东海中华管鞭虾多酚氧化酶(PPO)的纯化及特性研究

东海中华管鞭虾多酚氧化酶(PPO)的纯化及特性研究

作者：吕敏;黄光华;杨慧赞;王瑞;马华威;甘晖;曾兰;相兴伟

作者机构：广西壮族自治区水产科学研究院,广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;广西壮族自治区水产科学研究院,广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;广西壮族自治区水产科学研究院,广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;广西壮族自治区水产科学研究院,广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;广西壮族自治区水产科学研究院,广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;广西水产畜牧学校,水产养殖研究室,广西南宁530021;广西壮族自治区水产科学研究院,广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室,广西南宁530021;浙江省海洋开发研究院,浙江舟山316000 来源：现代食品科技 ISSN：1673-9078 年：2018 卷：034 期：011 页码：138-144 页数：7 正文语种：chi

关键词：中华管鞭虾;多酚氧化酶(PPO);酶学性质;纯化 摘要：本文采用匀浆浸提法提取中华管鞭虾(Solenocera

crassicornis,S.crassicornis)多酚氧化酶(polyphenoloxidase,PPO),经硫酸铵质量分级、离子交换、凝胶过滤纯化后,以左旋多巴胺(L-DOPA)为底物研究其底物专一性和动力学特性,并选取不同抑制剂和金属离子探讨对该PPO的抑制影响.结果显示,匀浆浸提法提取PPO的最佳条件为料液比1:2(W/V)、pH 7.5、浸提3h、温度50℃,从100 g中华管鞭虾中获取的PPO的产量和纯化倍数分别

是1.2％和25.9,中华管鞭虾PPO对L-DOPA和儿茶酚具有很显著地催化氧化作用(p≤0.05),Km值为分别是3.8 mM和8.12 mM,说明该酶为儿茶酚家族酶.PPO活性对苯硫脲、抗坏血酸、柠檬酸较为敏感,能显著被Cu2+、Zn2+、乙二胺四乙酸(EDTA)抑制.结果表明,中华管鞭虾PPO可能是活性部位含Cu2+的金属酶,为控制中华管鞭虾黑变提供基础的信息.