食品生物技术导论复习提纲

8、酒精罐和啤酒罐冷却装置区别。

酒精罐：对中小型酒精罐，采用罐顶喷淋于罐外壁进行膜状冷却；而对于大型酒精发酵罐，则采用罐顶喷淋与罐

内冷却蛇管相结合。为避免发酵车间的潮湿和积水，要求在罐体底部沿罐体四周装有集水槽。采用管外列管式喷淋冷却的方法，具有冷却发酵液均匀，冷却效率高等优点。

啤酒罐：外面设有冷却管，冷媒可以是乙二醇、酒精、冰与盐水的混合物 第六章 （一）名词解释

1、细胞融合：是指在外力的作用下，两个以上的异源（种、属）细胞或原生质体互相接触，不经过有性过程而发生膜融合、胞质融合和核融合并形成一个杂合细胞的现象。

2、细胞重组：将细胞核质分离技术与细胞融合技术结合，在融合介质作用下，使胞质体与完整细胞合并，使胞质体与完整细胞，或胞质体与核质体，或微细胞与完整细胞重新组成细胞的过程。

3、核移植：就是利用显微操作技术将一个细胞的细胞核移植到另一个细胞中，或者将两个细胞的细胞核（或细胞质）进行交换，从而可能创造无性杂交生物新品种的一项技术。 4、微细胞：核内染色体不完整的细胞 5、原代培养：将动物组织消化后的初次培养

6、传代培养：用胰蛋白酶将出现接触抑制的贴壁细胞从培养瓶壁上脱离下来，制成细胞悬液，分装到多个培养瓶中继续培养，这个过程叫传代培养。

7、细胞系：初次培养的细胞经第一次传代成功后，即称之为细胞系。

8、细胞株：从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选方法，由单细胞增殖形成的细胞群，称细胞株

9、粘附型细胞：附着在某一固相支持物表面才能生长的细胞。

10、接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止的现象。 11、有限细胞系：在体外的生存期有限即不能长期传代的细胞系。

12、无限细胞系：大多数细胞系在有限的代数内增殖，当超过有限世代后，细胞获持久性增殖能力，发育成无限细胞系或称连续细胞系。

13、愈伤组织：是指外植体组织增生的细胞产生的一团不定型的疏散的排列的薄壁细胞，是分化的，而且还未形成组织的结构。

14、外植体：是指植物组织培养中用来进行离体培养的植物材料。 15、悬浮培养：是指细胞在反应器中自由悬浮生长。

16、植板率：是在平板上形成细胞团的百分率，即每100个铺在平板上的细胞有几个能长出细胞团。

17、细胞工程：利用细胞生物学和分子生物学技术，应用工程学的方法，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性，从而获得特定的细胞、细胞产品或新生物品种的一门综合性科学技术。 （二）问答题

1、动物细胞培养形态类型和生长特点。

①上皮细胞型：类似体内的上皮细胞，扁平，不规则多角形，中有圆形核。彼此紧密相连成铺石状薄层；生长时

呈膜状移动；很少脱离细胞群而单个活动

②成纤维细胞型：胞体梭形或不规则三角形；胞质向外伸出2—3个长短不等的细胞突起；中有卵圆形核。排列成

放射状，漩涡状，不连成片。

③游走细胞型：外形不规则且不断变化，细胞内容易出现暗的吞噬性颗粒。生长位置不固定，分散，呈活跃的的

游走和变形运动。

④多形性细胞型：外形不规则，细胞由略呈多角形的胞体和细长的、类似伪足的胞突两部分组成，胞内容易出现

暗的吞噬性颗粒 2、动物细胞固定化培养方式有哪些。 ①微载体培养技术 ②大载体培养技术 ③多孔载体培养 ④微囊化培养技术 ⑤中空纤维细胞培养技术

3、植物细胞和动物细胞培养需哪些特殊的成分。

（1）植物细胞培养：通常包括无机盐、碳源、维生素、生长调节素、有机添加剂等。

①碳源和能源：培养中的细胞对蔗糖和葡萄糖都能利用，果糖的利用效果较差。

②维生素：培养中的植物细胞都需要硫胺素，加入烟酸、泛酸、生物素和叶酸，效果更好。

③氨基酸：虽然植物细胞在培养过程中一般都能合成所需的氨基酸，但加入L-谷氨酰胺或其他氨基酸混合物

是很有好处的。此外，还使用蛋白酶解产物，如酪蛋白或酪蛋白水解氨基酸。其它有机添加剂还有如乳蛋白水解物，酵母提取物等

④植物生长激素：激素分为两类，生长素和分裂素。生长素促进细胞生长，最有效和最常用的是吲哚乙酸和

萘乙酸；分裂素促进细胞分裂，常用的是腺嘌呤衍生物。使用最多的是6-苄氨基嘌呤和玉米素，对芽的诱导具有重要作用。 （2）动物细胞培养：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、激素以及动物或人血清等。

4、单细胞分离方法和培养方法分别有哪些

（1）单细胞分离方法：①机械法：将叶肉组织研碎，经过滤和离心，收集和净化细胞。 ②酶法：利用果胶酶、纤维素酶处理植物叶片或其他外植物体，使细胞分离。 ③化学法：利用利用化学药剂使细胞分离的方法。

