微生物实验手册 - 图文

实验四 实验室环境和人体表面的

微生物检查

一、实验目的

1、证实实验室环境与人体表面存在微生物； 2、体会无菌操作的重要性；

3、观察不同类群微生物的菌落形态特征。 二、实验原理

如何知道我们周围“看不见”的微生物变得可以\看得见\。 通过“放大”成子细胞群体（菌落），使我们看得到它们的存在，即通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌体在固体培养基上，经过生长繁殖形成几百万个菌聚集在一起的肉眼可见的菌落,来检查实验室环境和人体表面的微生物，从而使我们牢固树立“无菌概念”。

平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，1-2d内每一菌体既可以通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。

每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小，表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑、边缘整齐或者不整齐，菌落透明或半透明，颜色以及质地疏松或紧密等。因此可以通过平板培养基来检查环境中细菌的数量和类型。

三、实验材料：

1、培养基——牛肉膏蛋白胨琼脂平板

2、酒精灯、记号笔、培养皿、恒温培养箱、打火机等

四、实验步骤

1、标记

培养皿标记时在其边缘写上自己的实验项目、名字和日期，如果同一培养皿有多个小区时，要在各个小区内分别标记待处理的样品名，为了不影响观察，可用符号或者数字表示。

注意：不能在皿盖上作标记，因为在微生物学试验中，经常需要同时观察很多平板，很容易错盖皿盖。

分别在两套塑料一次性平板底部用记号笔划分出4个小区，在4个小区内分别标上

平皿1：A、B、C、D 平皿2：E、F、G、H

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另外2个玻璃培养皿平板分别在标签上标记空气1、空气2

2、人体表面微生物的检查

（1）手指表面：在火焰旁，半开皿盖，用洗前的手指在平板A区轻轻按一下，迅速盖上皿盖。然后用洗手2次，自然干燥后，在平板B区轻轻按一下，迅速盖上皿盖。

（2）头发：将你的1-2根头发轻轻放在平板C区，迅速盖上皿盖。

（3）鼻腔：取出灭菌的湿棉签在自己鼻腔内滚动数次后，立即在平板D区轻轻摩擦2-3次，盖上皿盖。

3、实验室环境的检查

（1）将标有“空气1”的平板在实验室打开皿盖，使培养基表面完全暴露在空气中，20分钟后盖上皿盖。

（2）将另一标有“空气2”的平板同样操作，置于一个你认为空气中微生物数量较多的环境内，20分钟后盖上皿盖。

注意：在记录本上记下“空气X\分别代表的含义。 （3）按同样方法取灭菌湿棉签，在实验台等4个你认为微生物较多的地方擦拭，再分别在第2个塑料平板的E、F、G、H相应区域滚动接种。（注意做好取样地点记录）

4、培养

将所有的琼脂平板翻转，使皿底朝上，置37摄氏度培养1天。 5、菌落特征描述如下 （1）大小：大、中、小、针尖状。可先将整个平板上的菌落粗略观察一下，再决定大、中、小的标准；

（2）颜色：黄色、金黄色、灰色、乳白色、红色、粉红色等； （3）干湿情况; 干燥、湿润、粘稠； （4）形态：圆形、不规则等； （5）高度：扁平、隆起、凹下；

（6）透明程度：透明、半透明、不透明； （7）边缘：整齐、不整齐。

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五、实验结果 菌落 数量* 大小 颜色 干湿 情况 形态 高度 透明程度 边缘 简要 说明 六、思考题

A B C D E F G H 空气1 空气2 *菌落数量可用+和-符号表示，从多到少依次为：+++++，++++，+++，++，+，- 1、列举2-3类微生物，说明它们在本实验条件下（肉膏蛋白胨琼脂平板，37℃）不能生长。

2、比较各种来源的样品，哪一种菌落数和菌落类型最多？为什么？

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实验五 普通光学显微镜的使用及

微生物形态观察

一、实验目的

1、复习普通光学显微镜的结构、各部分功能和使用方法； 2、学习掌握油镜的使用方法及油镜使用中的注意事项； 3、利用油浸系物镜观察细菌。 二、实验原理

微生物的个体微小，必须借助显微镜才能观察到。因此，显微镜就成为微生物学研究工作者不可缺少的基本工具。

显微镜的结构

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