生理实验讲义

样，逐渐增大刺激强度，记录刚能引起肌肉收缩的刺激强度。随后随着刺激强度的增加肌肉收缩幅度也不断增加，直至产生最大单收缩。记录此时的刺激强度，固定此刺激强度进行以下实验。 ⒉改变采样间隔，记录单收缩波形，分辨其三个时相。

⒊改变刺激参数用双脉冲刺激，调节脉冲之间的延时，记录两个收缩分别在舒张期及收缩期的复合收缩曲线。

⒋用复刺激方式，刺激频率从小到大，观察肌肉收缩从连续的单收缩、不完全强直收缩直到完全强直收缩。

五、对所观察的实验现象进行讨论。 注意事项

⒈所有仪器应接地良好。

⒉保持标本湿润，但也要防止刺激电极短路。

⒊刺激肌肉的时间不应过长，在每次刺激之后必须让标本有相同的休息时间，以防肌肉疲劳。 思考题

⒈为什么在一定范围内骨骼肌的单收缩幅度随刺激强度的增加而增大？ ⒉为什么骨骼肌会发生复合收缩？

⒊同一块肌肉，其单收缩、复合收缩和强直收缩的高度是否相同？为什么？ ⒋不同的骨骼肌，引起完全强直收缩的刺激频率是否相同？为什么？ ⒌动作电位会不会有总和现象？为什么？

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实验六 人体血型鉴定与交叉配血

实验原理 血型就是红细胞上特异抗性原（凝集原）的类型。在ＡＢＯ血型系统，根据红细胞上是否含有Ａ、Ｂ凝集原而分为Ａ、Ｂ、ＡＢ和Ｏ型。血清中含有凝集素，且Ａ凝集原只能与抗Ａ凝集素结合，Ｂ凝集原只能与抗Ｂ凝集素结合。血型鉴定即是将受试者的红细胞加入标准Ａ型血清（抗Ｂ血清）及标准Ｂ型血清（抗Ａ血清）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞上凝集原的类型。 交叉配血实验是将供血者的红细胞和血清分别和受血者的血清和红细胞混合，观察有无凝集现象。其目的，一是鉴定所测血型是否正确；二是观察是否还有其它不能输血的因素存在，以确保安全输血。

实验目的 学习血型鉴定和交叉配血的方法 实验对象 人

实验器材和药品 显微镜、离心机、采血针、双凹载玻片、滴管、１ml吸管、小试管、试管架、牙签、消毒注射器及针头；标准Ａ、Ｂ型血清、生理盐水、75％酒精、碘酒、棉球、消毒棉签。

实验步骤和观察项目

表6－1

凝　集　现　象被检者血型标准Ａ型（抗Ｂ）血清标准Ｂ型（抗Ａ）血清被红细检胞悬者液－－＋＋－＋－＋Ｏ　型Ａ　型Ｂ　型ＡＢ型

注：＋代表凝集，－代表未凝集。

一、血型鉴定：

⒈用75％酒精棉球消毒左手无名指端，用消毒采血针刺破皮肤。用吸管吸１滴血于盛有１ml生理盐水的小试管中，混匀制成红细胞悬液。

⒉取一双凹载玻片，在左上角写Ａ字，右上角写Ｂ字，将１滴标准Ａ型（抗Ｂ）血清滴在右侧凹内，１滴标准Ｂ型（抗Ａ）血清滴在左侧凹内。滴管切勿混用。

⒊用滴管吸取红细胞悬液，分别滴１滴于载玻片两侧的血清上，注意不要使滴管尖端与血清

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接触，用牙签两端分别混匀。

⒋10～30分钟后用肉眼观察有无凝集现象。根据表6－1报告鉴定结果 二、交叉配血：

⒈以碘酒、酒精消毒皮肤后，用消毒的干燥注射器抽取供血者静脉血２ml，取１滴加入盛有生理盐水１ml的小试管中，制成红细胞悬液；其余血液装入另一小试管中，待其凝固后离心分离血清；在试管上分别注明“供红”和“供清”。

