J-06,07 实训一 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备

江苏农林职业技术学院讲稿 第 1 页 共 2 页 第七、八讲

授课内容 教学目标 教学重点 教学难点 教材教具 实训一 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备 授课时数 4 掌握盐析沉淀法制备酪氨酸的原理和操作；掌握等电点沉淀法制备乳蛋白素的原理和基本操作。 盐析和等电点沉淀法的原理和操作 盐析和等电点沉淀法的原理 教学内容（含教学步骤、时间分配、教法学法、作业布置等） 实训一 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备（4学时） 一、目的和要求 1、掌握盐析法的原理和操作； 2、掌握等电点沉淀法的原理和基本操作。 二、实验原理 牛奶中主要的蛋白质是酪蛋白，乳蛋白素是一种广泛存在于乳品中，合成乳糖所需要的重要蛋白质。酪蛋白在pH4.8左右会沉淀析出，但乳蛋白素在pH3左右才会沉淀。利用此一性质，可先将pH降至4.8，或是在加热至40℃的牛奶中加硫酸钠，将酪蛋白沉淀出来。酪蛋白不溶于乙醇，这个性质被利用来从酪蛋白粗制剂中除去脂类杂质。将去除掉酪蛋白的滤液的pH调至3左右，能使乳蛋白素沉淀析出，部分杂质即可随澄清液除去。再经过一次pH沉淀后，即可得粗乳蛋白素。 三、实验材料 1、材料 脱脂牛乳或低脂牛乳（50ml）、蒸馏水 2、器材 100ml量筒、100ml烧杯（2个）、250ml烧杯、水浴锅、玻璃棒、滤布、布氏漏斗、滤纸、抽滤瓶、真空泵、pH计、pH试纸、离心机、离心管、磁力搅拌器、干燥箱（器）。 3、试剂 无水硫酸钠、无水乙醇、浓HCl、NaOH、五氧化二磷。 0.1mol/L HCl溶液配制：用洁净的量杯（或量筒）量取9mL浓盐酸，注入盛有1000mL水的试剂瓶中，盖上玻璃塞，摇匀。 0.1mol/L NaOH溶液配制：称取4克氢氧化钠固体，用少量蒸馏水溶解，将溶液转移到1L的容量瓶中，定容，摇匀。 四、实验步骤 1、盐析沉淀法制备酪氨酸 （1）将50ml牛乳倒入250ml烧杯中，于40℃水浴中加热并搅拌。 （2）向上述烧杯中缓缓加入（约10min内分次加入）10g无水硫酸钠，再继续搅拌10min。 （3）将溶液用细布过滤，分别收集沉淀和滤液。沉淀悬浮于30ml乙醇中，倾于布氏漏斗中过滤除去乙醇溶液，抽干。将沉淀从布氏漏斗中移出，在表面皿上摊开以除去乙醇，干燥后得到的是酪蛋白。准确称重。 江苏农林职业技术学院讲稿 第 2 页 共 2 页 2、等电点沉淀法制备乳蛋白素 （1）将制备酪蛋白操作步骤（3）所得滤液置于100ml烧杯中，一边搅拌，一边利用pH试纸以浓盐酸调整pH至3±0.1。 （2）将溶液倒入离心管中，6000r/min离心15min，倒掉上层液。 （3）取出沉淀干燥，并称重。 五、注意事项 离心机的使用安全： 1、使用前，离心管和离心物一定要对称平衡； 2、离心开始时，设置好了转速和时间，一定要等到转速稳定了后，人才能离开； 3、离心结束，只有仪器报警了，且转速完全为零后，才能打开离心机盖。 六、结果与讨论 1、计算出每100ml牛乳所制备出的酪蛋白数量，并与理论产量（3.5g）相比较。求出实际获得率（%）。 2、计算出100ml牛乳所制备出的乳蛋白素数量。 课后体会：