当前位置：首页 > 2019-2020年高三一轮复习系列选考总复习（浙江专版）生物讲义：第30讲酶的利用 Word版含答案
应先制水果匀浆，再向水果匀浆中加入果胶酶，并在适宜温度下反应足够长时间，将果汁中的果胶完全水解。在此基础上通过加热使果胶发生凝聚，可以进一步提高果汁的出汁率、澄清度。(3)果胶酶可通过培养黑曲霉和苹果青霉来生产。 (4)将果胶酶制成固定化酶，可以提高果胶酶的利用率和果汁的纯度，体现了固定化酶可以重复利用和容易从产物中分离的优点，此外，固定化酶还有可以使酶的稳定性提高的优点。
答案 (1)半乳糖醛酸甲酯 (2)果胶酶溶液 适宜温度 加热 (3)黑曲霉和苹果青霉 (4)固定化酶 酶的稳定性提高(或不溶于水) 2.某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。
请据图回答：
(1)图中用KMnO4溶液浸泡苹果的目的是________。黑曲霉提取液中含有的________可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过________方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去________。 (2)实验中，操作流程A和B的先后顺序为________。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是________。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否有果胶，可取一定量的果汁与等量的________混合，如果出现________现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调________。
(3)实验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被________使用。
解析 (1)KMnO4有杀菌消毒的作用，可将苹果表面的杂菌杀死。果汁中因含有果胶等而使苹果汁浑浊，用果胶酶处理可使果胶水解，使果汁澄清。固定化酶技术是将酶固定在固定化柱的载体上，固定化柱内填充的石英砂可以起到很好的吸附作用。酶被固定后用蒸馏水冲洗是为了除去未被固定的游离的酶。(2)具体操
作时，先将阀1打开，将提取的果胶酶固定在固定化柱中，再将阀门1关闭，阀2打开，使苹果汁进入固定化柱，与酶接触，固定的果胶酶就能将果汁中的果胶分解，而果胶酶不流失。果汁中的果胶不溶于乙醇中会形成沉淀，故可用乙醇鉴定果汁中的果胶，如有浑浊现象，说明果汁中仍有果胶存在，为使果胶完全水解，应控制阀门2的流量，调慢果汁流速。(3)酶被固定化后，便于与反应物和产物分离，可重复利用，提高酶的利用率。
答案 (1)消毒 果胶酶 吸附 未被固定的酶等 (2)A、B 阀1 乙醇 浑浊(沉淀) 慢 (3)重复
3.下列是有关固定化酶及细菌培养与分离的问题。请回答：
(1)固定化酶是将水溶性的酶用物理或________的方法固定在某种介质上，使之成为________而又有酶活性的制剂。可用________法将α－淀粉酶固定在石英砂上形成固定化酶柱。
(2)为获取土壤中的含脲酶的细菌，某同学进行了相关实验，操作流程如下。
上图中步骤A为________，步骤B为________。要判断培养基灭菌是否彻底，可采用的方法是________。为获取含脲酶的细菌，在制备培养基时需加入________为唯一氮源。
(3)在实验过程中需对实验器具进行严格的消毒灭菌，对以下器具的消毒需用到酒精的是________。 A.接种环 C.玻璃刮刀
B.培养皿 D.G6玻璃砂漏斗
(4)根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出的细菌数目往往比实际数目低，原因是_________________________________________________。 解析 (1)固定化酶是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。可用吸附法将α－淀粉酶固定在石英砂上
形成固定化酶柱。(2)操作流程图中步骤A为制平板，步骤B为涂布分离过程。将灭菌后的空白培养基培养一段时间后观察是否出现菌落，可以判断培养基灭菌是否彻底。为获取含脲酶的细菌，在制备培养基时需加入尿素为唯一氮源。(3)对接种环、培养皿和G6玻璃砂漏斗需要高压蒸汽灭菌，玻璃刮刀需要用酒精消毒。(4)在涂布分离时，若两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，这样计数的结果会比实际数目低。
答案 (1)化学 不溶于水 吸附 (2)制平板 涂布分离 将灭菌后的培养基培养一段时间后观察是否出现菌落 尿素 (3)C (4)当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
4.某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下图所示。
土样中的菌株优良菌株植酸酶植酸酶植酸酶
→→→→→
菌种筛选鉴定扩大培养提纯固定化特性分析请回答：
(1)土壤悬液首先经80 ℃处理15分钟，其目的是筛选出________。
(2)在无菌条件下，将经过处理的土壤悬液________，然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到________，其周围出现透明水解圈，圈的直径大小与________强弱相关。
(3)筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养。培养时需要振荡，其主要目的是______________。液体培养基与固体培养基相比，不含有的成分是________。
(4)在合适条件下，将提纯的植酸酶与海藻酸钠混合后，滴加到一定浓度的钙离子溶液中，使液滴形成凝胶固体小球。该过程是对酶进行________。 A.吸附 C.装柱
B.包埋 D.洗涤
(5)温度与植酸酶相对酶活性的关系如图所示。下列叙述错误的是________。
A.测试温度中，固定化与非固定化植酸酶的最适温度分别为60 ℃和45 ℃ B.测试温度范围内，固定化植酸酶的相对酶活性波动低于非固定化植酸酶 C.固定化与非固定化植酸酶相比，相对酶活性在80%以上时的温度范围较宽 D.65 ℃时固定化与非固定化植酸酶的相对酶活性因蛋白质变性而位于最低点 解析 土壤悬液经80 ℃处理15分钟，土壤中耐高温微生物能生存，能筛选出耐高温菌株。采用稀释涂布法分离菌种时，需要先在在无菌条件下对土壤悬液进行稀释操作，再进行涂布操作。稀释涂布后可以在平板上发现单菌落，若某单菌落周围出现透明圈，说明该菌种能利用植酸钠，圈的直径大小与植酸酶的活性强弱相关。扩大培养一般用液体培养基，并采用振荡培养，以提供菌种生长所需氧气，液体培养基中不含凝固剂(琼脂)保持液体状态。将植酸酶与海藻酸钠混合，制成凝胶固体小球，是采用包埋法对植酸酶进行固定化的方法。分析温度与植酸酶相对酶活性的关系图不难发现，固定化植酸酶的相对酶活性在65 ℃时仍然很高，说明固定化植酸酶的耐高温能力很强，并没有发生蛋白质变性。
答案 (1)耐高温菌株 (2)稀释 单菌落 植酸酶的活性 (3)供氧 琼脂 (4)B (5)D
5.(2017·金华十校联考 节选)请回答与“固定化酶”实验有关的问题： (1)α－淀粉酶可以通过培养枯草杆菌来生产，________是筛选高表达量菌株的最简便方法之一。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用________培养基进行扩大培养。
(2)利用物理或化学的方法将α－淀粉酶固定后，成为________且又有酶活性的制剂。若用吸附法固定时，在装柱后需要用________缓慢冲洗，直至流出液不使淀
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