2019年高考生物考纲解读与热点难点突破专题16现代生物科技专题热点难点突破(含答案)

【解析】 本题考查PCR技术的相关内容。(1)过程Ⅰ是由mRNA形成cDNA的过程，表示逆转录，需要加入缓冲液、原料、RNA提取物、逆转录酶和引物A等。(2)过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95 ℃，其目的是让逆转录酶变性失活、使mRNA－cDNA杂合双链解开，该反应体系中所用的Taq酶至少应能耐受95 ℃。(3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要2

n

n－1

个引物

B。因为PCR扩增DNA片段过程最高经过n次扩增，形成的DNA分子数是2个，其中只有2条单链不含有引物。

【答案】 (1)RNA提取物 逆转录酶 (2)让逆转录酶变性失活、使mRNA－cDNA杂合双链解开 95 (3)2

n－1

(4)能 增加了待测RNA逆转录产生的DNA的数量(或浓度)，便于检测 (5)温度

12.为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。

(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用________法从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因。在上述引物设计时，分别在引物中加入如图甲所示酶的识别序列，这样可以用________酶处理两个基因后，得到________端(填图中字母)相连的融合基因。

(2)将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的T－DNA中，构建________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含____________的固体平板上培养得到单菌落，再利用______________培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液。

(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是_______________， 进一步筛选后获得转基因油菜。

(4)提取上述转基因油菜的mRNA，在________酶的作用下获得cDNA，再依据________的DNA片段设计引物进行扩增，对扩增结果进行检测，可判断融合基因是否完成________。

解析 (1)研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用PCR法从陆地棉基因文库中获取酶D基

因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因。在上述引物设计时，分别在引物中加入如图甲所示酶的识别序列，这样可以用ClaⅠ限制酶和DNA连接酶处理两个基因后，得到A、D端相连的融合基因。

(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞，进一步筛选后获得转基因油菜。

(4)提取上述转基因油菜的mRNA，在逆转录酶的作用下获得cDNA，再依据融合基因的DNA片段设计引物进行扩增，对扩增结果进行检测，可判断融合基因是否完成转录。

答案 (1)转基因技术 动物细胞培养 动物细胞融合(其他合理答案亦可) (2)限制酶、DNA连接酶 标记基因 (3)脾脏 聚乙二醇或灭活的病毒 (4)杂交瘤细胞 血浆或血清 不会

18.科学家以番茄(2N)和马铃薯(4N)为材料利用下图技术得到“番茄—马铃薯”植株。请回答下列问题：

(1)获得a、b所选用的酶为________，c和d的名称依次是________、________。

(2)图示技术名称是________；由d培育成植株的过程运用的技术手段是________，其依据的原理是__________________________________________。

(3)过程②称为________，所用的化学诱导剂一般是________，③过程成功的标志是______________________________________________________________。

(4)过程④是________，⑤过程增殖的方式为________，诱导f中植株生根过程中培养基中生长素与细胞分裂素的比值较④过程________(高/低)；最终获得的“番茄—马铃薯”属于________倍体植株。

答案 (1)纤维素酶和果胶酶 (正在融合的)原生质体 杂种细胞 (2)植物体细胞杂交技术 植物组织培养 植物细胞全能性

(3)原生质体融合 PEG(聚乙二醇) 杂种细胞再生出细胞壁(形成新的细胞壁) (4)脱分化 有丝分裂 高 六

19.如图所示为获得转基因鼠和单克隆抗体的制备过程，据图回答下列问题：

(1)过程Ⅰ将目的基因导入受体细胞的方法是________。在分子水平上检测该过程是否成功的程序是______________________________________________。

(2)过程Ⅱ表示受精卵经过体外培养，形成早期胚胎，再移植到受体母鼠体内。培养过程中，培养液中添加一定量的________，以防止杂菌污染，此外，应____________以便清除代谢产物，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。

(3)过程Ⅳ可以形成________种融合细胞，为了获得所需要的抗体，我们还需要的操作是________。

答案 (1)显微注射法 带有放射性同位素等标记的含有目的基因的DNA片段与提取的DNA或RNA混合，如果出现杂交带则说明导入成功

(2)抗生素 定期更换培养液 (3)3 筛选

20.红豆杉，又名紫杉，可从其树皮中分离出高抗癌活性的紫杉醇。下面是某同学设计的有关紫杉醇抗肿瘤实验的研究流程，请分析回答：

(1)酶X是________酶，其主要作用是________。 (2)物质Y是________，乙组起________作用。

(3)细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要有________、________、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需要加入血清、血浆。

(4)为清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，应采取的措施是________。 (5)实验结果：若甲组____________________________，说明紫杉醇有抗肿瘤作用。

(6)为了解决紫杉醇的药源问题，理论上可用________技术，把离体的红豆杉细胞经过________培养成愈伤组织，从中提取紫杉醇，进行加工生产。

答案 (1)胰蛋白(胶原蛋白) 使肿瘤细胞分散开 (2)生理盐水 对照(与紫杉醇形成对照)