染细菌主要生化反应特征

大肠埃希菌 福氏志贺菌 伤寒沙门菌 霍乱弧菌 幽门螺杆菌 变形杆菌 葡萄糖 乳糖 半固体 ⊕ + + + 不分解糖类 ⊕ — — — + — + + + ⊕ — + ③对照常用药敏试验纸片判断标准，金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌对青霉素、庆大霉素、链霉素均敏感。大肠埃希菌对青霉素耐药，庆大霉素、链霉素敏感，福氏志贺菌对青霉素耐药，对庆大霉素、链霉素敏感。可得结论G+球菌对青霉素和链霉素敏感。 G-杆菌对青霉素耐药，对链霉素敏感。G+球菌和G-杆菌对广谱抗菌素庆大霉素都敏感。

常用药敏试验纸片判断标准

抑菌圈直径(mm) 抗菌药物 纸片含药量 耐药 青霉素G(葡萄球菌) 链霉素 庆大霉素 四环素 氯霉素 磺胺

综上所述，脓汁标本中分离得金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌，致病菌为金黄色葡萄球菌；粪便标本中分离得大肠埃希菌和福氏志贺菌，致病菌为福氏志贺菌。

10单位 10微克 10微克 30微克 30微克 300微克 ≤28 ≤11 ≤12 ≤14 ≤12 ≤12 中度敏感 — 12～14 13～14 15～18 13～17 13～16 敏感 ≥29 ≥15 ≥15 ≥19 ≥18 ≥17 3.2人为操作失误与结果分析

①实验的各个环节都要严格进行无菌操作。如果无菌操作不严格，会产生杂菌影响实验结果。

②在进行细菌分离培养时，如果培养基放置时间过长或者平板上某个部位细菌比较多、菌落比较密集，大肠杆菌菌落颜色可能会发生改变。因为大肠杆菌利用完乳糖以后，就要利用蛋白质，蛋白质分解大多产生碱性物质，中和了乳糖分解时产生的酸。大肠杆菌菌落可能会由原来的紫黑色变成粉红色，或者菌落中心黑色，边缘粉红色。可能由此挑选错误的菌落。此外密集或半密集区域的菌落，不一定是单菌落，有可能是菌落形成单位（CFU）。以上都会对实验结果产生影响。

③接种时要协调好，若未协调好，易发生接种错误。