浙科版高中生物选修一2.1《实验1：大肠杆菌的分离培养》学案（无答案）-精选教学文档

实验2 分离以尿素为氮源的微生物

【学习目标】

1.使用专一的培养基（含有尿素）分离专一的细菌（有脲酶的细菌）。 2.利用指示剂颜色的变化检知酶（脲酶）所催化的反应。 【教学重点】

对土样的选取和选择培养基的配置【教学难点】 选择培养基的配置 【知识链接】

1.培养基一般都含有 、 、 、 四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对 、 以及 的要求。

2.培养基的分类：按照物理性质可以分为 、 、 ；按照化学性质分为 和 ；按照用途分为 和 。

[来源:][来源学科网]

3.尿素可以为农作物提供 肥，但是只有被 分解成 之后，才能被植物吸收利用。

4.以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象，要达到的两个主要目的是： （1） ；（2） 。 【导学过程】 （一）筛选菌株

1.原理：人为提供有利于 生长的条件（包括 等），同时抑制或阻止其他微生物生长。2.方法：选择培养基

定义：在微生物学中，将允许 的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。 配制的依据：

①在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点，加入 可以分离出酵母菌和霉菌。加入高浓度的食盐可得到 。这里的加入是在培养

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的培养成分的基础上加入的。

②培养基中的营养成分的改变也可达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏 源时，可以分离固氮微生物。

③当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。

④改变微生物的培养条件， 也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在 环境中培养只能得到耐高温的微生物。 讨论1：怎样寻找耐高温的酶呢？ 讨论2.如何找到能够分解石油的细菌？ （二）设置对照

设置对照的主要目的 对照试验的定义：（三）实验设计

实验设计包括 ，所需 、 、用具和药品，具体的 以及时间安排等的综合考虑和安排。 （1）土壤取样

从富含有机物、潮湿、pH≈ 的土壤中取样。铲去 ，在距地表约 cm的土壤层取样。 （2）制备培养基

准备牛肉膏蛋白胨培养基和用 作为氮源的选择培养基。牛肉膏蛋白胨培养基作为 ，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。 （3）微生物的培养与观察

[来源学。科。网Z。X。X。K][来源学科网Z.X.X.K]

将土样以1、10-1、10-2……依次等比稀释至10-7稀释度，按照浓度从低到高的顺序涂布平板， （是否）更换移液管。对于不同的微生物要选择不同的稀释浓度，测定细菌一般选择 ，测定真菌一般选

择 ，测定放线菌一般选择 。注明培养基种类、培养日期以及平板培养样品的稀释度。将涂布好的培养皿放在 ℃温度下培养。随着培养时间的延长，会有不同的菌产生。比较牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基中菌落的数量、形态等，并做好记录。

讨论3.为什么分离不同的微生物需要不同的稀释浓度？ （四）操作提示

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1.本实验中要注意那些无菌操作？

2.在进行多组实验过程中，应注意做好标记，其目的是什么？应标记哪些内容？怎样操作更有利于实验的进行？ 3.如何对分离的菌种作进一步的鉴定？

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