土壤农作学实验指导书最终.

烘干法测定土壤含水量记录表

盒号

盒重 （g） 盒+湿土重（g） 盒+干土重（g） 干土重（g） 水分重（g） 含水量（%）

试验二 小液流法测定作物液水势

科学实验证明：作物水分不足时，首先会灵敏地反映在水分生理上，利用各种水分生理指标指导灌水，能及时合理地保证作物生长发育对水分的需要，从而获得更高的产量。水分生理指标主要有叶水势、细胞液浓度和气孔开度等。

植物体内的生理生化活动与其水分状况密切相关，而植物组织的水势是表示植物水分状况的一个重要生理指标。目前，植物组织水势的测定主要有几种方法：小液流法、折射仪法、压力室法、露点法、热电偶法。前两种方法虽然简便，但精确性差。压力室法较适于测定枝条或叶柄导管的水势。露点法、热电偶法较适宜测定柔软叶片的水势，且精确度高，可在一定范围内重复测定叶片的水势，是较好的水势测定方法。植物的水势可作为制定灌溉的生理指标。

一、试验目的：

掌握作物的叶水势测定原理和测定方法，本次试验主要讲述小液流法。

二、方法原理

将待测的作物叶组织浸入一系列不同浓度的蔗糖溶液中，作物叶组织便开始与蔗糖溶液进行水分交换。若叶组织的水势小于外界糖液的渗透势，则叶组织就会从糖液中吸水，而使糖液浓度变大。反之，则向外排水而使糖液浓度降低。若二者相等则浓度不变，说明叶组织中溶液与糖液间的水分交换成动态平衡，亦即等渗浓度。故可根据糖液浓度的变化来测定作物组织的水势。小液流法又称浓度不变法。因糖液浓度的变化和比重有一定的相关性。将浸过叶组织的一系列不同浓度的糖溶液，经染色后，分别滴入相应浓度的未浸过叶片的糖液中，由于浓度和比重不同，使滴出的液滴出现向上或者向下的现象，而液滴不作上下流动的浓度，即为等渗浓度。据此可计算出被测叶组织的水势。

三、材料、设备及试剂

1. 材料：植物叶片；马铃薯块茎等。

2. 仪器设备：钻孔器、毛细滴管、量筒、试管、试管架、试剂瓶、小滴瓶、温度计等。

3. 试剂：1mol·L－1蔗糖液；次甲基蓝。

四、实验步骤

1. 系列糖浓度配制

1.1 取干燥洁净试管6支，贴上标签，编号，用1mol·L－1蔗糖母液配成0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mol·L－1浓度的糖液，各管总量为10ml，并塞上塞子（防止浓度改变），作为甲组。

1.2 另取干燥洁净的小瓶6个，标明0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mol·L－1浓度，分别从甲组取相应浓度糖液1ml盛于小瓶中，随即塞上塞子，作为乙组。 2. 取样及测定

2.1选取生长一致的叶片，用直径为0.5cm的打孔器钻取圆片，在玻璃皿内混匀，然后用镊子把圆片放进乙组小瓶中，每瓶放15～20片，（若采用植物块茎如马铃薯，先用打孔器钻取圆条，然后切成约1mm厚圆片，每瓶放5片），立即塞紧塞子，放置40min左右，其间轻轻摇动几次，以加速平衡。

2.2 到预定时间后，各小瓶加入几粒次甲基蓝染色，摇匀，用毛细滴管，分别从乙组中取出溶液，插入甲组原相应浓度蔗糖溶液的中部，轻轻挤出毛细滴管内的溶液，使成小液滴，并小心地抽出毛细滴管（注意勿搅动溶液），注意观察哪些管的小液滴往上移动，哪些管的小液滴往下移动，那一管的小液滴静止不动。如果某一管中的小液滴悬浮不动，则说明该管溶液与小液流的密度相等，也即植物组织与该浓度糖液间未发生水分净交换，植物组织的水势等于该糖液的水势，根据公式算出该糖液水势也即得出植物组织水势。若前一浓度溶液小液流下沉，而后一浓度溶液中上浮，则组织的水势值介于两糖液水势之间，可取平均值计算。 2.3 结果记录 记录表如下：

叶组织水势记录表

糖液浓度（mol/L） 小液流方向（用箭头表示） 叶组织水势（105Pa） 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 2 试剂用品

（1）次甲基蓝

（2）蔗糖溶液：取蔗糖342g溶于1L水中，此为1mol/L的蔗糖溶液。然后

根据需要再稀释成各种不同浓度（如依次相差0.1或0.5mol/L）的一系列糖溶液备用。

（3）用品：钻孔器、毛细滴管、量筒、试管、试管架、试剂瓶、小滴瓶、温度计等。

3 操作步骤

（1）将不同浓度的蔗糖溶液，分别以1ml和4ml，置于两组干燥洁净的试管中，塞好瓶塞，贴上标签，标明浓度。

（2）用钻孔器钻取待作物一定部位（如棉花一般是株顶部第四功能叶）的叶片（如没有钻孔器，用剪刀取同样大小的叶片也可），取相同的数量，分别投入盛有1ml蔗糖溶液的一组试管中，并使全部浸没于溶液中。

（3）经过30～40min后（此期间经常摇动试管），分别取微量的次甲基蓝粉末投入试管中，使溶液染色。

（4）用毛滴细管（也可用1ml的移液管代替）吸取着色溶液（按顺序由底浓度到高浓度），分别放入相应浓度的4ml糖液的一组试管中。放时应注意将滴管尖端置于糖液的中央，缓缓滴出，并仔细观察着色溶液的小液流的运动方向。若液流运动方向向下，说明该溶液由于叶组织吸水而变浓，比重变大；若液流向上，则说明该溶液由于叶组织中排水而变稀，比重变小；如果在某一浓度的溶液中小液滴静止不动，说明该溶液的浓度没有发生改变，此即等渗浓度。如果小液流在前一浓度的溶液中下沉，而在后一浓度的溶液中上升，则等渗浓度介于此两种浓度之间。

4 结果结算

找出等渗溶液浓度后，叶组织的水势就可以按照下式进行计算： ψw叶（105Pa）=-C糖RTi×1.013 式中：C糖——糖溶液的浓度（mol/L）； R——气体常数=0.082；

T——绝对温度=实验时温度+273； i——等渗系数，蔗糖的等渗系数=1；

1.013——将以大气压为单位换算成以105Pa为单位的系数