常用蛋白质分子量标准参照物(精)

（五）离子交换层析介质的技术数据 离子交换介质名称 最高载量 颗粒大小（μm） 15 15 24～44 24～44 45～165 45～165 45～165 特性/应用 pH稳定性工作 2～12 100～300 100～300 60mg BSA 干粉 40～120 4～12 0.3 2～12 0.3 1200～1800 1200～1800 6～13 0.2 300 2～9 0.2 300 4～13 0.2 400 2～12 0.2 400 3～12 2～12 0.3 0.3 150 150 2～12 4 1800 耐压 （MPa） 4 最快 流速 (cm/h) 1800 SOURCE 15 Q SOURCE 15 S Q Sepharose H.P. SP Sepharose H.P. Q Sepharose F.F. SP Sepharose F.F. DEAE Sepharose F.F. CM Sepharose F.F. Q Sepharose Big Beads SP Sepharose Big Beads

25mg 蛋白 25mg 蛋白 70mg BSA 55mg 核糖核酸酶 120mg HSA 75mg BSA 110mg HSA 50mg 核糖核酸酶 离子交换 介质名称 QAE Sephadex A-25 最高 载量 1.2mg甲状腺球蛋白 80mgHSA 1.2mg甲状腺球蛋白 80mgHSA 1.1mg IgG 70mg牛羰合血红蛋白230mg核糖核酸酶 8mg IgG 110mg牛羰合 血红蛋白 颗粒 大小 （μm） 干粉 40～120 特性/应用 纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子（Mr>200000）,在工业传统应用上具有重要作用 批量生产和预处理用，分离中等大小的生物分子 （30～200000） 纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子（Mr>200000）,在工业传统应用上具有重要作用 批量生产和预处理用，分离中等大小的生物分子 （30～200000） 纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子（Mr>200 000）,在工业传统应用上具有重要作用 批量生产和预处理用，分离中等大小的生物分子（Mr>200 000），在工作传统应用上具有重要作用 纯化低分子量蛋白、多肽、核苷以及巨大分子（Mr>200 000），在工业传统应用上具有重要作用 批量生产和预处理用，分离中等大小的生物分子 （30～200000） pH稳定性 工作 2～10 耐压 (MPa) 0.11 最快 流速 （cm/h） 475 QAE Sephadex A-50 干粉 40～120 2～11 0.01 45 2～10 0.13 475 SP Sephadex C-25 干粉 40～120 SP Sephadex C-50 干粉 40～120 2～10 0.01 45 1mg甲状 腺球蛋白 DEAE Sephadex 30mg HAS A-25 140mg a-乳清 蛋白 干粉 40～120 2～9 0.11 475 DEAE Sephadex A-50 2mg 甲状 腺球蛋白 110mg HSA 干粉 40～120 2～9 0.11 45 CM Sephadex C-25 1.6mg IgG 70mg牛羰合血红蛋白190mg核糖核酸酶 7mg IgG 140mg牛羰合 血红蛋白120mg核糖核酸酶 干粉 40～120 6～13 0.13 475 CM Sephadex C-50 干粉 40～120 6～10 0.01 45

十二、常用缓冲溶液的配制方法 1． 甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）

X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升 pH 2.0 2.4 2.6 2.8 X 50 50 50 50 Y 44.0 32.4 24.2 16.8 pH 3.0 3.2 3.4 3.6 X 50 50 50 50 Y 11.4 8.2 6.4 5.0 甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）

X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升 pH(20℃) 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 X 5 5 5 5 5 Y 4.070 3.960 3.295 2.642 2.022 pH(20℃) 3.2 3.4 3.6 3.8 X 5 5 5 5 Y 1.470 0.990 0.597 0.263 邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升 3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 pH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升） 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 0.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） 10.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 pH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升） 10.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 4.2 4.4 4.6 4.8 5.0 8.28 8.82 9.35 9.86 10.30 11.72 11.18 10.65 10.14 9.70 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 17.39 18.17 18.73 19.15 19.45 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55 Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。 Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。 C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。 4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH 钠离子浓度 （mol/L） 2.2 3.1 3.3 4.3 5.3 5.8 6.5 0.20 0.20 0.20 0.20 0.35 0.45 0.38 柠檬酸（克） 氢氧化钠(克) 盐酸（毫升） 最终体积C6H8O7·H2O 210 210 210 210 245 285 266 NaOH 97% 84 83 83 83 144 186 156 HCl（浓） 160 116 106 45 68 105 126 （升） 10 10 10 10 10 10 10 ①①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L） pH 0.1 mol/L 柠檬酸 （毫升） 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 18.6 17.2 16.0 14.9 14.0 13.1 12.3 11.4 0.1 mol/L 柠檬酸钠 （毫升） 1.4 2.8 4.0 5.1 6.0 6.9 7.7 8.6 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 pH 0.1 mol/L 柠檬酸 （毫升） 8.2 7.3 6.4 5.5 4.7 3.8 2.8 2.0 0.1 mol/L 柠檬酸钠 （毫升） 11.8 12.7 13.6 14.5 15.3 16.2 17.2 18.0