生物质谱在蛋白质组学研究中应用 - 图文

通过整体蛋白质混合物的两维分离、胶上酶切和提取，得到474个多肽混合物。按上述

方法分析，共鉴定出9696条肽段，去冗余后得到2552条肽段，归结于402种蛋白质和240个蛋白质簇。

不同蛋白质随pI的分布

不同蛋白质随分子量的分布

不同蛋白质随疏水性参数的分布 结论

通过RPLC-SDS-PAGE与纳升毛细管液相色谱－串联质谱联用技术对人肝脏蛋白质组表达谱的构建及其理化性质的统计分析，表明该技术路线兼顾了反相色谱分离度高和SDS-PAGE兼容性号的优点，可用于复杂组织或细胞中蛋白质组表达谱的构建或比较蛋白质组的研究。

全程自动化的固相金属亲和色谱－反相液相色谱－串联质谱 磷酸化蛋白质分析技术

IMAC毛细管亲和色谱柱的制备— 两通固定滤膜筛板制作法及柱装填技术

1，两通阀 2，毛细管色谱柱 3，过滤膜 4，连接毛细管 5，加样枪 6，刃环和空心螺母 7，匀浆管 8，高压恒流泵

9，旋涡混合器

在100μm内径的石英毛细管中成功装填进了20μm粒径的亲和色谱填料 自动化IMAC-RP HPLC-MSMS分析平台

IMAC-RPHPLC

-MSMS分析平台的测试和优化

IMAC柱对磷酸肽吸附的选择性

洗脱液类型对质谱结果的影响 Wash buffer对亲和选择性的影响 甲酯化修饰对亲和选择性的影响

IMAC柱对磷酸肽吸附的选择性

样品：磷酸肽+磷酸酶水解去磷酸化肽段混合物

?

离子信号强度减弱

? 用磷酸氨盐溶液洗脱没有发现碱金属加和峰 洗脱液类型对质谱结果的影响

Wash buffer对亲和选择性的影响

使用磷酸钠

(钾)溶液洗脱容易生成碱金属加和峰，使质谱图变得更复杂而且使肽段的信号分散，