动物肝脏中DNA的提取及检测实验报告

么作用？

答：①柠檬酸的钠盐在实验中既充当DNA酶的抑制剂，也是pH缓冲溶液；

②SDS是表面活性剂，可以让蛋白质与DNA分开； ③氯仿是有机溶剂，可以使蛋白质聚集沉淀，便于分离出去； ④异戊醇是消泡剂，可以减少泡沫的发生； ⑤氯仿-异戊醇的作用是使蛋白质变性、膜溶解； ⑥NaCl固体溶解使得试液成为高浓度的盐溶液，在这样的

环境中DNA核蛋白能溶解，RNA核蛋白则溶解度很低，可以利用这一性质分离两种核酸。

八、实验注意事项

1.DNA主要集中在细胞核中，因此，通常选用细胞核含量比例大的生活组织作为提取制备DNA的材料，小牛胸腺组织中细胞核比例较大，因而DNA含量丰富，同时其脱氧核苷酸酶活性较低，制备过程中DNA被降解的可能性相对较低，所以是制备DNA的良好材料，但其来源较困难，脾脏或肝脏易获得，也是实验室制备DNA常用的材料，本实验用新鲜肝脏作为实验材料。

2.为了防止大分子核酸在提取过程中被降解，须采取以下措施：整个过程必须在低温下进行，可加入某些物质抑制核酸酶的活性，如柠檬酸钠、EDTA、SDS等，EDTA是抑制核酸酶的活性最好的抑制剂。

3.从核蛋白中脱去蛋白质的方法很多，经常采用的有：氯仿-异

丙醇法、苯酚法、去垢剂法等，他们均能使蛋白质变性和核蛋白解聚，并释放出核酸。

4.使用离心机时，对称放置的离心管必须用天平调平衡。 5.避免剧烈振荡，如研磨过程、搅拌过程等。

九、实验结果误差分析及讨论

经过对本次实验结果进行分析，得出100g猪肝中DNA含量大约为0.1053g的结论，在上网查阅相关资料后发现：猪肝中DNA含量与本次试验实际操作测量得出的结果大致相互吻合。由此可知，本次试验结果是相对比较成功的，较为粗略地测量出猪肝中DNA的含量，并且较为熟练地掌握了浓盐法从动物组织中提取DNA的原理与技术，基本达到了本次实验的目的。

但是本次实验结果只是粗略测量，并未达到精确测量猪肝中DNA的含量，且实验数据较理论值偏低，这是由于某些误差导致，在实验过程中些许因素可能会导致实验结果数据有偏差，经分析得出以下几点：

①在称取猪肝后加入柠檬酸钠缓冲液进行研磨的过程中，由于猪肝组织表面较滑不易磨碎，且研磨至最后依旧有小部分猪肝组织块残留，因此可能导致猪肝中DNA提取不充分，致使实验数据较理论值偏低；

②研磨过程中，可能由于操作不当，导致部分液体溅出，因此可能使得提取液中部分DNA损失，导致实验数据偏低；

③在粗提取DNA操作中，频繁地将DNA提取液转移至各个仪器内，可能有极小部分DNA提取液未倒净，残留在仪器壁上损耗掉，导致实验误差；

④在使用移液枪的过程中，可能因为操作不当或移液枪经常错误使用，出现仪器误差，导致吸取的DNA样液不精确，出现实验误差；

⑤在水相中加入乙醇析出DNA时，不是所有DNA均析出，有小部分依旧融在溶液，导致提取出的DNA含量偏低；

⑥标准曲线制作过程中出现些许误差；

总的来讲，本次试验结果是相对比较成功的，较为粗略地测量出猪肝中DNA的含量，并且较为熟练地掌握了浓盐法从动物组织中提取DNA的原理与技术，基本达到了本次实验的目的。在今后的实验中会着重注意实验操作的严谨性，严格按照实验前拟定完全的实验步骤进行，保证将实验操作过程中可能出现的误差概率降到最低，尽可能达到预期的实验效果，完成自我的学习及锻炼过程。