生物制药思考题

细胞破碎 固液分离 浓缩与初步纯化

高度纯化直至得到纯品以及成品加工

11.根据药物的不同特性，分离纯化蛋白质类药物的常用方法有那些，简述其原理？

方法 离子交换色谱IEC 疏水色谱HIC 亲和色谱AC 原理 通过带电的溶质分子与离子交换剂中可交换的离子进行交换，从而达到分离的目的 根据蛋白质疏水性的差异来分离纯化的 利用固定化配基与目的蛋白质之间特异的生物亲和力进行吸附 以具有空隙大小一定的多孔性凝胶作为分离介质，小分子能进凝胶过滤色谱 入孔内，在柱中缓慢移动，而大分子不能进入孔内，快速移动，利用这种移动差别可使大分子与小分子分开

12.重组蛋白质药物目标产品的质量控制项目？

（1）重组蛋白的鉴别（序列）（2）重组蛋白的纯度（杂质的类型）（3）重组蛋白的活性（检测方法）（4）重组蛋白的安全性（5）重组蛋白的稳定性（6）重组蛋白的一致性（构象与构型）

13.基因治疗的基本程序、临床应用及展望？

基本程序：（1）治疗性基因的选择（2）基因载体的选择（病毒载体、非病毒载体）（3）靶细胞的选择（体细胞、生殖细胞）（4）基因转移（间接体内疗法、直接体内疗法）（5）外源基因表达的筛选（利用在体中的标记基因）（6）回输体内

临床应用：（1）ADA（腺苷酸脱氨酶）缺乏症，T细胞受损，联合免疫缺陷 （2）乙型血友病，逆转录病毒转移IX因子 （3）肿瘤的基因治疗，细胞因子，自然基因

展望：（1）进一步寻找切实有效的基因（2）精密调控外源基因在人体内的表达（3）体细胞移植和重建的生物学研究（4）减少外源基因对机体的不利影响

14.动物细胞的培养条件及其大规模培养的方法？

培养条件：（1）所有的与细胞接触的设备、器材和溶液都必须保持绝对无菌，避免污染（2）必须有足够的营养保证，绝对不可有有害的物质，避免有害离子（3）保证有适量的氧气供应（4）需随时清除细胞代谢中的有害产物（5）有良好的适于生存的外界环境，渗透压、离子浓度和酸度（6）及时分种，保持合适的细胞密度

温度、PH、气体、渗透压、营养要求 培养方法：

根据培养细胞可分为原代培养和传代培养；

根据培养容器和方式可分为静止培养、旋转培养、搅拌培养、微载体培养、中空纤维培养、固定床和流化床培养；

实际生产可分为悬浮培养、贴壁培养和贴壁-悬浮培养。 微载体培养技术、中空纤维培养技术、微囊化技术

15.转基因动物的技术路线及其在医药行业中的应用？

技术路线：（1）通过手术从已交配的供体羊的输卵管中采集受精卵（2）用显微注射法向受精卵细胞核捣入人工构建的药物蛋白基因（3）经外科手术将受精卵移入同步发情的受体母羊的输卵管内（4）让受精卵在母羊体内发育至分娩出生。

在医药行业的应用：（1）人类疾病造模（2）药物产品的生产（3）异种移植

16.影响植物次级代谢产物产生和累积的因素有哪些？

（1）生物条件：外植体、季节、休眠、分化等

（2）物理条件：温度、光（光照时间、强度、光质）、通气（氧气）、酸度和渗透压

（3）化学条件：无机盐（N、P、K等）、碳源、物质生长调节剂、维生素、氨基酸、核酸、抗生素、天然物质和前体等

（4）工业培养条件：培养罐类型、通气、搅拌和培养方式

17.转基因植物在制药工业上的应用？

（1）生产天然药物：人参细胞培养、红豆杉细胞培养、丹参发根生物反应器大规模培养技术、紫草细胞培养（2）生产抗体、重组疫苗、多肽类药物

18.免疫球蛋白的结构及功能分区？

结构：

抗体分子由一对轻、重链组成 轻链：一个V区、一个C区 重链：一个V区、3个C区 同一类型抗体的C区序列保守

V区序列则随抗原识别特异性不同而不同 互补决定区(CDR) 骨架区(FR)

基本结构（四肽链结构）

两条相同的重链(heavy chain,H链) 两条相同的轻链(light chain,L链) 功能分区：