（2）单细胞培养方法：①看护培养：用一块活跃生长的愈伤组织来促进培养细胞持续分裂和增殖的方法。 ②平板培养：将悬浮单细胞与融化的琼脂培养基均匀混合后平铺一薄层在培养皿底上的培养法。

③微室培养：在人工制造的无菌小室中，将一滴悬浮细胞液培养在少量培养基上，使其分裂增殖成细胞团的方法 5、大规模培养植物细胞的特点和主要的生物反应器类型。

特点：①植物细胞对剪切力敏感。 ②植物细胞培养通常形成细胞团。 ③植物细胞生长速度慢，操作周期长

④多泡沫。 ⑤植物细胞在高浓度培养时为假塑性流体。 ⑥植物细胞的需氧量要比微生物要低的多。 ⑦大多数植物细胞培养需要光照。 生物反应器类型：

（1）悬浮培养生物反应器：①机械搅拌反应器

②非机械搅拌反应器：通常为气体搅拌反应器，是一种利用通入的空气作通气和搅拌的生物反应器。

A鼓泡式反应器B气升式反应器（a外循环式b内循环式）C转鼓式生物反应器

③光照搅拌式光生物反应器

（2）固定化细胞生物反应器：①填充床反应器 ②流化床反应器 ③膜反应器

6、细胞融合和细胞拆合的方法有哪些

细胞融合：①病毒诱导细胞融合：常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等，其

中仙台病毒最常用。两个原生质体或细胞在病毒黏结作用下彼此靠近，使两个细胞膜、胞质间互相渗透 、细胞核互相融合，进入正常的细胞分裂途径，形成杂种细胞。

②化学融合剂法：利用化学融合剂，促使原生质体相互靠近、粘连融合的方法。

A、聚乙二醇（PEG）诱导融合：PEG是乙二醇的多聚物, 存在不同分子量的多聚体,它可改变各类细胞的

膜结构, 使两细胞相互接触部位的膜脂双层中脂类分子发生疏散和重组,此时相互接触的两细胞的胞质沟通成为可能,从而造成细胞之间发生融合.。

B、NaNO3处理诱发融合：一般认为是Na+造成了膜电位的改变。 C、高pH—高浓度钙离子处理：

③物理诱导细胞融合：A电诱导细胞融合法： B 激光诱导细胞融合 C离子束诱导细胞融合

细胞拆合：①物理拆合法：是用机械的方法或短波光将细胞核去掉

②化学拆合法：使用细胞松弛素 7、简述原生质体制备的步聚

取材与消毒 肥皂水－70%酒精－3%次氯酸钠－无菌水 ↓

原生质体的分离 机械分离；酶解 ↓

原生质体的纯化 可采用不连续梯度法、沉降法和漂浮法 ↓

洗涤 用原生质体培养液洗涤。 ↓

鉴定 用低渗溶液确认是否已获得原生质体 ↓

活力测定 即形态识别，酚藏花红染色法或伊凡蓝染色法、FAD法

8、原生质体纯化的方法有哪些

（1）漂浮法：采用比原生质体密度大的高渗溶液（蔗糖、Percoll、Ficoll）， 使原生质体漂浮在液体表层的纯化方法。

（2）沉降法（过滤—离心法）：利用比重原理，在具有一定渗透压的溶液中，先进行过滤然后低速离心，使纯净完整的原生质体沉积于试管底部。

（3）不连续梯度法：又称界面法，采用两种密度不同的溶液形成不连续梯度，通过离心使原生质体与破损细胞分别处于不同液相中，从而纯化原生质体的方法。 9、融合子选择的方法和原理。

（1）显微鉴别：根据两亲本原生质体的形状和结构的差异来鉴别杂合体。如一方细胞基本无色，另一方为绿色，

则白绿色结合的细胞就是杂合细胞根据可见标记性状的机械选择法

（2）荧光标记：FITC(异硫氰酸荧光素)在荧光显徽镜下呈绿色； RITC (异硫氰酸罗丹明) 在荧光显徽镜下呈红

色

（3）互补选择法：利用两个亲本具有不同遗传和生理特性,在特定培养条件下,只有发生互补作用的杂种细胞才能

生长的选择方法。

①代谢互补：利用两种营养缺陷型或两种抗性突变体的原生质体进行融合，在同时缺陷两种物质或同时含有

两种有害物质的培养基上筛选杂种细胞，能生长的细胞团可以初步认为由杂种细胞形成。

②生长互补：双亲原生质体的生长需要外源生长激素，而由双亲原生质体融合后形成对生长激素自养的杂种细胞，能在无外源生长激素的培养基上生长。

（4）细胞学鉴定：利用染色体显带技术，以亲本染色体为对照，对细胞杂种的染色体数目、形态和带型进行观

察。

（5）同功酶鉴定：根据亲本和杂种同功酶谱的差异来鉴别杂种。有的呈双亲谱带的总和、有的出现新谱带或丢失

部分亲本谱带。常用的鉴定酶为：乙醇脱氢酶、乳酸脱氢酶、过氧化物酶、酯酶等。

（6）DNA分子标记鉴定：是在DNA水平上对亲本和杂种植株遗传差异进行鉴定的一种技术。