造血系统疾病动物模型

即为豚鼠抗免血小板抗血清，分装后储存于-70℃冰箱待用、按ELISA法和放射免疫沉淀法检测抗血清效价。

(2)兔ITP模型的建立：

1）急性短期兔ITP模型：苯巴比妥钠麻醉兔，插入颈动脉套管后。耳缘静脉注射豚鼠抗兔血小板血清(根据抗血清效价与降血小板之间的量效关系，确定抗血清的注射量)。间隔15min，从颈动脉套管取全血注入装有EDTA的管内做血小板计数，在注射后的90 min，再从颈动脉套管取血，置于装有ACD的试管内，测定血小板结合的免疫球蛋白(platelet associated IgG，PA IgG)。

2）慢性持续性兔ITP模型：方法同上，于0、1、2、4、6、8 d分别从耳缘静脉注射脉鼠抗兔血小板血清(GP-APS)。在末次注射后分别在15 min和 90 min取血做血小板汁数及检测PAIgG，GP-APS的注射量和次数可根据血小板计数的结果进行调整。

ITP小鼠模型：采用BALB/c小鼠，8周龄，体重18~22g，雌雄均可；豚鼠大干3月龄，雄雌不拘。

(1) 豚鼠抗小鼠血小板抗血清的制备：① BALB/c小鼠乙醚麻醉后，从心脏取全血置于EDTA-Na2抗凝管内，分离血小板并洗涤，用生理盐水稀释成混悬液；② 取上述血小板混悬液，分别与等量完全福氏佐剂和不完全福氏佐剂混合成油包水状。制备抗原，取含福氏佐剂抗原于0周注射豚鼠足掌、背及腹部皮下至少4点；取含不完全福氏佐剂抗原，分别于1、2、4周注射于豚鼠足掌、背及腹部皮下，每次至少4点，第5周从豚鼠心脏取不抗凝全血，离心后取上层血清，即为豚鼠抗小鼠血小饭抗血清(GP-APS)。随后用BALB/c小鼠红细胞吸附至少两次，用生理盐水稀释成不同浓度的GP- APS。储存于-20℃冰箱待用。

参照ELISA法，可用国产冻干酶联A蛋白纯品代替碱性磷酸酶蛋白A酶标抗体，检测抗血清效价。

(2) ITP小鼠模型的建立

1）急性短期ITP模型：于BALB/c小鼠腹腔内注射抗血清(100μL)，造成小鼠一过性血小板减少。

2) 慢性持续性ITP模型：于0、l、2、4、6、7 d分别于小鼠腹腔注射APS，每次100μL，造成小鼠慢性持续性血小板减少。

兔和小鼠免疫性血小板减少性紫癫的共同特征是：（1）抗血小板血清注入动物后，可引起血小板计数显著减少和PAIgG水平升高，二者呈负相关；（2）PAIgG升高水平与注入抗血小板血清的量以及血小板减少的严重性在一定范围内呈正相关，即注入的抗血清越多，PAIgG升高越多，血小板减少程度越严重；（3）血小板的寿命缩短；（4）伴有发热、紫癫及止血障碍等。这些特征与人类ITP的病人是相似的。其他方法如用ADP、马利兰、环磷酰胺、γ射线照射等均能引起血小板减少，PAIgG水平正常。因此采用免疫法建立的兔或小鼠的血小板减少模型优于其他方法，这对于人类ITP的发病机制的研究、抗血小板减少新药物的筛选更有意义。

2. 获得性血友病A动物模型： 【造模机理】 【造模方法】

获得性血友病A兔模型：Turecek等于90年末建立了该方法。输注获得性血友病A患者血浆入健康新西兰兔体内，测定注射血浆前30 min及注射血浆后30 min、60 min、90 min、120 min时间点兔血浆活化部分凝血活酶时间（aPTT），观察获得性血友病A患者体内FⅧ抑制物对兔血浆aPTT值的影响，以等量正常人血浆注入新西兰兔作为对照。

获得性血友病A小鼠模型： 【模型特点】 【模型应用】