有机室作业指导书（旧）

86.5.2 水样采集

样品必须采集在棕色玻璃瓶中，若水中有残余氯，需在每升水中加入25 mg的硫代硫酸钠除氯；若不能立即进行样品处理，在采样时每升水样加入200mL的异丙醇作为样品稳定剂(同时也作为基体改性剂)。 ， 86.5.3 水样保存

水样在24h内尽快进行样品预处理。将吸附后的固相萃取柱直接贮存在冰箱中，在20天内将PAHs从固相萃取柱上洗脱下来，进行样品分析。 86.5.4 样品预处理步骤

86.5.4.1 水样准备：量取2000mL水样(根据配备的液相色谱仪灵敏度和水源污染状况，可选择合适的水样体积)。每lL水样，加入200mL的异丙醇(也可在采样时加入)，混合均匀。

86.5.4.2 SPE柱活化及条件化：先用2mL二氯甲烷注入柱子，让其缓缓流过，并抽空气5min，以去除填料中可能存在的干扰物，再加入2mL的甲醇活化柱子，最后用去离子水(加入和水样相同含量的改性剂)移去活化溶剂(条件化)，但注意在对SPE柱进行活化和条件化时，不可将柱床抽干，以防止填料层产生裂隙，使回收率降低。

86.5.4.3 水样富集：以4～5mL／min左右的流速，使水样全部通过SPE柱后，加5mL纯水，让其缓缓通过，以去除水溶性干扰物质，通入净化空气30min，使已吸附的SPE柱彻底干燥。

86.5.4.4 洗脱与浓缩：将2mL二氯甲烷;甲醇或四氢呋喃分两次加入柱管，分别洗下被测组分，合并后的洗脱液用氮气浓缩至0.1mL以下，再定容至0.1—0.5mL分析。 86.6 测定步骤

86.6.1 色谱条件的选择

86.6.1.1 流动相：甲醇和水。根据色谱柱的柱效和分离度，选择合适的流动相配比。如果用甲醇／水体系能满足样品的分离要求，就不必用其他流动相体系，如果用纯甲醇即可达到分离效果，就不要用水作为流动相成分。

86.6.1.2 洗脱模式及洗脱流速：采用等度洗脱，流动相为甲醇∶水：90∶10，洗脱速率为1.0ml/min。

86.6.1.3 柱箱温度控制：使用色谱柱温箱，柱箱温度为20℃。

25

86.6.1.4 检测器波长设置

86.6.1.4.1 荧光检测器：本方法首先进行激发和发射光谱的扫描，根据所获光谱图，找出各化合物的特征。

多环芳烃最佳的荧光激发和发射波长

PAHs FLU BbF BkF BaP BPer IP 激发波长λ226 302 302 297 302 305 exmm 发射波长λ449 452 431 405 420 500 emmm 为获得较高方法的灵敏度，根据最优化柱系统条件下获得的各PAHs的保留时间，进行波长程序设置，以便使其能在最优化的激发和发射波长下进行检测。

86.6.1.4.2 紫外检测器：检测波长为254nm(如果当地水源中背景干扰严重，影响了检测，可选用其他紫外波长)。

86.6.1.5 数据记录和处理系统：HP色谱工作站。 86.6.2 标准曲线的绘制

本方法使用外标法定量。 86.6.2.1 标准样品的制备

根据液相色谱仪的线性工作范围，选择不同浓度的标准工作溶液，所用标准工作液由混合的PAHs标准溶液用甲醇稀释制得。 86.6.2.2 标准溶液的使用

定期必须测定—种或几种浓度的标准溶液以检验标准曲线。若某一化合物的测定值与期望值的相对标准偏差大于10％，则必须重新绘制标准曲线。 86.6.2.3 标准曲线的表示

以响应值对浓度作标准曲线，由回归方程计算测定结果。采用工作站，只需按已设定的样品序列依次进样，计算机自动存储标准曲线，自动计算每一次进样的测定结果。

26

86.6.3 样品测定 86.6.3.1 进样

86.6.3.1.1 进样方式：以自动进样器进样。 86.6.3.1.2 进样量：5—25μL。 86.6.3.2 记录

由色谱工作站完成。 86.6.4 定性与定量 86.6.4.1 定性分析

86.6.4.1.1 保留值定性法：以试样的保留时间和标样的保留时间(tR)、相对保留时间(tR’)或K值来定性。用作定性的保留时间窗口宽度以测定标准的实际保留时间变化为基准。色谱工作站一般以保留时间的土5％作为窗口宽度。

86.6.4.1.2 鉴定的辅助方法：主要采用增加标样使峰值增高的方法，或用停泵扫描测定各组分荧光激发和发射光谱与对应标准的荧光谱对比的方法来协助定性 86.6.4.2 定量分析

用外标法计算。 86.7 计算

采用色谱工作站，计算机自动计算出各组分的含量，单位μg／L 根据式(1)计算样品浓度：

ρi=ρ0Vt/Vs ????????????(1)

式中：ρi—试样中组分的质量浓度，μg／L； ρ0—固相萃取洗脱液质量浓度，μg/L Vt—固相萃取洗脱液浓缩定容体积，mL

Vs—水样体积，mL。

86.8 结果的表述 86.8.1 定性结果

根据标准色谱图各组分的保留时间，确定出被测试样中存在的组分数目和组分名称。

86.8.2 定量结果

27

86.8.2.1 含量的表示方法：式(1)计算出水样中PAHs含量，以μg／L表示。 86.9. 安全

86.9.1 使用的溶剂和流动相甲醇有毒，正己烷、四氢呋喃易燃，且均为挥发性试剂，溶剂蒸馏必须遵照有关规定，工作场所要有良好通风条件，严禁明火。 86.9.2 分析的PAHs为致癌物，因此要有保护措施。 87 挥发性酚类化合物

87.1 4-氨基安替比林氯仿萃取分光度法 87.1.1 范围

本法规定了用4-氨基安替比林氯仿萃取分光光度法测定生活饮用水及其水源水中的挥发性酚类化合物。

本法适用于生活饮用水及其水源水中挥发酚类化合物的测定。

本法最低检测质量为0.5μg酚（以苯酚计）。若取250ml水样，则其最低检测质量浓度为0.002mg/l酚（以苯酚计）。

水中还原性硫化物﹑氧化剂﹑苯胺类化合物及石油等干扰酚的测定。硫化物经酸化及加入硫酸铜在蒸馏时与挥发性酚分离；余氯等氧化剂可在采样时加入硫酸亚铁或亚砷酸钠还原。在酸性条件下蒸馏苯胺类形成盐类不被蒸出。石油可在碱性条件下用有机溶剂萃取后除去。 87.1.2 原理

在p H=10.0±0.2和有氧化剂铁氰化钾存在的溶液中，酚与4-氨基安替比林形成红色的安替比林染料，用氯仿萃取后比色定量。

酚的对位取代基可阻止酚与安替比林的反应，但羟基（-OH）﹑卤素﹑磺酰基（-SO2H）﹑羧基（-COOH）﹑甲氧基（-OCH3）除外。此外，邻位硝基也阻止反应，间位硝基部分地阻止反应。 87.1.3 仪器

87.1.3.1 全玻璃蒸馏器，500ml。 87.1.3.2 分液漏斗，500ml。 87.1.3.3 具塞比色管，10ml。

28