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植物组织培养课堂笔记
第一章
植物组织培养:在无菌或人工控制的条件下,利用适宜的培养基对离体
的植物进行培养,使其再生成组织或完整的植株。
过程:外植体
脱分化 愈伤组织 再分化 芽、根 植
株 名词解释:
外植体:由植物上切割下来进行培养的器官、组织、细胞。 愈伤组织:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞,多在外植体的切面上产生。 脱分化:已停止分裂的成熟细胞,转变为分生状态并形成愈伤组织的过程。
再分化:脱分化组织再次分化形成具有特点结构和功能的组织的过程。 培养基分类:
培养基固体培养基(添加琼脂)液体培养基(不添加琼脂)震荡培养静止培养旋转培养纸桥培养
组培的分类器官培养组织培养细胞培养原生质体培养胚胎培养 细胞培养:对植物体的单个细胞或小细胞团进行培养的方法。 看护培养:同一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞来使其增值生长。用途是诱导形成单细胞系。 单细胞团 滤纸
活跃分生组织 培养基
平板培养:将悬浮培养的细胞接种到一薄层固体培养基上进行培养的技术。
用途:分离得到单细胞无性系。
操作:培养基冷却到35摄氏度时(尚未固化),将细胞悬浮液与培养基充分混合后倒入培养皿中(1mm左右)(水浴恒温35摄氏度)
细胞直板率:能够分裂长出细胞团的细胞占接种细胞总数的百分率。 悬浮培养:将游离的单细胞或细胞团按一定的细胞密度悬浮在液体培养基中进行液体培养。
细胞全能性:(由强到弱)
顶端分生组织 层间分生组织 侧生分生组织 薄壁组织 厚角组织 输导组织 厚壁组织
植物细胞分裂能力分类:
①始终保持分裂能力:根尖,茎尖及形成层细胞。 ②永久失去分裂能力:筛管,导管,气孔保卫细胞
③通常不分裂,但受到外界刺激可重新分裂:表皮细胞,薄壁细胞。
第二章:培养基的成分和配制
步骤:配培养基 取材 材料消毒 转接
第一节、培养基成分
(一)无机盐 大量元素(>0.5mmol\\L):N P L Ca Mg S 微量元素:Fe B Mn Zn Mo Cu Co Cl
大量元素(Ms培养基)?KNO31900mg\\L?NH4NO31650?KH2PO4170?MgSO4.7H2O 370?CaCl2.4H2O 440微量元素?KI 0.83mg\\L?H3BO36.2?MnSO4.4H2O 22.3?ZnSO4.7H2O 8.6?Na2MoO4.2H2O 0.25?CuSO4.5H2O 0.25?CoCl2.6H2O 0.25(二)有机营养成分
1、糖类:提供C源和能量(蔗糖,葡萄糖,果糖,蔗糖最常用) 2、维生素:常用有Vc、B、B6、B12、烟酸、生物素
3、氨基酸:常用的有甘氨酸,丝氨酸,酪氨酸(水解酪蛋白,水解乳蛋白也时常添加) (三)植物生长调节剂
用量很少,但对外植体生长和分化起决定作用。 影响最显著的是生长素和细胞分裂素。 1. 生长素类:
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