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(1)亲和层析:利用抗原/抗体专一性结合原理,从各种杂蛋白中分离目的蛋白。少量目的蛋白制备抗体使抗体结合在凝胶珠上目的蛋白结合在柱上,杂蛋白流出洗脱,获得目的蛋白。 (2)酶联免疫吸附法(ELISA):专一性检测微量的蛋白质(10-9克)1、把抗体固定在固相支持物上(96孔板);2、加入蛋白质样品保温,再洗去未结合的杂蛋白;3、加入第二抗体,第二抗体结合一个供检测用的酶(辣根过氧化物酶)4、洗去未结合第二抗原,酶活测定。
第九讲 朊病毒(普列昂)
76.简述确定病源物的柯赫法则。 (1)从发病动物分离出病原物。
(2)再接种到健康动物,引起同样疾病。
(3)再分离出病原物,应和接种的病原物具相同特性。 77.病毒有哪些主要的特征。 (1)没有细胞结构。
(2)最简单的病毒只由蛋白质分子和核酸分子组成,称为核衣壳。
(3)有些结构复杂的病毒,还有包膜包在核衣壳外面,或者带有一些特殊的酶。 78.简述噬菌体侵染细菌的过程。 附着——识别过程。
侵染——病毒核酸进入寄主细胞。
复制——复制病毒核酸,合成病毒外壳蛋白质。 组装——形成一批子代病毒粒子。
裂解——寄主细胞破裂,释出病毒粒子。 79.什么叫“朊病毒”?
可以引起同种或异种蛋白质构象改变而致病或功能改变的蛋白质。 80.“朊病毒”的发现有何理论意义和实践意义?
(1)理论意义:“中心法则”认为DNA复制是“自我复制”,即DNA~DNA,而朊病毒蛋白是PrP→PrP,是为“自他复制”。这对遗传学理论有一定的补充作用。但也有矛盾,即“DNA→蛋白质”与“蛋白质→蛋白质”之间的矛盾。对这一问题的研究会丰富生物学有关领域的内容;对病理学、分子生物学、分子病毒学、分子遗传学等学科的发展至关重要,对探索生命起源与生命现象的本质有重要意义。
(2)实践意义:其对人畜健康,为揭示与痴呆有关的疾病(如老年性痴呆症、帕金森病)的生物学机制、诊断与防治提供了信息,并为今后的药物开发和新的治疗方法的研究奠定了基础。
81.朊病毒是如何使人或动物致病的(致病机理)?
搔痒病的发生是因为PrPsc的入侵,把脑细胞中原来就有的PrPc“带坏”,使PrPc重新折叠,形成新的高级结构,变成了PrPsc。增多的PrPsc形成淀粉样斑,造成脑细胞破坏,出现空斑。什么叫PrPsc 把PrPc “带坏”?实际上是:蛋白质大分子与蛋白质大分子之间的相互作用。 第十讲 克隆羊
82.什么是细胞分化,细胞的发育潜能有哪几种情况?
在个体发育中,细胞后代在形态结构和功能上发生差异的过程,称为细胞分化。 83.什么是分化决定子?它的化学本质是什么?
细胞质中有着决定细胞分化全能性的物质,称为分化决定子。细胞质中的分化决定子,是RNA。它们对紫外线敏感,对RNase敏感。 84.什么是卵子中的信息体?
在卵子中,母体信息以核糖核酸蛋白(RNP)颗粒形式存在,其沉降系数比核糖体还大,称
为信息体。
85.简述克隆“多莉”羊的实验过程。
细胞核受体:注射促性腺激素释放激素经28-33 h 排卵——34~36 h取出核 细胞核供体:
9天胚 26天胎羊 6岁母羊孕期最后三个月 胚细胞 胎羊细胞 乳腺细胞
——培养于0.5%胎牛血清培养基中,使从生长周期中出来停顿于G。 ——细胞融合
——培养在羊输卵管上6 天,分裂成长至桑椹期或囊胚期 ——移入假母(苏格兰黑脸母羊)子宫, 1 ̄3 胚/头假母
——50-60天,超声检查,21头胎羊,以后每14天查一次。
——最后产出八头小羊分属三个核供体来源。产出小羊均显示供体羊特征。 86.克隆羊成功有何理论意义?有何应用前景? (1)理论意义
证实分化成熟的动物细胞的细胞核仍保持完整基因组,具有潜在的全能性。 证实细胞质对胚胎发育分化有决定性作用。 (2)实践意义
蛋白质-多肽类药物(胰岛素、凝血因子、干扰素、生长因子等);乳腺生物反应器;器官移植;人类疾病的动物模型;珍稀濒危动物繁殖;动物育种 第十一讲 生态、环境与生物的多样性
87.种群、群落、生态系统和生物圈的含义。
种群:居住在一定地区的同一种类的相互作用的个体组成一个种群。 群落:群落是指生活于某一特定地区的相互作用着的各种生物的总和。 生态系统:一定地区内的所有生物和环境物理因素的总和称生态系统。
生物圈:地球上存在生物有机体的圈层。包括大气圈的下层、岩石圈的上层、整个水圈和土壤圈全部。
88.什么叫生态位?
描述各种生物种群在空间和时间上的特定地位,包含生活方式:食物、气候、需求等等。 89.在一个群落中,生物与生物之间的关系主要有哪些?
竞争,捕食/被捕食,寄生,互利共生,偏利共生,合作,植化相克 90.能量金字塔告诉我们什么?
能量在一条食物链内逐级流动时的传递效率大约只有10%~20%。 91.用于种群描述的特征有哪些?其关键特征是什么?
数量;年龄比;密度;性别比;分布状况。关键特征是数量。 92.用于群落描述的特征有哪些?
(1)群落的组成:有哪些种群?各个种群中的个体数量如何? (2)群落中的优势种群:往往是群落特征最显而易见的部分。 (3)群落的稳定性。经受干扰的内在潜力。
(4)群落的营养结构:着重表征群落内部各种群间关系。 93.什么是生物多样性?保护生物多样性有何重要意义?
定义:生物类群层次结构和功能的多样性。包括遗传多样性、物种多样性、生态系统多样性和景观多样性。
意义:保护野生基因库;保护农业和药物资源;保护生态平衡
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