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实验三
作物细胞液浓度的测定
作物组织细胞液浓度大小与作物的水分代谢、生长和抗性以及外界水分条件有密切关系。细胞液浓度愈大,说明作物组织中的水分愈少,外界的供水状况差。因此,测定细胞液浓度可得知作物的需水情况,作为灌溉的生理指标。
实验目的:
掌握利用阿贝折射仪测定细胞液浓度的原理和方法。
1方法原理
根据光学原理,当光线从某种透光介质射入另一种透光介质时,其方向便发生改变(即折射或折光)。由于折光率不同(入射角正弦值与出射角的正弦值之比)随介质的种类及浓度而异,亦随温度而变化。因此,在同一温度下,可以鉴别不同物质或同一物质的不同浓度。作物组织细胞液浓度在不同浓度的情况下,其折光率也不同。选取待测作物一定部位的叶片(或块根,多汁果实等)榨出细胞液汁液,置于阿贝折射仪(或手持糖量计)中观察,根据折光率的大小可迅速而简便地测出细胞液浓度。
2 仪器用品
阿贝折射仪(或手持糖量计)、榨汁钳、打孔器、温度计、拭镜纸、小滴管等。
3 操作步骤
(1)在开始测定前,必须先用蒸馏水或用标准试样校对读数。如用标准试样则对折射棱镜的抛光面加1—2滴溴代萘,再贴上标准试样的抛光面,当读数视场指示于标准试样上之值时,观察望远镜内明暗分界线是否在十字线中间,若有偏差则用螺丝刀微量旋转小孔内的螺钉,带动物镜偏摆,使分界线相位移至十字线中心。通过反复地观察与校正。使示值的起始误差降至最小(包括操作者的瞄准误差)。校正完毕后,在以后的测定过程中不允许随意再动此部位。
(2)榨取汁液。
如待测作物样品为多汁的大型果实(如番茄、梨等)或块根、块茎,可将表面的泥土洗净,用打孔器在待测部位打出圆柱状组织,切下适当的小块,置于榨汁钳上榨汁。小型多汁材料直接榨汁即可。如测定作物叶片汁液浓度,则最好在田间进行,选取有代表性植株,将待测叶片上的尘土擦净,取下后迅速将叶片叠成方块状,用榨汁钳榨出汁液。
(3)用干净滴管吸取刚榨出来的汁液,滴2~3滴于折射棱镜表面,并将进光棱镜盖上,用手轮锁紧,要求液层均匀,充满视场,无气泡。打开遮光板,合上反射镜,调节目镜视度,使十字线成相清晰,此时旋转手轮并在目镜视场中找到明暗分界线的位置,再旋转手轮使分界线不带任何彩色,微调手轮,使分界线位于十字线的中心,再适当转动聚光镜,此时目镜视场下方显示的示值即为被测液体的折射率。视场中示值上半部读数,即为蔗糖溶液质量分数。
(4)观察记录完毕后,用蒸馏水将棱镜上的汁液冲洗干净,用拭镜纸擦干。 鉴于一般仪器均系标准温度(20oC)设计而成,在非标准温度测量时,若果要获得准确数据,则应进行修正。即利用温度修正表(见仪器说明书中的附表),在原有的读数上,加上(大于20oC)或减去(小于20oC)测定温度时的修正值,既得正确读数。
手持糖量计的设计原理与阿贝折射仪相同,具体使用方法可参看说明书。用这种仪器进行测定,精度不如阿贝折射仪的。
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