⒉同法制成受血者的红细胞悬液及血清，分别注明“受红”和“受清”。

⒊取一双凹载玻片，在左上角写“供红受清”，右上角写“供清受红”。分别用滴管吸取“供红”、“受清”各１滴于左侧凹内，再分别用滴管吸取“供清”、“受红”各１滴于右侧凹内，用牙签两端分别混匀。

⒋10～30分钟后观察结果。如两侧均无凝集现象，表示血型配合，可以输血。 注意事项

⒈操作时各滴管不能混用。

⒉肉眼看不清凝集现象时，应在显微镜下观察。

⒊红细胞悬液不能太浓或太淡，否则可能出现假阴性反应。

⒋必须注意区分红细胞叠连现象与凝集现象。前者经混匀或摇晃，串状的红细胞即可分开，而后者决不会因此而有所变化。

⒌静脉采血必须严格按临床化验要求进行操作。如本实验室不具备条件，可免做交叉配血实验。 思考题

⒈如果有标准Ａ型红细胞和标准Ｂ型红细胞，但无标准血清时，能否进行血型鉴定？ ⒉为什么血型相同的人之间输血仍要做交叉配血实验？

实验七 心脏起搏点

实验原理 心脏的特殊传导系统具有自动节律性，并且其各部位的自律性高低不同。正常情

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况下整个心脏的活动受自律性最高的部位所控制，此部位称为正常起搏点，由它发出的兴奋依次传到心房和心室，引起心脏跳动。如果正常起搏点的兴奋传导被阻断，则由当时自律性最高的部位担当异位起搏点，它发出兴奋引起心脏以较慢的节律跳动。由于正常起搏点对异位起搏点具有抑制作用，通常在正常起搏点的兴奋传导被阻断后要经过一段时间异位起搏点才能起搏。在哺乳类，窦房结的自律性最高，其次是心房，再次是心室，窦房结是正常起搏点。两栖类的正常起搏点是静脉窦。

实验目的 观察心脏起搏点及心脏各部分自动节律性的高低。 实验对象 蛙或蟾蜍

实验器材和药品 蛙类手术器械、蛙心夹；任氏液。 实验步骤和观察项目

一、毁蟾蜍脑和脊髓，仰卧固定在蛙板上。用镊子夹起胸部皮肤，沿纵向及横向作十字型剪开，纵向上下到颈、腹部，横向到左、右肋部，并将皮肤掀开。用镊子提起胸骨后端，将腹肌沿胸骨剪开，除去胸骨后端，提起胸骨，将普通剪刀紧贴胸壁伸入胸腔内，剪开胸骨及上喙骨（注意将刀尖上挑，以免损伤下面的心脏和血管），然后将断骨拉向两侧，或剪去一部分断骨，可见心包膜下的心脏。用眼科镊小心提起心包膜，并用眼科剪将心包膜沿心轴方向剪开，暴露心脏。 二、识别心脏的各个部位。从心脏的腹面可看到心室、左右心房、动脉圆锥、主动脉干及左、右主动脉分支，房、室之间有一房室沟。用玻璃针将心室翻向头侧，可看到两心房下端相连的静脉窦，及心房和静脉窦之间的窦房沟（半月形白色条纹）。静脉窦与前、后腔静脉相连。观察静脉窦、心房、心室跳动的次序，记录它们跳动的频率。

三、用小镊子在主动脉干下穿一线备用，用玻璃针将心尖翻向头端，暴露心脏背面，然后将主动脉干下的那一条线在窦房沟处绕一结，当线正确地落到半月形白色条纹上时，迅速扎紧，以阻断静脉窦和心房之间的传导，此为斯氏第一结扎。记录结扎时间。此时心房、心室立即停止跳动，而静脉窦仍继续跳动。记录静脉窦的跳动频率。

四、经过一段时间后，如心房和心室又开始跳动，记录恢复跳动时的时间及静脉窦、心房和心室的跳动频率，比较它们的跳动频率是否一致。然后在房室沟做第二结扎，即斯氏第二结扎，记录结扎时间。此时心室立即停止跳动，心房仍继续跳动。记录静脉窦和心房的跳动频率。

跳动频率（次／分）静脉窦正　　常斯氏第一结扎斯氏第二结扎心　房心　室恢复跳动时间　（ 分 ）表7－1：

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