芦荟组培实验报告

芦荟的组织培养

生物09本

一、立题依据及背景

芦荟, 拉丁名Alo e, 是百合科多年生物肉质常绿植物, 叶子大, 长披针形.芦荟是一种古老而神秘的植物, 远在3000 多年前人类就用它治疗疾病, 我国从唐代就对芦荟的药用有记载。近年来, 随着科学技术的发展, 人们对芦荟的认识越来越深刻。经检测表明, 芦荟的鲜叶中含有芦荟西酊、芦荟碱、芦荟乌辛、治愈激素、蒽类、有机酸、多糖类、氨基酸、维生素及钙、磷、钾、铁等多种矿物质和微量元素。由于芦荟的叶中含有丰富的有效物质, 因而具有医疗、保健和美容等多种功能。经功能实验证实, 芦荟具有较强的抗感染、杀菌能力, 并能促进血液循环和新陈代谢,排除毒素及提高人体抗癌能力, 以外, 它还具有使皮肤收敛、柔化、保湿、消炎、增白、防皱纹、治疗粉刺的功效。因此, 芦荟被人们誉为“万应良药”、“人类最伟大的医生”,形成世界性的芦荟保健热, 成为开发者的开发热点。

目前, 芦荟广泛用于化妆品、食品、饮料、医药行业中。芦荟目前主要的繁殖方法是分株和扦插, 繁殖速度较慢, 因而限制了芦荟业的发展。分株和扦插的方法已经不能适应生产发展的要求,因此用组织培养快速繁殖的技术，可以提高产量，成本低，效益高。

二、实验方案

(一) 技术路线

药品称量 培养容器清洗 培养基配制 分装 芦荟茎尖 高压灭菌 消毒 接种 愈伤组织培养 分化培养 生根培养 移植 炼苗 试管苗

(二) 材料、方法与手段

1 材料 1.1 样品来源

将准备好的芦荟幼苗,用自来水冲洗好后,洗净外表泥土, 切除根部大部分叶片, 取茎尖部分,先用75%乙醇浸泡60S, 然后再用0. 1%升汞消毒15min, 最后用无菌水洗4 次—5 次。 1.2 培养基

愈伤组织诱导培养基（一） MS + ( 2. 5mg / 1) 6- BA+ ( 0. 15mg / 1) NAA, PH6. 2; 培养基（二） M S + BA 4.5mg/L+ IBA 0.2mg/L 上

分化培养基（一）: MS+ ( 2. 0mg/ 1) 6- BA+ ( 0. 10mg / 1) NAA , PH7. 0; 培养基（二）; M S +BA 4mg/L + NAA 0.5mg/L

生根培养基（一）: MS+ ( 0. 3- 0. 5mg/ 1) 6- BA+ ( 0.2mg / 1) IBA 培养基（二）：M S + BA 4.5mg/L + NAA 0.2mg/L +0.25% 活性炭上 2.方法与手段

2.1外植体获得

将准备好的芦荟幼苗,用自来水冲洗好后,洗净外表泥土, 切除根部大部分叶片, 取茎尖部分,先用75%乙醇浸泡60S, 然后再用0. 1%升汞消毒15min, 最后用无菌水洗4 次—5 次。 2.2愈伤组织

在无菌条件下, 将灭菌好的芦荟的茎尖接种到愈伤组织诱导培养基上, 培养条件: 温度( 27±1) ℃,每天光照10hr—12hr 后,光强2001x ,约15 天后, 试管中的外植体就可膨大形成愈伤组织周后,可将愈伤组织转管进行继代培养或分化培养。两种各培养基接15瓶，每瓶接3块组织。 2.3分化培养

在无菌条件下, 将愈伤组织取出,用无菌水冲净, 切成小块, 接种到分化培养基中,培养条件同愈伤组织培养,约30天后, 愈伤组织可分化为小芽, 并继续长出小叶片。两种培养基各接15瓶，每瓶接3块组织 2.4增殖生根培养

待叶片长至2cm—3cm 左右时,将幼苗取出, 在无菌条件下, 接种到生根培养基中, 约15 天后, 即可生根。两种培养基各接15瓶，每瓶接3株。

四、研究条件

植物组织培养实验室

五、研究进度安排

2011.10.31----2011.11.14 愈伤组织的获得 2011.11.14----2011.12.14 得到芽以及小叶 2011.12.14----2012.01.01 得到有根的小苗

六、预期结果

1.愈伤组织不定芽诱导 愈伤组织培养基1 愈伤组织培养基2 3天 6天 9天 12天 15天 2.分化培养 分化培养基1 接种数 分化数 分化百分比 小苗情况 原因分析 分化培养基2 3.增值生根培养 生根培养基1 有根小苗数 生根率 根系情况 分析原因

生根培养基2

[ 参考文献]

[ 1] 松男等. 芦荟组织培养快繁技术研究[ J ] . 中国野生植物资源, 1994, 5( 1) : 45～46. [ 2] 桂耀林等. 芦荟组织培养及器官分化的研究[ J] . 植物学报, 1990, 32( 8) : 606～610.